急性脑挫伤患者脑脊液神经元特异性烯醇化酶的变化及意义

目的 :探讨急性脑挫伤患者脑脊液中神经元特异性烯醇化酶 (Neuron -specificenolase,NSE)的变化。方法 :用放射免疫双抗体夹心法对 2 4例广泛脑组织挫伤组 ,30例局部脑挫伤及正常对照组脑脊液NSE含量进行测定。并测定各组冬氨酸转氨酶 (Aspartatetranscarbamoylsse ,AST)水平。结果 :弥漫性脑挫伤患者脑脊液NSE浓度为 (2 5 .43± 5 .6 1)ng/ml,局灶性脑挫伤组为 (14.6 1± 7.5 2 )ng/ml,对照组为 (7.81± 3.2 1)ng/ml,脑挫伤组明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,且弥漫性脑挫伤组与局灶性脑挫伤组差异显著 (P <0 .0 5 )。脑挫伤组中AST明显高于对照组 ,但AST在广泛脑挫伤组与局部脑挫伤组中无明显差异。结论 :急性脑挫伤患者的NSE、AST水平升高 ,且NSE与脑挫伤体积相关 ,NSE可反映挫伤及其严重程度     

慢病毒携带shRNA对宫颈癌细胞中HPV16型E6表达的抑制作用

目的研究慢病毒携带的短发夹状干扰RNA(short hairpin RNA, shRNA)对宫颈癌Caski细胞中人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)16型E6表达的抑制作用.方法将靶向HPV16型E6的shRNA表达序列克隆到改建的慢病毒表达载体PLL3.7中,经限制性酶切鉴定和测序后,与3种包装质粒混合,以Lipofectamine 2000包裹后转染293FT细胞,72 h后收取含病毒的上清液并感染宫颈癌Caski细胞,感染48 h后加入G418筛选阳性克隆.每天对阳性细胞克隆进行细胞计数;提取细胞总mRNA,进行RT-PCR反应.结果与对照组相比HPV16型E6的表达降低70%,宫颈癌Caski细胞生长速度减慢50%.结论慢病毒携带的短发夹状干扰RNA能干扰宫颈癌细胞中HPV16型E6的表达并有抑制癌细胞生长的作用.     

重庆地区地中海贫血基因突变类型分析

目的了解重庆地区地中海贫血患者基因突变类型及分布,以指导优生优育。方法采用聚合酶链式反应(PCR)和膜杂交术,进行α-地中海贫血和β-地中海贫血基因检测。结果 2012年9月至2013年9月共检出349例地中海贫血患者,其中α-地中海贫血患者125例,α-地中海贫血患者的基因突变类型以缺失为主,缺失类型主要为东南亚型缺失--SEA/αα(占73.60%)和右侧缺失-3.7/αα(占19.20%)。检出β-地中海贫血患者211例,基因突变热点分别为CD17(A→T)(29.38%)、CD41-42(-TCTT)(28.91%)、IVS-Ⅱ-654(C→T)(27.49%)。α-地中海贫血兼β-地中海贫血13例。结论了解重庆地区地中海贫血基因突变类型及分布可以为该地区地中海贫血的遗传咨询和临床诊疗提供有价值的信息。     

结核感染患者外周血中性粒细胞自噬水平的研究

目的探讨结核感染患者外周血中性粒细胞自噬水平。方法根据结核病诊断标准,将患者分为健康对照组(16例)和活动性结核组(24例),收集患者外周血,采用流式细胞技术分别检测健康对照组和活动性结核组中性粒细胞和单个核细胞的自噬状态。分离外周血中性粒细胞,采用Trizol法提取总RNA,经逆转录实时荧光定量PCR,利用2-△△Ct计算Beclin1表达的相对定量。结果活动性结核组与健康对照组年龄差异无统计学意义(P=0.165 5,P0.05);活动性结核组男性比例(79.2%)明显高于健康对照组(37.5%)。活动性结核组中性粒细胞自噬水平显著低于健康对照组(P=0.013 8,P0.05),而单个核细胞两组差异无统计学意义(P=0.784 2,P0.05);活动性结核组中性粒细胞Beclin1△Ct=-1.254±0.40明显低于健康对照组△Ct=-0.105±0.48,差异有统计学意义(P0.001)。结论结核感染患者外周血中性粒细胞的自噬水平降低,且自噬相关基因Beclin1mRNA的表达下调,中性粒细胞的自噬水平可能与结核病的发生、发展密切相关。     

系统性红斑狼疮患者静脉血BCMA和CD138~+浆细胞的研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者和健康者静脉血B淋巴细胞成熟抗原(BCMA)表达和CD138+浆细胞数量的差异。方法将40例SLE患者血液标本作为SLE组,30例健康人血液标本作为对照组,采用荧光定量实时聚合酶链反应及酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测BCMA的表达,流式细胞技术检测静脉血CD138+浆细胞数量。结果 SLE组患者静脉血中BCMA mRNA水平、蛋白含量以及CD138+浆细胞的数量明显高于对照组(P<0.05)。结论 SLE患者中浆细胞数量的增多可能与BCMA高表达相关。     

建立检验医学实习带教新模式的探索

临床实习是医学检验教学工作中理论联系实际的重要阶段，因为这个阶段是理论阶段与临床工作的桥梁。在此阶段医学生能够把所学的理论知识与临床紧密相结合，使理论知识直接应用于临床，专业知识得到了有效的巩固与提高。在此过程中，医学生逐渐锻炼了分析问题、解决问题的能力，毕业后能够独自担当检验师的工作。但随着临床检验医学的发展，临床检验工作的内涵发生了改变，现代化仪器在检验科的大量投入使用，使检验工作者的工作任务和工作形式发生了根本变化，因而对检验医学实习生的带教也要随之发生改变，要求对其内涵重新认识，培养实习生多样化的专业技能。现将本科室几年来带教实习生的探索模式总结如下。     

抑制绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体的构建

目的:构建抑制增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达的慢病毒表达载体。方法:选取EGFP的19nt特异性序列,构建针对EGFP的shRNA,用XbaⅠ、XhoⅠ双酶切后定向克隆到慢病毒表达载体pLL3.7中,用包装的慢病毒液感染细胞,用荧光显微镜观察EGFP基因在不同细胞的表达情况。结果:干扰序列正确克隆至含U6启动子的慢病毒载体中,慢病毒感染Hela及J558L细胞后,可有效抑制细胞中EGFP的表达。结论:构建的慢病毒系统有效抑制了EGFP的表达,为后续的基因功能研究提供了有利工具。     

可溶性转铁蛋白受体及其在临床诊断中的价值

可溶性转铁蛋白受体（ｓＴｆＲ）是血清中转铁蛋白受体的水解片断，其表达是由铁在ｍＲＮＡ水平上来调节，与铁蛋白其同反映红细胞生成速率和铁贮状态。ｓＴｆＲ可鉴别诊断小细胞性贫血、慢性炎症继发性贫血等疾病，并可监测肾衰性贫血的药物治疗效果。     

荧光定量PCR技术及其在临床上的应用

荧光定量PCR(FluorescenceQuantitivePolymeraseChainReactionFQ PCR)技术是在 90年代末期发展起来的一项全新技术。经过几年的实践及临床应用 ,已获得了较为稳定的检测效果。作为一种体外基因扩增技术 ,它能敏感地检测初始模板浓度及基因变异等情况。它的出现 ,克服了传统PCR技术普遍存在的假阳性及不能定量等问题 ,使得PCR技术更广泛地应用于临床 ,在监测患者病情、预后、指导用药等方面有着广阔的应用前景。本文概述了FQ PCR技术及其在临床上的应用 ,即常见病原体的检测[1,3 ] 及其在分子遗传学和法医学中的应用     

重庆地区不同育龄围产期女性B族溶血性链球菌的研究

目的探讨该地区不同育龄女性围产期B族溶血性链球菌(GBS)感染情况。方法采用聚合酶链式反应(PCR)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术,对该院2015年1月至2016年1月3 206例标本进行GBS核酸检测。结果 GBS阳性标本226例,阴性2 980例,感染率为7.05%,20~25岁组为6.88%,26~30岁组为6.51%,31~35岁组为7.50%,36~40岁组为11.46%,40岁以上组为11.11%,其中30~40岁组感染率最高。不同组别之间两两比较,差异无统计学意义(P0.05)。该地区育龄女性与北京、南京、上海等地区比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论对该地区34~37周围产期女性开展GBS筛查,降低感染率,为围产期保健提供临床价值。