脐血单个核细胞体外扩增的实验研究

目的 探讨含有细胞因子的无血清培养基对脐血单个核细胞(MNC)体外培养后的扩增情况和用于移植的安全性.方法 从新鲜脐血中分离出的MNC,在含细胞因子的无血清培养体系中培养.分别将培养前和培养第10天时的造血细胞进行细胞计数、细胞活力分析、集落分析、流式细胞仪检测表面标记、彗星试验分析DNA的损伤情况、无菌性分析及移植至NOD/SCID小鼠体内等项研究.结果 经过体外短期培养,脐血中MNC、CD34+、CD133+、CD34+CXCR4+及CD34+ VLA-4+细胞扩增倍数均比培养前增高(P<0.05);半固体培养基可支持多系集落的生长;培养前和培养第10天时脐血细胞DNA损伤率均低于5%;无菌性分析提示细胞未受污染.将体外扩增后的脐血造血细胞移植入NOD/SCID小鼠体内,与新鲜脐血移植相比,小鼠的存活时间及植入能力的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 脐血造血细胞体外扩增是解决脐血造血细胞数量不足的有效方法.脐血造血细胞经短期培养能为造血干细胞移植提供安全而具植入能力的造血细胞.     

异基因造血干细胞移植后并发巨细胞病毒间质性肺炎的防治（附3例报告）

目的：通过对异基因造血干细胞移植(allo—HSCT)后并发巨细胞病毒间质性肺炎(CMV-IP)的观察，以提高对IP的诊治水平。方法：对重型再生障碍性贫血—1型(SAA—1)、急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性髓细胞白血病(M2a)各1例，行allo—HSCT后并发CMV—IP的临床观察、巨细胞病毒抗原(CMV—Ag)的检测、血气和胸片的动态观察，采用更昔洛韦(Gancilovir，GCV)和大剂量的免疫球蛋白的应用，呼吸机辅助通气，观察其疗效。结果：所有患均有不规则发热和低氧血症，早期无肺部阳性体征和X—ray表现，2例正规治疗治愈，1例死于1—型呼吸衰竭。结论：学期诊断IP十分重要，更昔洛韦和大剂量的免疫球蛋白有显的疗效。     

以氟达拉滨或抗胸腺细胞球蛋白为基础的非清髓造血干细胞移植治疗血液病移植物抗宿主病的比较

移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后的主要并发症,而慢性GVHD(cGVHD)是allo-HSCT后期的主要死亡原因[1].非清髓性造血干细胞移植(NST)预处理方案的减弱和供受者混合性嵌合体(MC)的形成造成了供受者的免疫耐受,从而造成急性GVHD(aGVHD)的发生表现为aGVHDR的特征[2-3].     

人脐血造血干/祖细胞的生物反应器大规模扩增及移植实验

目的 利用生物反应器大规模扩增人脐血造血干/祖细胞,并通过动物移植实验检验该方法的有效性.方法 采集抗凝脐血10份,分离出单个核细胞(MNC),分别进行生物反应器扩增培养和静态扩增培养.检测扩增前后细胞表面CD34、CD38、CD133、CD184和CD62L分子的表达,并进行造血干/祖细胞集落的培养.取非肥胖糖尿病重症联合免疫缺陷小鼠,以X射线照射后,分为4组,其中MNC组小鼠注射未经扩增培养的MNC;静态扩增组小鼠注射经过静态扩增培养的细胞;反应器扩增组小鼠注射经过生物反应器扩增培养的细胞;空白对照组小鼠注射生理盐水.移植后6周处死存活小鼠,收集骨髓细胞,检测其中CD45+、CD3+、CD19+和CD33+细胞的含量以及人特异的Cart-Ⅰ和Alu基因的表达.结果 生物反应器扩增前MNC为(1.2～2.8)×108个,扩增后为(3.7～12.6)×108个,扩增后的细胞数明显高于静态扩增培养者(P<0.01).经生物反应器扩增后所形成的红系集落形成单位、粒-巨噬细胞集落形成单位数明显高于经静态扩增者(P<0.05).移植6周后,空白对照组小鼠均死亡,MNC组存活率为35%,静态扩增组存活率为30%,反应器扩增组存活率为62.9%,后者明显高于前二者(P<0.05).各组存活小鼠骨髓细胞中均检测到Alu基因和Cart-Ⅰ基因的表达以及人源CD33+、CD45+、CD3+及CD19+细胞.结论 利用生物反应器可大规模扩增人脐血造血干/祖细胞,所得细胞能植入小鼠体内,并能获得造血功能重建.     

ABO血型不合异基因造血干细胞移植

目的　探讨ABO血型不合异基因造血干细胞移植 (Allo -HSCT)的疗效及并发症。方法　 6例患者中 1例ABO血型主要不合 ,5例次要不合 ;2例脐血 ,1例外周血干细胞 ,3例骨髓联合外周血干细胞 ;对主要不合者骨髓用重力沉降法去除红细胞 ,对次要不合骨髓以离心分离方法去除血浆 ,外周血造血干细胞及脐血未经处理直接输注。结果　 6例均成功植入 ,仅在输注干细胞时发生短暂轻微溶血 ,而无延迟性溶血反应及移植后红系造血延迟。结论　ABO血型不合可顺利进行Allo -HSCT ,获得干细胞的植入 ,移植前后防止溶血发生至关重要。     

非亲缘异基因造血干细胞移植后出血性膀胱炎的防治策略

目的探讨常规预防方案干预下,非亲缘异基因造血干细胞移植(Allogenetic hematopoietic stem cell trans-plantation,Allo-HSCT)后出血性膀胱炎(hemorrhagic cystitis,HC)的发病情况、危险因素和有效的防治方法。方法对10例恶性血液病患者行非亲缘Allo-HSCT的回顾性分析,移植过程中均进行常规的HC、移植物抗宿主病(graft versus host dis-ease,GVHD)和巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染的预防。分析移植后HC发生的特点及与移植类型、其他临床特征的关系和防治效果。结果共8例发生HC(8/10),平均发病时间为26.88天,平均病程为19.3天;其中5例发生CMV感染同时合并aGVHD,1例仅出现aGVHD,另2例两者皆无。经治疗后7例完全缓解,1例死亡。结论非亲缘Allo-HSCT在采取充分的预防措施后,HC多为早期发生,程度较轻,治疗效果良好;其发病与供者类型、HLA的匹配程度、aGVHD和CMV感染密切相关。     

11例慢性淋巴细胞白血病合并第二肿瘤的临床分析

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)合并第二肿瘤临床特征和预后。方法 回顾性分析2015年8月—2021年10月我院收治的58例CLL患者，其中有11例合并第二肿瘤，47例无合并第二肿瘤，分析两组病例的临床特征及其对预后的影响。结果 CLL合并第二肿瘤和无合并第二肿瘤患者在年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白水平、淋巴细胞计数、血小板计数、乳酸脱氢酶(LDH)、β₂-微球蛋白(β₂-MG)水平、分期、单个基因缺失类型之间比较差异无统计学意义，但CLL合并第二肿瘤患者基因缺失个数较无合并第二肿瘤CLL患者组高(χ²=11.17,P=0.03)，且总生存期较短。结论 CLL合并第二肿瘤患者常伴有多个基因缺失，且预后差，当CLL患者伴有多个基因缺失时，在诊治过程中需警惕有无合并第二肿瘤。