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目的:研究少汗型外胚层发育不良症 EDA‐A1基因突变体对人脐静脉内皮细胞(ECV )周期和增殖活性的影响。方法构建 EDA‐A1基因编码序列(CDS)突变体和野生型的真核表达载体 pcDNA3.1(‐)‐EDA‐A1‐M /W ,转染人脐静脉内皮细胞,逆转录 PCR(RT‐PCR)扩增 EDA‐A1基因,蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测 EDA‐A1蛋白表达,M TT 法、流式细胞术检测EDA‐A1基因突变体对 ECV 细胞增殖和细胞周期的影响。结果 RT‐PCR 、Western blot 结果显示,野生型组和突变体组 ECV细胞表达 EDA‐A1基因及其蛋白,而空质粒转染组[pcDNA3.1(‐)]和空白对照组细胞无表达。与对照组(空质粒租)相比,突变体组 ECV 细胞增殖活性下降,生长抑制率为45.70%(P<0.01),野生型细胞增殖活性无明显改变(P>0.05)。突变体组中有更多细胞进入 G0/G1期、S 期;野生型组 S 期细胞增多,G2/M 期细胞明显减少(P<0.05)。结论突变体和野生型 EDA‐A1基因对 ECV 细胞增殖和细胞周期有不同的生物学功能。 相似文献
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目的 探讨老年人龋坏组织中变形链球菌(MS)和乳酸杆菌(LB)在致龋过程中的特点.方法 136例龋坏组织样本按患者年龄、患牙龋坏程度和龋坏活跃性分组,利用选择性培养基对MS及LB行分离、培养和鉴定.统计两种细菌在不同组别中细菌菌落形成单位(CFU)计数及两种细菌致龋样本例数.结果 在老年龋组、严重龋组(中、深龋)和活动期龋组中,MS与LB的CFU计数均显著升高(均P<0.05);MS与LB共同致龋样本数在老年龋组中显著升高(P<0.05),并随龋坏程度的加重而升高(P<0.05).结论 在老年龋病及中、深龋中,MS与LB为互生关系,有明显共同致龋作用. 相似文献
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目的 乳腺癌是临床常见恶性肿瘤之一,目前缺乏有效肿瘤标记物,YKL-40与众多肿瘤的发生、发展密切相关.本研究探讨放疗前后血清YKL-40浓度与乳腺癌患者临床分期、病理类型及分子分型之间的关系以及根据放疗前后血清YKL-40浓度变化评价患者预后的价值.方法 采用酶联免疫吸附试验测定2011-06-01-2012-12-01甘肃省肿瘤医院放疗科的100例乳腺癌患者放疗前后血清YKL-40浓度,比较YKL-40浓度在TNM分期、病理类型、分子分型间及临床预后放疗前后的变化.结果 乳腺癌患者放疗前后血清YKL-40浓度分别为(102.17±22.04)和(91.67±29.18) ng/mL,Z=-3.920,P<0.001;Ⅰ期患者放疗前YKL-40为(93.65±23.79) ng/mL,放疗后为(78.44±18.21) ng/mL,t=1.766,P=0.099;Ⅱ期患者放疗前YKL-40为(96.62±24.81) ng/mL,放疗后为(86.03±16.58) ng/mL,t=2.619,P=0.012;Ⅲ期患者放疗前YKL-40为(115.86±15.70) ng/mL,放疗后为(92.64±21.87) ng/mL,t=3.302,P=0.004;Ⅳ期患者YKL-40放疗前为(125.55±20.33) ng/mL,放疗后为(109.21±16.83) ng/mL,t=2.450,P=0.032;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期组间比较,放疗前F=8.367,P<0.001;放疗后F=7.507,P<0.001.Luminal A型患者放疗前YKL-40为(102.16±29.31) ng/mL,放疗后为(87.16±23.59) ng/mL,t=0.814,P=0.422;Luminal B型患者放疗前YKL-40为(103.74士25.97)ng/mL,放疗后为(95.69±25.33) ng/mL,t=1.046,P=0.305;三阴型患者放疗前YKL-40为(107.38±16.81) ng/mL,放疗后为(98.91±17.59) ng/mL;t=1.039;P=0.321;HER-2阳性型放疗前后分别为(97.07±23.68)和(86.47±16.63) ng/mL,t=3.096,P=0.005;各分子分型组间比较,放疗前F=0.558,P=0.644,放疗后F=1.610,P-0.912.浸润性小叶癌患者YKL-40放疗前为(112.23±20.94) ng/mL,放疗后为(106.29±18.13) ng/mL,t=1.348,P=0.201;浸润性导管癌患者YKL-40放疗前为(97.89士20.30) ng/mL,放疗后为(96.03±18.69) ng/mL,t=0.630,P=0.530;组间比较,放疗前差异有统计学意义,F=4.729,P=0.032;放疗后差异无统计学意义,F=3.655,P=0.059.12例乳腺癌患者放疗后血清YKL-40浓度较放疗前升高,88例放疗后血清YKL 40浓度较放疗前降低,2组在随访期内(36个月)远处转移率分别为50.0%(6/12)和13.6%(12/88),x2 =7.157,P=0.007;2组局部复发率分别为66.7%(8/12)和18.6%(16/88),x2=11.081,P=0.001.2组1、2、3生存率分别为91.7%、83.3%、66.7%和97.7%、93.2%、86.4%,x2=4.050,P=0.044.结论 乳腺癌患者血清YKL-40浓度放疗前高于放疗后,且与乳腺癌分期、病理类型及分子表型具有一定的相关性,其血清浓度值放疗后升高对判断疾病复发、转移有一定的价值. 相似文献
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目的:初步研究可摘局部义齿(RPDs)不同基托材料对口腔念珠菌的定植的影响。方法:临床随机选择RPDs修复患者147例。其中树脂基托义齿(A组)58例,钴铬合金铸造基托义齿(B组)63例,纯钛及钛合金铸造基托义齿(C组)26例。吐唾法取样,用CHROMagar培养基鉴定念珠菌菌种。培养基中念珠菌菌落计数为每个样本的念珠菌检出强度。通过统计学方法,比较3组不同基托材料义齿戴用人群念珠菌检出率和检出强度的差异。结果:147例不同基托材料义齿戴用人群中检出的念珠菌包括白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌3个菌种。A、B、C组白色念珠菌和非白色念珠菌检出率无显著差异。白色念珠菌的菌落形成单位数,A组显著高于B、C组(P〈0.05);B组显著高于C组(P〈0.05)。非白色念珠菌间的菌落形成单位数无明显差异。结论:戴不同材料义齿患者口腔除了能检出白色念珠菌,还可检出非白色念珠菌;口腔念珠菌的菌落形成单位数与义齿基托材料密切相关,钛及钛合金基托义齿应为预防义齿性口炎的首选义齿。 相似文献
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目的 采用实时荧光定量PCR法检测p53、ki-67、bcl-2、bax基因在子宫内膜癌及正常人官腔脱落细胞中的表达变化水平,探讨官腔脱落细胞中p53、ki-67、bcl-2、bax基因的表达变化在子宫内膜癌早期诊断中的意义.方法 收集健康志愿者及子宫内膜癌患者官腔脱落细胞样本共90例;提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测目的基因的表达变化水平;所有实验数据采用SPSS 17.0软件进行统计学分析.结果 荧光定量PCR结果显示,p53基因在正常人官腔脱落细胞中未检测到表达,随着恶性程度升高,表达量显著升高(P<0.01),ki-67的表达在正常人中表达量最低,随着恶性程度升高,表达量逐渐升高(P<0.05),bcl-2基因的表达逐渐降低(P<0.05),bax/bcl-2值随着恶性程度增高而降低.结论 p53、ki-67、bcl-2、bax基因的表达量在子宫内膜癌发生发展过程中呈一定的变化趋势,提示p53、ki-67、bcl-2、bax基因可作为子宫内膜癌早期诊断的分子标志物. 相似文献
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目的:调查兰州市产妇念珠菌的定殖以及母婴间念珠菌的传播状况.方法: 采集产妇的阴道分泌物及口腔分泌物样本(共104×2 例),及其新生婴儿的口腔分泌物样本(共104 例).采用CHROMagar念珠菌显色培养基进行培养、分离及鉴定,同时应用分子生物学技术对结果进行验证鉴定.结果:312 例样本(母亲104×2,新生儿104)中81 例分离培养出念珠菌,产妇阴道念珠菌检测阳性率39.42 %(41 例),产妇口腔念珠菌阳性率33.65%(35 例),其中21.15%(22 例)阴道与口腔同时阳性; 新生儿口腔念珠菌培养阳性率为4.81%(5 例).检出阳性样本中菌种分布为,白色念珠菌53 株,光滑念珠菌33 株,克柔念珠菌2 株,热带念珠菌1 株.有2 对母婴同时分离出白色念珠菌,经PCR检测,其基因型相同.结论:兰州市新生儿念珠菌检出率以及母婴间念珠菌的传播率较其他地区高.新生儿念珠菌感染与念珠菌的水平传播和垂直传播都相关.监控医院内念珠菌的传播及预防母亲产前阴道念珠菌感染可减少新生儿念珠菌感染的可能性. 相似文献
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目的 检测抑癌基因RUNX3 启动子区CpG 岛甲基化状态及其在 BTCC 中 mRNA 和蛋白表达水平.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation - specific PCR,MSP)技术检测 BTCC 中RUNX3 基因启动子区域甲基化状态,RT - PCR 和 Western blot 法分别检测其 mRNA 和蛋白表达水平.结果 RUNX3基因在正常膀胱组织中未发生甲基化,而在 BTCC 组织中甲基化频率占46.9%(15/32),并且随着肿瘤分级、分期的增加,其甲基化水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.01).在15例启动子异常甲基化的癌组织标本中,14 例同时伴有 RUNX3 基因表达缺失或下调,二者存在明显的相关性(r=0.6472,P=0.012).RUNX3 mRNA 和蛋白表达在正常膀胱组织和 BTCC 组织分别为93.8%(30/32)、34.4%(11/32),二组间表达差异有统计学意义(P相似文献
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目的探讨DNA错配修复基因启动子区CpG岛甲基化状态及其在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达。方法应用MSP技术检测膀BTCC中hMLH1、hMSH2和hMSH3基因启动子区甲基化状态,RT-PCR法检测其mRNA表达水平。结果36例BTCC组织中hMSH1、hMSH2的甲基化阳性率分别为38.9%(14/36)、52.8%(19/36),所有标本中均未发现有hMSH3启动子甲基化。hMLH1、hMSH2、hMSH3 mRNA在BTCC中表达率分别为47.2%(17/36)、38.9%(14/36)、16.7%(6/36),在正常组织中分别为22.2%(8/36)、63.9%(23/36)、0%(0/36),差异均有统计学意义(P〈0.01),并且随肿瘤病理分级的增加呈下降趋势(P〈0.05),均与临床分期不相关(P〉0.05)。结论hMLH1、hMSH2和hMSH3基因启动子异常甲基化可能导致该基因转录表达失活,使其mRNA表达减少甚至缺失,这可能是导致BTCC发生、发展的原因之一。 相似文献
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目的:本研究将PCR技术应用于口腔念珠菌检测中,寻找出一种能够快速、准确、有效检测口腔念珠菌的方法。方法:收集口腔临床唾液样本100例,科玛嘉显色培养基进行培养,同时应用PCR方法对100例临床样本进行检测鉴定。结果:传统念珠菌培养方法的检出率为35%;应用两对引物,PCR方法的检出率分别为68%和49%。传统的念珠菌检测方法耗时长,特别是培养法,需时48hrs;应用PCR方法对念珠菌进行检测,只需要5hrs,且阳性检出率和准确性较高。结论:PCR方法快速敏感、特异性高,相较于念珠菌传统培养方法,是一种更加简便理想的检测方法。 相似文献