人野生型DNA聚合酶β在NIH3T3细胞中的定位

目的：研究人野生型DNA聚合酶β(wtDNA polβ)在NIH3T3细胞内的定位。方法：将携带人wtDNA polβ的真核绿色荧光表达载体pEGFP—C3—polβ,用脂质体介导的方法转染NIH3T3细胞株,用荧光倒置显微镜观察转染细胞,观察wtpEGFP—C3—polβ融合基因表达。以转染空质粒pEGFP—C3的NIH3T3细胞为对照。结果：转染细胞均有GFP表达,说明转染成功,转染pEGFP—C3—polβ的细胞胞核荧光强度较胞浆强,而空质粒转染细胞胞浆胞核荧光强度无差别。结论：wtDNA polβ在NIH3T3细胞中定位于胞核内。     

生物素标记法分析MCF-10A细胞质膜蛋白质

 目的 优化细胞膜蛋白分离纯化技术,以期实现快速、高效分析细胞膜蛋白质。方法 本文以乳腺细胞系MCF-10A为模型,用sulfo-NHS-LC-biotin标记完整的活细胞,使细胞表面蛋白生物素化,细胞裂解后利用链亲和素对膜蛋白进行分离富集,再洗脱膜蛋白,达到分离纯化的目的。利用液相层析偶合串联质谱技术（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）鉴定提取得到MCF 10A膜蛋白。结果 sulfo-NHS-LC-biotin浓度为0.2 mg/mL时得到的标记纯化膜蛋白最多,可作为标记最适浓度。利用这种方法鉴定出256个蛋白质,生物信息学分析表明其中膜蛋白占63%,比传统膜蛋白分离纯化方法得到的结果好。结论 这种方法省去常规分离膜蛋白时所需的超速离心,具有操作简单、可行性高、平行性高的特点,有望用于规模化肿瘤膜蛋白的差异比较,为肿瘤早期诊断及治疗提供新的靶标。     

解热镇痛药在儿科的合理应用

解热镇痛药是儿科急诊的常用药物。由于小儿生理解剖特点，药物的吸收、分布、代谢和排泄与成年人有较大差异。用药不当会影响药物的有效性，甚至产生潜在的毒性。因而在应用解热镇痛药时应结合儿科特点，选用适宜制剂，确定正确剂量，注意配伍，合理用药，减少不良反应。１儿科常用的解热镇痛药分类及相应制剂生长发育是小儿不同于成年人最根本的生理特点，在这个时期内选用的药物在疗效方面应确切明显，在使用方面应有可靠的安全性，毒副作用少，在剂型方面应是儿童乐于服用，便于准确掌握剂量的儿童专属剂型，如滴剂、糖浆剂、口服液、混…     

静脉注射SCAD重组腺病毒减轻自发性高血压大鼠心肌肥厚和纤维化

目的:研究短链酰基辅酶A脱氢酶(short-chain acyl-coenzyme A dehydrogenase,SCAD)重组腺病毒(SCAD recombinant adenovirus,Ad-SCAD)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)心肌肥厚和纤维化的...     

大班授课中实施PBL的方法探索

以问题为导向的学习方法(problem-based learning,PBL)引导学生的思考,促进小组合作,使学生成为自主学习者。PBL教学法拓展和延伸了学生学习的时间和空间。PBL教学法已成为当前医学教育过程中的重要教学方法。在师资和硬件环境有限的情况下,尝试在大班额中开展PBL教学,教师把理论课内容适当压缩,留出1个学时用做展示和讨论。学生在课下分组讨论病例,把问题集中后适当整合,重新分发给各小班,各个小班针对拿到的问题再讨论、通过自学,总结相关知识点,再回到课堂,以PPT的形式给大班同学汇报、讨论,最后进行一个小结。这一方法得到了学生的认可,提高了学生的学习兴趣和知识获取的主动性,是在大班额限制下的有益探索。     

儿童血液病102例骨髓细胞学调查

目的 对儿童血液病骨髓细胞学调查结果进行观察分析.方法 选择我院近年来收治的102例儿童血液病患者作为研究对象,回顾性分析其骨髓血细胞学结果,并对调查结果进行观察分析.结果 不同年龄段儿童血液系统疾病发生率:肝大患者占43.1％,贫血占38.2％,出血占39.2％,发热占40.2％.结论 细胞形态学改变是血液病学的重要诊断标准,其有助于血液病的诊断,在血小板疾病诊断中有着显著的临床价值.     

同种和异种血管内皮细胞的培养及其在抗肿瘤血管治疗中的作用

[目的]建立简单高效的同种和异种血管内皮细胞的培养以及探讨其在抗肿瘤血管治疗中的作用. [方法]1周龄内BALB/C小鼠的肺组织运用组织块法得到原代新生小鼠肺微血管内皮细胞(Pulmonary Microvascular Endothehal Cells,PMVECs),作为同种抗原;人新鲜脐静脉内灌注0.25%胰蛋白酶消化获得原代人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVECs),作为异种抗原,均用内皮细胞培养基(Endothelial Cell Medium,ECM)进行培养.通过倒置显微镜,免疫组织化学、RT-PCR鉴定,并用液氪冻融、-80℃冻融、煮沸、超声等方法比较制备抗原.[结果]成功原代培养出新生小鼠PMVECs和人HUVECs,vWF(Von Willebrand factor)、CD144(VE-Cadherin)和CD31(PECAM21)免疫组化表达阳性,RT-PCR检测vWF和CD144有特异性条带产生,通过几种方法比较得出液氮冻融制备抗原方法简单,浓度高.[结论]新生小鼠PMVECs和人HUVECs的原代培养方法简便、可靠,高效,保持了血管内皮细胞的结构和功能,且运用液氮冻融法获得纯度较高的抗原,为进一步研究同种PMVECs和异种HUVECs在抗肿瘤血管治疗中奠定了基础.     

浅析青年教师如何成为优秀教师

我们每个人在求学过程中都遇到过众多老师,优秀老师的身体力行、谆谆教诲对学生们的成长会产生深远的影响。目前,多数高等学校专任教师中35岁以下的年轻教师约占40％。年轻教师刚刚走上教学岗位,亟须不断完善自我,尽快成长为一名优秀教师,以充分发挥自身的社会价值。那么,年轻教师如何才能尽快完善自我,成长为一名优秀教师呢？