食管癌突变型DNA 聚合酶β对EC9706细胞影响的初步研究*

目的:建立过量表达食管癌突变型（点突变型和缺失突变型）DNA聚合酶β（DNAPolymeraseβ,polβ ）的EC9706细胞系,并观察其生物学特性的变化。方法:根据GenBankDNApolβ的cDNA 序列设计引物,运用PCR 方法,从质粒pcDNA 3.1-polβ中扩增出点突变和缺失突变型的DNApolβ基因,作为目的片段,定向克隆至pEGFP-N3 真核绿色荧光蛋白表达载体,获得点突变和缺失突变型的重组真核表达载体pEGFP-N3-polβ。采用脂质体转染的方法,将两种突变型的pEGFP-N3-polβ转染EC9706细胞系,荧光倒置显微镜观察其细胞定位,绘制生长曲线,流式细胞仪测定细胞周期。结果:成功构建了点突变型和缺失突变型pEGFP-N3-polβ重组真核表达载体,荧光倒置显微镜结果显示缺失突变型的DNApolβ表达以细胞胞浆为主,点突变型以细胞胞核为主,而且缺失突变型的细胞生长较对照组明显减慢（P<0.05）,点突变型与对照组相比则无明显差异（P>0.05）;缺失突变型的DNApolβ还可使EC9706细胞的S期细胞明显减少（P<0.05）,而点突变型轻度减少（P<0.05）。 结论:成功建立了稳定高表达人点突变型和缺失突变型DNApolβ的EC9706细胞系,外源点突变型和缺失突变型DNApolβ在食管癌EC9706细胞表达后可以改变其生物学特性,对研究食管癌的发病机制具有重要意义。      

新生小鼠肺微血管内皮细胞的培养和抗原制备

目的:建立简单有效的新生小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)的培养和抗原制备的方法.方法:用1 wk龄内BALB/c小鼠的肺组织进行PMVEC的原代培养并传代,通过倒置显微镜、免疫组织化学鉴定,并用冻融、煮沸、超声等方法比较制备抗原.结果:体外培养的新生小鼠PMVEC呈梭形或多角形,形成单层后呈典型的铺路石样排列,并可见管腔形成,获得的血管内皮细胞纯度较高,第Ⅷ因子相关抗原(ⅧF-AS)和CD31表达阳性,成功建立了PMVEC的原代培养方法.通过几种方法比较出超声破碎法制备抗原方法简单浓度高.结论:PMVEC的原代培养方法简便、可靠,保持了血管内皮细胞的结构和功能,且运用超声破碎法获得纯度较高的抗原,为进一步研究PMVEC在抗肿瘤血管治疗中奠定了基础.     

地塞米松致过敏性休克1例

患者,女,32岁,昝38周,第1胎,无产兆,因贫血住院。住院后给予输血治疗,输血前给予地塞米松10mg入壶后,患者感觉全身瘙痒,随后出现头晕、面色苍白、大汗淋漓、呼吸急促并伴有恶心、呕吐。立即使患者取平卧位,测血压80／46mmHg,脉搏130次／min,呼吸30次／min。立即给予0．1％肾上腺素0．5nd皮下注射,氧气吸入,约0．5h后症状缓解。     

不同干燥方式对颗粒粉体性质的影响

目的 探究不同干燥方式对颗粒粉体性质的影响。方法 采用相同的处方进行制粒,采用真空干燥,烘箱干燥及流化床干燥,测定不同干燥方式所得颗粒的流动性指数,综合评价不同干燥方式所得颗粒的粉体性质。结果 三者中烘箱干燥产物的流动性最好,可压性无明显区别。结论 不同干燥工艺造成了干燥产物粉体性质的差异。     

玉米须总黄酮抗炎镇痛及对急性痛风性关节炎的改善作用研究

目的 研究玉米须总黄酮抗炎镇痛及对家兔急性痛风关节炎的改善作用。方法 预ig给予小鼠玉米须总黄酮（2.12、1.06、0.53 g/kg）7 d,进行耳肿胀实验、热板实验和扭体实验,观察小鼠耳肿胀度、出现舔足时间、出现扭体时间及扭体次数;预ig给予家兔玉米须总黄酮（0.58、0.29、0.15 g/kg）7 d,右踝关节腔内注射尿酸钠溶液诱导急性痛风性关节炎,制作家兔膝关节软骨组织病理切片,观察病理变化。结果 与对照组比较,玉米须总黄酮中、高剂量组小鼠耳肿胀度显著降低（P<0.05）,出现舔足时间显著延长（P<0.05）,高剂量组出现扭体时间显著延长、扭体次数显著减少（P<0.05）;家兔急性关节炎实验,与模型组比较,玉米须总黄酮组滑膜组织炎症明显减轻,充血、水肿、滑膜增生不明显,少量炎细胞浸润。结论 玉米须总黄酮发挥抗炎镇痛作用,且对家兔急性痛风性关节炎具有改善作用。     

实时动态血糖监测在糖尿病合并妊娠孕妇中的应用价值

目的探讨实时动态血糖监测在糖尿病孕妇中的应用价值及对妊娠结局的影响。方法选择糖尿病合并妊娠妇女102例为观察组,另选择同期收治的健康孕妇110例为对照组,比较2组孕妇的妊娠结局。结果观察组剖宫产率为49.02%显著高于对照组的29.09%,观察组大于胎龄儿发生率为24.50%显著高于对照组的10.91%,差异均有统计学意义(P<0.05);2组孕妇羊水异常、妊娠期高血压、胎膜早破、胎盘早剥、早产、新生儿窒息、新生儿低血糖发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论实时动态血糖监测能为需要治疗的糖尿病孕妇提供早期的动态血糖监测,为后续的治疗提供更准确的血糖依据,是有效降低母婴并发症和合并症的监测方法之一。     

动态血糖监测在糖尿病孕妇血糖控制和低血糖诊断中的价值探讨

目的：探讨动态血糖监测在糖尿病孕妇血糖控制和低血糖诊断中的应用价值。方法将糖尿病合并妊娠孕妇205例随机分为2组,对照组103例给予指尖血糖仪进行血糖监测,观察组同时应用指尖血糖仪和实时动态血糖监测系统进行血糖监测,进行连续72h血糖监测,统计2种血糖监测方法对低血糖的诊断情况,比较2组患者血糖达标时间和住院时间。结果动态血糖监测系统检测出的低血糖和无症状低血糖发生率均显著高于指尖血糖仪（P＜0．05）;且观察组血糖达标时间和住院时间均短于对照组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论动态血糖监测系统作为先进的血糖监测手段,可全面、客观地反映孕妇孕妇各时段的血糖水平及血糖波动特点,并能准确、及时发现血糖异常发生的时间及持续时间（尤其是无症状低血糖）,使血糖控制更具具体性、针对性和科学性。     

高磷通过SET8调控p53/Bcl-2/Caspase信号通路促进血管平滑肌细胞钙化

摘要：目的 探讨组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET8在高磷诱导血管平滑肌细胞（VSMCs）钙化中的作用及机制。 方法 选取80～100 g的清洁雄性SD大鼠6只,取其胸主动脉,分离VSMCs后进行原代培养。VSMCs传至第3～4 代,铺6孔板,并给予相应刺激。将VSMCs随机分为正常组和高磷组（10 mmol/L β-甘油磷酸）,培养4 d后茜素红染 色观察钙结节形成情况,甲基麝香草酚蓝比色法钙含量,流式细胞数检测细胞凋亡,RT-PCR 和 Western blot 检测 SET8、p53、Bcl-2、Bax、Caspase3的mRNA和蛋白的表达水平。之后用脂质体将SET8-shRNA质粒与NS-shRNA转染 VSMCs 作为 SET8-shRNA 组和空质粒组,未转染组作为正常对照组,RT-PCR 和 Western blot 检测 p53、Bcl-2、Bax、 Caspase3的mRNA和蛋白的表达水平。结果 （1）高磷组钙盐沉积较正常组明显增加（P＜0.05）。（2）流式细胞仪检 测结果显示,与正常组相比,高磷组VSMCs的细胞凋亡率明显增加（P＜0.05）。（3）与正常组相比,高磷组Bcl-2、SET8 的mRNA和蛋白表达水平下降;p53、Bax、Caspase3的mRNA和蛋白表达水平升高（P＜0.05）。（4）干扰SET8基因表达 后钙盐沉积增加（P＜0.05）,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平下降;p53、Bax、Caspase3的mRNA和蛋白表达水平升高 （P＜0.05）。结论 高磷通过SET8调控p53/Bcl-2/Caspase信号通路,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,上调促凋亡蛋白 Bax和Caspase3的表达,进而参与调控VSMCs的钙化。     

长爪沙鼠脑底动脉Willis环变异缺失遗传特性分析及脑缺血模型高发群体的初步培育

目的研究长爪沙鼠脑底动脉Willis环遗传特性,并定向培育脑缺血高发种群。方法通过对5代定向培育的长爪沙鼠高发群动物共398只动物的右侧颈总动脉结扎模型进行观察,比较长爪沙鼠亲代与子代间脑底动脉Willis环的变异缺失类型,探求其遗传特性,并根据该遗传特性将Willis环后交通支缺失且前交通支缺失或细小的同类型的长爪沙鼠父母所生的子代雌雄个体配对繁殖,定向培育长爪沙鼠半脑缺血模型高发生率种群。结果当双亲的Willis环类型一致时,其子代大部分与其父母一致;而当双亲的Willis环类型不一致时,Willis环前交通支与母亲一致率为60.4%,前交通支与父亲的一致率为48.2%,两者的差异有显著性意义(P=0.015)。长爪沙鼠半脑缺血模型高发生率种群定向培育5代后,行单侧颈总动脉结扎时,一侧脑缺血造模成功率由F1代的40%提高到F5代的75%。结论长爪沙鼠脑底动脉Willis环变异有明显的遗传性,初步培育出了长爪沙鼠半脑缺血模型高发生率种群。     

中药黄芪佐治小儿病毒性心肌炎临床疗效观察

目的 观察中药黄芪佐治小儿病毒性心肌炎临床疗效。方法采用随机、双盲、平行对照法,将60例小儿病毒性心肌炎患者分为治疗组（30例,常规治疗基础上加用黄芪注射液）和对照组（30例,常规治疗不应用黄芪注射液）,治疗4周。观察两组患者的临床疗效。结果治疗组、对照组治疗小儿病毒性心肌炎的总有效率分别为：96．67％、86．67（P〈0．05）。无明显药物不良反应发生。结论在常规治疗基础上加用黄芪治疗小儿病毒性心肌炎,临床效果明显,无不良反应发生。