B型全血加入不同剂量0型全血后游离血红蛋白变化

为了解B型全血加入不同剂量O型全血后在37℃与室温条件下游离血红蛋白的变化,随机抽取4℃保 存24小时B型全血两人份,分别分装为60 ml,按不同比例加入O型全血9、12、15、18 ml置入1 00ml塑料血袋内 混匀后,分别放置在37℃孵箱和室温条件下,间隔15分钟摇动1次。分别在1、2、4、8和12小时留取标本做游离血 红蛋白检查。结果表明:B型全血加入不同剂量O型全血,在12小时内游离血红蛋白量的变化无显著性差异。随 着保存时间的延长不管是室温还是37℃条件下,1小时以后均有显著性差异,一袋B型全血在室温与37℃条件下 放置1-8小时无明显差别(P>0.05),到12小时P<0.001。另一袋在室温与37℃条件下放置1小时P>0.05,2 -8小时P<0.001,有明显差别。结论:在B型全血中加入O型全血,放置12小时不会引起游离血红蛋白升高。 在室温与37℃存放8小时后接近和超过存放2天的水平170.4 mg／L,这提示血液采集后应尽快置入2-4℃冷藏, 减少红细胞的分解代谢、衰老裂解而释放更多的FHb及其它代谢物质时机体的损害。     

分离和测定血浆中骨和肝型碱性磷酸酶同工酶的两种新方法

凝集素是植物中的高度特异性结合糖蛋白,常被用来分离同工酶。作者报告了两种用麦芽凝集素分离和测定血浆中骨和肝碱性磷酸酶(ALP)同工酶的新方法。总ALP的测定:作者在30℃时测定总ALP活力,使用4—硝基苯基磷酸盐作为基质,二乙醇胺作为缓冲液。ALP同工酶的测定:作者制备5g/L(139uml/L)的麦芽凝集素水溶液,测定ALP同工酶时,用50ul凝集素溶液与50ul血浆混合,如果标本经常规电泳证实含有胆汁型ALP时,应将标本50ul加5ul(20g/L蒸馏水)Triton X-100表面活性剂置于37℃孵育30分钟,凝集素和血浆混合液在37℃孵育30分钟后,离心(2000×g)15分钟,吸出全部     

使用已糖激酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶直接分光光度法测定血清镁

原子吸收分光光度法是血清镁的精确测定法,但它需要专门设备。广泛使用的比色法,虽然简便,但Xylidye BlueⅡ与镁的螯合反应不很特异。作者报告了一种适合一般实验室测定血清镁的酶法。利用Mg~(2 )是已糖激酶(HK)的一种激活剂,使其含在HK催化反应的基质(如Mg.ATP~2-复合物)中,通过反应产生的NADPH在340nm波长时吸光度的增加可测定出HK的反应速率,此速率与HK成比例,即可换算成Mg~(2 )的含量。     

微粒型血小板干粉促进小鼠皮肤创面愈合的实验研究

目的将过期的血小板制成微粒型血小板制剂,研究其与创面愈合及修复的作用关系。方法将过期的单采血小板冰冻干燥制成微粒型血小板制剂,制备的干粉质量为约0.28g/ml;分别采用ELISA的方法检测常规(液态)血小板与微粒型血小板制剂(复溶成液态)中VEGF、TGF-β1、PDGF的含量;将微粒型血小板制剂应用于全层皮肤缺损的小鼠背部皮肤创面,观察该制剂是否具有促进伤口愈合的功能;把小鼠随机分为生理盐水组、血浆组和微粒型血小板制剂组(每组每时相点6只),每只小鼠右侧均为生理盐水对照组,两组给药50μl(干粉用生理盐水复溶成液态)1次/d,观察伤后各组各时相点创面愈合情况,并应用免疫组化的方法检测各组术后5、7、10、14d创面皮肤组织CD31的表达情况。结果常规液态血小板和微粒型血小板制剂(液态)组中VEGF的含量,无统计学差异(t=-1.616,P>0.05),而微粒型血小板制剂组中TGF-β1、PDGF的含量较相应的常规液态血小板为高(t=-2.269、2.338,P均<0.05)。微粒型血小板制剂组在小鼠创伤后d5、7、10创面面积较盐水对照组和血浆组有明显的减小(t分别=2.997、3.427、10.78,t=2.599、2.331、6.407,两组P均<0.05);d5、7、10创面收缩率与盐水对照组相比有明显的提高(t=2.542、3.161、5.884,P<0.05),d7、10与血浆组相比,t=2.177、4.351,P均<0.05;实验组在创伤后d5、7、10创面组织CD31的积分光密度与盐水对照组相比有明显升高(t=-2.339、-3.553、-4.941,P<0.05)。d7、10与血浆组比较,t=-2.373、-2.412,P均<0.05。结论微粒型血小板干粉制剂中TGF-β1、PDGF较常规血小板中增高;其对小鼠皮肤创面的修复和愈合有促进作用。     

HIV经输血传播的防范与献血跟踪策略

目的探索预防窗口期献血者导致输血传播HIV的方法.方法分析HIV感染窗口期的特点;论证献血跟踪策略（即血站采血后并不立即发出,而是将血液储存起来,并跟踪献血者自献血之日起到1个窗口期之后的1次HIV检验结果,只有跟踪结果阴性才能确认所采血液合格,否则不能发出.）的优越性.结果无法通过革新检测技术来消除HIV感染窗口期;病毒灭活技术也不能完全避免HIV经输血传播;献血跟踪策略的实施需要依赖血液长期保存技术、献血者的理解支持和法规政策的许可,而且会花费更多的检测费用和血液存储成本.但是,这一策略的实施,不仅可以掐断HIV经输血传播的渠道,还可以杜绝HCV、HBV等病原体经输血传播.结论献血跟踪策略是预防窗口期献血者导致输血传播HIV的有效方法,必然会赢得献血者和政策制定部门的支持.     

硅酸修饰的抗体微阵列玻片对红细胞的血型抗体吸附能力的研究

目的探讨用硅酸修饰的微阵列玻璃基片,对红细胞血型抗体的吸附能力.方法将玻片用硅酸钠溶液处理,经酸化以形成硅酸,然后用抗红细胞血型抗体(抗-A、抗-B、抗-AB、抗-D)包被,以对应红细胞作反应指示物,以检测经硅酸修饰后的玻片对红细胞血型抗体的吸附能力,以及血型抗体的免疫活性.结果抗红细胞血型抗体可以牢固的结合在硅酸修饰过的玻片上,并且可以与其对应的红细胞抗原进行免疫学反应.结论经硅酸修饰的玻片对血型抗体有很高的结合效力,同时抗体仍保持很高的免疫活性,因而可进一步充当蛋白质抗体微阵列基片.     

外周血干细胞采集过程中不良反应的预防和处理

目的探讨外周血干细胞采集过程中出现不良反应的预防和处理.方法对24例患者或供者,使用CS-3000 Plus血细胞分离机采集外周血干细胞,对采集过程中出现的不良反应进行观察和分析.结果每例采集2～3次,共58次,出现不良反应14次(24%),其中以枸橼酸盐毒性反应最多(13次),发热反应1次,经采取相应处理措施后,不良反应消失.24例均能采集到足量的单个核细胞,顺利完成移植.结论外周血干细胞采集过程中可能出现不良反应,以枸橼酸盐毒性反应最多,处理不当,采集难以顺利进行.为确保采集成功,必须做好采集前准备、控制处理血液总量(终点量值)、全血流速及抗凝剂比例,并注意预防和及时处理.     

新型血小板添加液对血小板低温液态保存效果的实验研究

目的探讨使用改良的血小板添加液（PAS）替代70％自体血浆在低温液态条件下对血小板的保存效果。方法采集6单位单采血小板,每一单位单采血小板平均分为3组,A组加入70％PAS-Ⅲ M／30％血浆10℃保存;B组加入100％血浆22℃保存;C组加入100％血浆和海藻糖-85℃保存。A、B组在第1、5、7、9天取样检测,C组在20d后复苏取样检测。分别检测PLT计数、PDW、MPV、CD62p、HSR、PAgT、pH值、LDH以及GLU的变化。结果保存期内随保存时间延长,A组和B组CD62p表达增加,HSR和最大聚集率降低;A组的LDH释放、GLU消耗、CD62p表达、HSR、血小板最大聚集率与B组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。B组pH值在第5天起明显降低（P〈0．05）。C组LDH释放明显较其他两组增多,但CD62p表达较少（P〈0．05）。C组PDW显著升高,除与B组第5天结果相似外,均高于A、B组各时间点结果（P〈0．05）。各组PLT计数相差不显著。结论改良的PAS-ⅢM能够很好的替代血浆用于血小板的保存,同时在低温条件下能够很好地保护血小板的功能,保存效果好于血浆常温保存。     

乳酸脱氢酶同工酶电泳中的异常区带

乳酸脱氢酶(LDH)是由H和M两种亚基构成的四聚体。两种亚基构成了LDH同工酶的五种多体。根据电泳迁移率的不同可分为:LDH_1(H_4)、LDH_2(H_3M)、LDH_3(H_2M_2)、LDH_4(HM_3)和LDH_5(M_4)。LDH同工酶电泳被广泛用来诊断特定器官的损伤。LDH_1主要含在心肌中,LDH_5主要含在骨骼肌及肝中。另外,正常睾丸组织(精液)中还含有LDH-x,是一种线粒体特异酶。自从1959年Agress提出LDH作为诊断急性心肌梗塞的有用指标以来,对血清LDH和LDH同工酶的测定迅速开展起来。随着LDH同工酶的广泛临床应用,许多作     

ELISA测定培养细胞中胞液型磷脂酶A2的含量

目的 建立胞液型磷脂酶Ａ２（ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２,ｃＰＬＡ２）的ＥＬＩＳＡ。方法 以人ｃＰＬＡ２抗体包被微孔板后,加入抗原（标本）,再加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人ＩｇＧ作为第二抗体,经邻苯二胺（ＯＰＤ）显色后测定其４９０ｎｍ处Ａ值,与标准品对比可得ｃＰＬＡ２含量。结果 检测灵敏度可达２５．０ｎｇ／ｍｌ,批内和批间变异系数为５．５％和７．８％,ｃＰＬＡ２含量为５６和