糖尿病大鼠泪腺、结膜及角膜组织病理学观察

目的 探讨糖尿病造成的泪腺、角膜、结膜组织损伤。方法 雄性SD大鼠40只。随机分为糖尿病组和对照组，各20只。分别于成模后6、8、10、12周断颈处死大鼠，每组各5只。光镜下观察泪腺、角膜、结膜组织病理学改变。结果 糖尿病组随时间依次表现为泪腺细胞水肿、增生，腺泡及导管萎缩，纤维增生及淋巴细胞浸润，角膜上皮、基质层水肿，结膜杯状细胞减少。结论 糖尿病导致的泪腺、角膜、结膜等眼组织破坏是糖尿病性眼表病变的病理基础。     

低强度氦-氖激光对体外培养的兔角膜内皮细胞增殖的影响

目的探讨不同条件低强度氯氖激光照射对体外培养的兔角膜内皮细胞增生的影响。方法体外培养的兔角膜内皮细胞经低强度激光照射后，MTT比色法检测其增生活性；通过生物显微镜、组织化学染色观察其照射前后形态学变化；通过流式细胞仪检测其照射前后细胞周期的变化等。结果MTT检测结果显示，体外培养的兔角膜内皮细胞经低强度激光照射后，其增生活性提高，本实验中最适照射强度和时间分别是5mW·cm^-2、600s；流式细胞仪细胞周期检测结果显示：激光照射组的细胞增生指数明显高于对照组，而与碱性成纤维细胞生长因子组比较差别无显著性意义。结论低强度激光在一定程度上可促进角膜内皮细胞的增生。     

脱水猪角膜基质为载体体外构建猫角膜内皮组织

目的:以脱水猪角膜基质为载体体外构建猫角膜内皮组织,并观察其形态结构,以寻找体外构建角膜组织最佳载体材料及方法,最终目的是体外构建可用于移植的角膜内皮组织。方法:以脱水处理的猪角膜基质片为载体,将猫角膜内皮细胞接种于去除猪角膜内皮细胞的后弹力膜上,在添加了表皮生长因子和层粘连蛋白的培养液中培养7 d,分别观察倒置显微镜下、组织学切片及扫描电镜下内皮组织的形态结构。结果:倒置显微镜下,组织培养的猫角膜内皮细胞形成单层内皮组织,排列较规律,细胞间连接紧密;组织学观察发现,培养的猫角膜内皮细胞形成完整的内皮组织,贴附于脱水基质的后弹力膜上,与正常的角膜内皮组织结构相似;扫描电镜下,组织培养的猫角膜内皮细胞间连接紧密,细胞大小不甚一致,胞核清晰。 结论:以脱水猪角膜基质为载体,体外成功构建出猫角膜内皮组织,其形态结构近似于正常角膜内皮组织。     

角膜体外重建异种生物载体材料生物相容性研究

目的　研究异种 (猪 )角膜基质的生物相容性 ,评价其作为角膜体外重建载体的可行性。方法　将新鲜、脱水两种猪角膜基质分别植入新西兰白兔角膜层间 ,定期临床观察植片愈合情况 ,并于术后 2周、1、2、4、8个月取兔角膜进行组织学观察。结果　临床观察 :全部植片存活 ,12只术眼未见角膜水肿混浊、角膜新生血管、排斥反应发生 ,新鲜植片在 2个月左右已透明 ,脱水植片在 6个月后透明。组织学观察 :新鲜植片 4个月时与兔角膜基质相融愈合 ,脱水植片经角膜细胞再分布、胶原纤维改建重塑 ,于 8个月后与兔角膜基质相融愈合 ,2组植片愈合过程中未见有淋巴细胞浸润及新生血管生成。结论　异种 (猪 )角膜基质具有良好的生物相容性 ,是一种理想的角膜体外重建载体材料。     

培养角膜上皮移植的实验研究

为尝试体外培养角膜上皮组织移植的方法,以治疗角膜表层疾患,我们以脱水保存的同种或异种浅层角膜基质片作为载体,通过体外培养同基因角膜缘上皮细胞,使其在体外形成近乎生理状态下的角膜上皮组织,再将其移植于损伤的角膜上。实验结果证实体外培养的角膜上皮组织与生理状态下的角膜上皮组织相近,动物移植透明愈合,并且未出现明显的移植排斥反应。     

TGF-β_1对角膜上皮移植后CD_4~+、CD_8~+、CD_(25)~+和CD_(71)~+的影响

目的 为有效控制角膜移植术后排斥反应的发生,提高角膜移植成功率,我们在小鼠(BALB/c)角膜上皮移植术后应用TGF-β_1,并观察其对外周血淋巴细胞亚群CD_4~+、CD_8~+、CD_(25)~+和CD_(71)~+活化的影响,为今后临床应用TGF-β_1抑制角膜移植术后免疫排斥反应奠定基础。方法 采用CD_4~+、CD_8~+、CD_(25)~+和CD_(71)~+免疫荧光标记及流式细胞仪检测技术,分别对设立的阴性对照组、阳性对照组、同基因组、异体角膜上皮组及TGF-β_1治疗组的BALB/c小鼠角膜上皮移植术后12d的外周血中CD_4~+4CD_(25)~+、CD_8~+CD_(25)~+、CD_4~+CD_(71)~+和CD_8~+CD_(71)~+的表达进行分析。结果 BALB/c小鼠角膜上皮移植术后12d的外周血中CD_(25)~+CD_4~+、CD_(25)~+CD_8~+、CD_(71)~+CD_4~+和CD_(71)~+CD_8~+双阳性的T淋巴细胞均有显著升高;术后经TGF-β_1治疗后,上述细胞的数量明显受到抑制。结论 角膜上皮移植术后应用TGF-β_1可抑制特异性抗原介导的,以及非特异性炎症诱导的移植排斥反应。     

低能量激光对体外培养的兔角膜内皮细胞超微结构的影响

目的 观察低能量激光照射对体外培养的兔角膜内皮细胞超微结构的影响.方法 传代的兔角膜内皮细胞分为两组:一组为处理组,采用低能量激光照射,1次/d,连续7 d;另外一组为对照组,不行激光照射.通过扫描电镜及透射电镜等检测观察兔角膜内皮细胞经激光照射前后形态学超微结构的变化.结果 扫描电镜和透射电镜检测表明,与对照组相比,激光照射组内皮细胞表面可见丰富的微绒毛,细胞核较大,细胞核膜结构清晰,核仁明显且数目较多,染色质丰富,胞浆内细胞器发达.结论 角膜内皮细胞经低能量激光照射后的超微结构变化表明其增殖活性提高.     

硅胶治疗碱性角膜烧伤的实验研究

目的 探讨硅胶对实验性角膜碱烧伤早期的治疗作用及疗效机制。方法：新西兰兔23只，单眼角膜中度碱烧伤，选择结膜囊内硅胶粉填充法（A组）和眼表局部硅胶粉隔吸法（B组）。C组为对照组，角膜碱烧伤后仅予生理盐水冲洗。第3，5周末摘取角膜行病理检查，烧伤后第7天摘取角膜行扫描电镜检查。结果 A组于第2周角膜溃疡形成，第2周末溃疡穿孔；B组无1例形成溃疡，第7周角膜透明或半透明。对照组多形核白细胞（PMN）大量浸润，角膜细胞显著增多，胶原纤维杂乱排列，新生血管丰富。B组PMN浸润明显减少，胶原排列轻度紊乱，血管少而疏，瘢痕组织少。电镜下见A组角膜烧伤区表面及细胞间明显的硅胶颗粒残留，B组未见硅胶颗粒。结论 在角膜碱烧伤早期应用硅胶治疗可获良效，但应避免硅胶粉直接与眼表接触。     

角膜碱烧伤bFGF滴眼治疗作用的形态定量研究

目的 探讨兔角膜碱烧伤后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对角膜修复和新生血管形成的影响。方法 制作兔角膜碱烧伤模型,烧伤后应用bFGF滴眼液(A组 bFGF浓度为2400ng/ml,B组为9600ng/ml,C组为对照组),以计算机图像分析系统定量测定角膜上皮愈合面积和上象限角膜新生血管面积。结果 图像分析测得角膜上皮愈合面积实验组比对照组大,在第5、9、14 d A组与对照组比较差异有显著意义(P<0.05),在30d B组与对照组差异有显著意义(P<0.05)。图像分析测得上象限角膜新生血管面积实验组与对照组比较差异无显著意义(P>0.05)。结论 bFGF可以促进角膜上皮修复愈合,未见促进角膜新生血管形成等有害作用。     

FK506抑制同种异体角膜缘移植术兔外周血T淋巴细胞CD25的表达

目的 探讨FK506滴眼液对同种异体角膜缘移植术后的免疫抑制作用。方法 新西兰兔48只48眼建立角膜缘缺陷症动物模型。随机分为FK506组、环孢霉素A(CsA)组及生理盐水对照组,每组16眼。1个月后实施同种异体角膜缘移植术,检测术前及术后1－8周兔外周血T淋巴细胞上CD25的表达。结果 各组表达CD25的外周血T淋巴细胞数均有升高。对照组较其他两组高;而CsA组显著高于FK506组(P＜0. 05)。 结论 FK506滴眼液可抑制同种异体角膜缘移植术后T淋巴细胞上CD25的表达,其免疫抑制效果优于CsA。