异种角膜基质异位移植对大鼠外周血T细胞亚群的影响

目的: 比较3种异种角膜基质的免疫原性。方法: 将SD大鼠36只随机分为4组,每组9只。1组为对照组,2-4组为实验组。分别获取新鲜猪、兔、鸡角膜基质,等量湿重25 mg异位植入大鼠背部皮下,术后观察伤口愈合情况,并于术后7 d、14 d、28 d获取大鼠外周血,免疫荧光标记及流式细胞仪分析比较3种异种角膜基质对大鼠CD4⁺、CD8⁺、CD25⁺、CD71⁺表型的动态影响。结果: 各组植入处皮肤无红肿、无渗出及其它改变,伤口愈合良好;各组与对照组比较:猪角膜基质组各时相表达的CD4⁺、CD8⁺、CD25⁺、CD71⁺T细胞比例无显著差异(P＞0.05);兔角膜基质组术后7 d,CD4⁺T细胞升高(P＜0.05),鸡角膜基质组术后7 d,CD4⁺、CD4⁺CD71⁺升高(P＜0.01)。结论: 3种异种角膜基质对大鼠细胞免疫原性比较:鸡>兔>猪,猪角膜基质的免疫原性最低。     

壳聚糖复合共混膜培养兔角膜缘上皮及其移植

目的 探讨壳聚糖、胶原、透明质酸钠复合共混膜作为兔角膜缘上皮细胞体外培养载体及其自体移植的可行性。方法 活体取兔左眼角膜缘浅层小块，置此共混膜上，常规培养8天。将兔右眼角膜浅层基质分离成囊袋，用3mm环钻去除角膜中央浅表层，将含培养角膜缘上皮细胞的共混膜植入自体角膜囊袋内(6只兔)，对照组则植入不含细胞的共混膜(6只兔)。术后观察1月。结果 角膜缘小块在共混膜上培养生长良好，移植手术后40h，实验组5／6角膜植片荧光素染色阴性；对照组术后4天角膜植片荧光素染色仍为部分阳性。实验组组织学检查显示材料表层上皮完整，AE1／AE3免疫组化染色阳性，材料部分降解。结论 壳聚糖胶原透明质酸钠共混膜可作为培养角膜缘上皮细胞及其移植的载体。     

体外培养角膜内皮细胞移植的实验研究

目的　探讨体外培养角膜内皮细胞移植的手术方法及移植后在活体的生理功能。方法　植片 :以直径 7 5mm、厚 10 0 μm、冷冻脱水保存的猪角膜后弹力膜 (Descemet′smembrane ,DM ) /基质为载体 ,原代接种兔角膜内皮细胞 ,体外培养 7～ 10d ,用于移植。受眼 :新西兰兔 3 0只 ( 3 0眼 ) ,实验组 2 0眼 ,对照组 10眼 ,全角膜范围去除术眼内皮细胞 ,5周后施行手术 ;做直径 9mm、3 / 4角膜厚的带蒂前层角膜瓣并掀置一侧 ,再用直径 7 2 5mm的环钻钻去中央后层角膜 ,形成植床 ;将植片置于植床 ,8-0可吸收线间断缝合 ,10 -0尼龙线间断缝合前层角膜瓣 ,术后观察 1～ 12个月。结果　术后角膜持续透明 6个月 14眼 ( 14 / 18、 77% ) ,12个月 8眼 ( 8/ 14、 5 7% ) ;术后 6个月内皮细胞密度 ( 193 4± 3 0 7)个 /mm2 ,角膜厚度平均为 ( 3 92± 3 9) μm。 结论　以异种DM /基质为载体培养的兔角膜内皮细胞 ,行同种异体移植后 ,能够在活体上成活 ,并具有正常内皮细胞的生物学功能 ,维持角膜透明 ,深板层角膜内皮移植术是体外培养内皮细胞移植的一种有效术式。     

异种角膜基质异位植入后免疫病理学研究

目的 观察异种角膜基质异位植入后的免疫病理变化，评价其免疫相容性。方法将一定大小的新鲜的和甘油脱水的猪角膜基质植入到小鼠皮下组织内，同时以异种皮肤、假手术为阳性和阴性对照；术后1个月取材进行组织病理学观察，并通过免疫荧光细胞化学法检测植入材料内T淋巴细胞总数和亚群的变化。结果新鲜的和甘油脱水的猪角膜基质皮下植入后1个月，可见少量的淋巴细胞、巨噬细胞、CD3＋细胞、CD4＋细胞、CD8＋细胞浸润．且CD4＋细胞多于CD8＋细胞，但未达到阳性对照水平（P〈0．05）。结论异种角膜基质异位植入后早期局部未引发免疫排斥反应，免疫相容性好。     

山茱萸总甙滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的:观察山茱萸总甙(COG)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法:建立封闭群大鼠角膜移植模型,用裂隙灯显微镜记录及比较各组角膜排斥反应发生时间;并进行病理学和扫描电镜检查。结果:病理学检查B、C组15d时的角膜植片淋巴细胞浸润及新生血管明显少于A组。免疫组化显示:ICAM-1的表达在15d时B、C组明显少于A组。结论:COG滴眼液能有效地防治角膜移植免疫排斥反应。     

bFGF滴眼液治疗角膜碱烧伤的实验研究

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对兔角膜碱烧伤的影响。方法 制作兔角膜碱烧伤模型，烧伤后每日4次应用bFGF滴眼液滴眼。设立2400ng／ml浓度(常规剂量)的bFGF滴眼液为A组、9600ng／ml浓度的bFGF滴眼液为B组、对照组为C组。烧伤后每日观察眼前段情况，进行组织学检查。结果 A组和B组与对照组比较，炎性反应较轻，组织学检查发现，在角膜新生血管发生前先有角膜缘及基质层白细胞浸润，A组和B组的炎性细胞比C组少。结论 bFGF可以减少角膜碱烧伤的炎性反应，促进角膜上皮修复愈合。局部应用常规治疗剂量bFGF 比高浓度bFGF更为适宜。     

FK506滴眼液抑制兔同种异体角膜缘移植排斥反应的免疫病理学研究

目的 :观察同种异体角膜缘移植术后排斥反应的免疫病理学变化 ,探讨FK5 0 6滴眼液的免疫抑制作用。方法 :新西兰兔 48只 48眼建立角膜缘缺陷症动物模型。随机分为PK 5 0 6组、环孢霉素A组 (CsA )及生理盐水对照组 ,每组16眼。 1月后实施同种异体角膜缘移植术。应用免疫病理学方法检测术后 4、 8、 10周角膜缘植片CD2 5的表达和淋巴细胞浸润。结果 :术后 4、 8、 10周三组角膜缘植片CD2 5的表达和淋巴细胞浸润均有升高 ,对照组较FK5 0 6组和CsA组高 (P <0 0 5 ) ,CsA组显著高于FK5 0 6组 (P <0 0 5 )。结论 :PK 5 0 6滴眼液可抑制同种异体角膜缘移植术后植片CD2 5的表达 ,其免疫抑制作用优于CsA。     

角膜内皮细胞高表达TGF-β1的免疫学作用

目的探讨TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后表达产物的免疫学活性。方法分别用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法检测pSecTag2-TGF-β1MP质粒转染角膜内皮细胞48h后TGF-β1基因的表达,ELISA法检测TGF-β1浓度;MTT法检测其对ConA诱导的淋巴细胞转化反应的影响;用流式细胞仪法检测其对淋巴细胞凋亡以及淋巴细胞CD3 、CD4 、CD8 、CD25 、CD69 、CD71 亚群分化的影响。结果从mRNA转录和蛋白质水平均证实TGF-β1基因在角膜内皮细胞获得高效表达。瞬时转染48h角膜内皮细胞培养上清中TGF-β1的表达为(98±3)pg/ml,高于对照组。在其作用下淋巴细胞活化增生受抑制;出现明显的亚二倍体峰;CD25 、CD69 、CD71 阳性细胞比率下降。结论基因转染角膜内皮细胞高表达TGF-β1,可抑制淋巴细胞的活化增生,促使淋巴细胞凋亡。     

山茱萸总甙滴眼液局部应用的兔眼通透性研究

目的　本研究首次研制出山茱萸总甙 (cornus officinalis glycosides,COG)滴眼液 ,并用高效液相色谱法 (high performance liquid chromatography,HPLC)对不同剂量该滴眼液在兔眼房水经时过程的异同进行研究。方法　将 3种不同剂量 COG滴眼液 50 μL分别滴入 3组兔眼下睑结膜囊内 ,在 4h内定时采取房水作为测试样本 ,经处理后 ,用高效液相色谱仪测定样本中的没食子酸的质量浓度。结果　 COG滴眼液滴眼后 ,能被吸收进入房水。给药后 1 h时 ,3组房水药物浓度均为最高值。统计分析显示 :A组 (5g· L-1COG)与 B(1 0 g· L-1COG)、C(2 0 g·L-1COG)组之间有显著差异性 (P<0 .0 5)。结论　COG滴眼液滴眼能被吸收进入房水 ,在给药 1 h时 ,房水中药物浓度达峰值     

棘阿米巴角膜炎1例报告

棘阿米巴广泛生活在自然界 ,其形态、感染途径和致病方式与溶组织阿米巴不同。棘阿米巴角膜炎 (acanthamoebakeratitis,AK)为严重的眼感染性疾病 ,常导致视力丧失 ,多继发于角膜损伤。 Nagington等 〔1〕 (1974)首次报道 2例 AK,1例为眼被树枝致伤 1年后出现 ,另 1例是眼与鸟接触后发生。实验发现〔2〕,即使是角膜细微的损伤 ,也能暴露甘露糖—糖蛋白 (mannose- glycoproteins,M- GPs)位点 ,而新鲜暴露的 GPs可以为棘阿米巴提供良好的附着点。AK与戴角膜接触镜密切相关 ,1984年第 1例 AK出现在戴角膜接触镜患者〔3〕。 1985年后 ,随着…