基于拟胚体面积的体外胚胎毒性模型的建立和验证

目的 利用小鼠胚胎干细胞,以拟胚体面积为分化抑制终点,构建体外胚胎毒性模型。方法 模型建立：分别用训练集10个化合物青霉素G、异烟肼、5-氟尿嘧啶、羟基脲、阿司匹林、氟康唑、地塞米松、丙戊酸钠、洛伐他汀、苯海拉明处理小鼠胚胎干细胞ES-D3和小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3 5 d,用细胞活力检测试剂盒检测细胞活性,得到相应的半数抑制浓度（IC_{50 3T3}、IC_{50 D3}）;同时用10种化合物处理ES-D3细胞,用悬浮-悬滴培养的途径制备拟胚体,于第5天对拟胚体进行拍照,用 Image J 软件测量拟胚体的横截面积,并计算半数抑制细胞分化的浓度（ID₅₀）。根据得到的 IC_{50 3T3}、IC_{50 D3}、ID₅₀,用Python软件采用线性判别分析（LDA）拟合得到线性二分类判别式。模型验证：以上述同样的方法测定测试集3个化合物维生素C、布洛芬、顺铂的IC_{50 3T3}、IC_{50 D3}、ID₅₀,将其代入得到的判别式,并预测化合物的胚胎毒性。结果 通过训练集 10个化合物拟合出线性预测判别式为：判别值＝21.550 926 58×lg IC_{50 3T3}－7.600 241 83×lg IC_{50 D3}－14.007 571 16×lg ID₅₀＋6.675 517 2,判别值＜0,归为无胚胎毒性;判别值≥0,归为胚胎毒性。将测试集化合物的 IC_{50 3T3}、IC_{50 D3}、ID₅₀代入判别式,得到维生素C判别值＜0,为无胚胎毒性药物;顺铂和布洛芬判别值＞0,为胚胎毒性药物,均与文献中体内试验结果一致,预测正确。结论 基于拟胚体面积成功建立体外胚胎毒性模型。     

肝血管瘤超声造影特征的临床研究

<正>本研究应用新型超声造影剂SonoVue对我院28例肝血管瘤患者(共48个病灶)进行超声造影检查,总结肝脏血管瘤的超声造影声像图特征,探讨超声造影对肝血管瘤的临床诊断价值。1资料与方法1.1研究对象:2003年1月至2011年1月经增强CT、磁共振成像(MRI)或穿刺活检确诊的肝血管瘤患者28例,共     

基于T7核酸外切酶的一步法克隆初探

目的 检测T7核酸外切酶是否可用于同源重组介导的DNA片段重组克隆技术.方法 利用PCR方法克隆pUC 19片段和卡那霉素供体片段后与T7核酸外切酶混合反应,将反应物直接转化大肠杆菌并克隆计数.结果 末端互补的线性化双链DNA分子与T7核酸外切酶反应后,无需纯化,即可直接用于转化大肠杆菌.和其他不依赖于连接酶的克隆法相似,T7核酸外切酶的一步克隆法(T7 exonuclease dependent one-step cloning,EDOC)的效率与末端互补序列的长度成正比,互补序列大于等于10 bp时即可稳定地产生克隆,互补区内的突变不利于同源重组发生.测序结果显示EDOC是一种精确克隆法,并未发现缺失,插入和点突变生成.结论 证实了T7核酸外切酶可被用于重组DNA的精确拼接,并成功建立了依赖于EDOC.     

不同术式子宫切除术对患者内分泌及骨代谢的影响

过去对一些患有某些子宫良性疾患如子宫肌瘤、功能性子宫出血的妇女常行全子宫切除。近来研究表明 ,子宫不仅是一个受激素作用的靶器官 ,而且还能分泌多种生物活性物质 ,与卵巢、垂体进行精细的内分泌调节 ,因此在有效治疗疾患的同时尽可能保留部分子宫对年轻妇女的身体健康和生活质量有积极的意义。本文旨在研究子宫切除及不同的子宫切除术式对绝经前女性的内分泌及骨代谢的影响 ,为临床选择恰当的术式提供依据。1　资料与方法1.1　一般资料选自 1998年 12月至 2 0 0 2年 12月我院因子宫良性病变行子宫切除术的未绝经病人 5 0例 ,年龄在 38…     

子宫次全切除对IL1β、IGFⅡ的影响

目的：探讨子宫次全切除对白介素1β(IL1β)、类胰岛素生长因子Ⅱ(IGFⅡ)的影响及雌激素(E2)与IL1β、IGFⅡ的关系。方法：将30例绝经前行子宫次全切除(保留双侧卵巢)的妇女，分成A、B两组。A组手术后一个月始每日服倍美力0．625mg。分别以化学发光法测定其术前、术后1日、术后1个月、3个月、6个月的E2水平；同时放免法测定其IL1β、IGFⅡ水平。结果：IL1β、IGFⅡ术后略有上升或下降，且随着时间的延长这种趋势越明显。A组较B组IL1β水平下降，而IGFⅡ上升。结论：子宫次全切除使E2水平下降。E2对IL1β、IGFⅡ水平变化有影响。     

H2S对氧化型低密度脂蛋白诱导人单核巨噬细胞核转录因子-κB的影响及机制

目的:研究硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导人单核巨噬细胞NF-κB通路的调节作用及其机制。方法:人单核细胞系THP-1细胞采用12-豆蔻酸-13-乙酸佛波醇(phorbol myristate acetate,PMA)诱导分化为巨噬细胞后,分为4组:对照组、ox-LDL组、ox-LDL+H2S100μmol/L组及ox-LDL+H2S 500μmol/L组。用Western blot检测细胞IκBα蛋白表达及NF-κB磷酸化水平,激光共聚焦法检测细胞胞浆IκBα及NF-κB的核转位改变,免疫共沉淀方法检测细胞核中NF-κB p65与IκBα结合情况。结果:Western blot结果显示,与对照组相比,ox-LDL组人单核巨噬细胞中NF-κB p65磷酸化水平明显升高(0.855±0.116 vs.0.502±0.218,P=0.046),IκBα表达明显减少(0.612±0.216 vs.0.997±0.167,P=0.029);与ox-LDL组相比,ox-LDL+H2S 100μmol/L组及ox-LDL+H2S 500μmol/L组细胞中NF-κB p65磷酸化水平显著降低(0.424±0.225 vs.0.855±0.116,P=0.020;0.378±0.071 vs.0.855±0.116,P=0.011),IκBα表达显著增多(1.037±0.111 vs.0.612±0.216,P=0.015;1.046±0.084 vs.0.612±0.216,P=0.013)。激光共聚焦结果显示:与对照组相比,ox-LDL组THP-1源性巨噬细胞胞浆中IκBα表达明显降低,NF-κB p65核转位明显增加;与ox-LDL组相比,ox-LDL+H2S 100μmol/L组及ox-LDL+H2S 500μmol/L组细胞胞浆IκBα表达显著增多,NF-κBp65核转位明显减少。免疫共沉淀结果显示,对照组人单核巨噬细胞胞核内未检测到NF-κB p65与IκBα的结合,ox-LDL组细胞核内NF-κB p65与IκBα结合较少,ox-LDL+H2S 100μmol/L组及ox-LDL+H2S 500μmol/L组细胞核内NF-κB与IκBα结合明显增多。结论:H2S可抑制ox-LDL诱导人单核巨噬细胞中NF-κB通路激活,其作用机制可能与抑制胞浆中IκBα降解,减少NF-κB p65磷酸化激活及核转位,同时可促进胞核中IκBα与NF-κB的结合,进而抑制NF-κB的活性有关。     

VEGF基因多态性在多囊卵巢综合征中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）的1154G/A位点单核苷酸多态性（SNPs）与多囊卵巢综合征（Polycystic ovarian syndrome,PCOS）的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态方法检测110例多囊卵巢综合征患者（研究组）及100例正常妇女（对照组）的VEDG基因-1154G/A多态性位点的基因频率分布情况。结果在110例PCOS患者及100例对照组中,VEGF-1154G/A的SNP的AA、GA、GG3种基因频率在PCOS组和对照组中分别为2.6%、26.4%、71.0%和5.0%、30.0%、65.0%。G、A等位基因频率分布在PCOS组和对照组分别是82.3%、17.7%和78.0%、22.0%。两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 VEGF-1154G/A位点的单核苷酸多态与PCOS的发生、发展相关。     

家兔用于药物生殖发育毒性评价的研究进展

生殖发育毒性评价是药物安全性评价的重要组成部分。家兔属兔科兔形目,是药物生殖发育毒性评价的非啮齿类哺乳动物模型之一,但是其相关研究较啮齿动物少,对不同种属动物模型进行药物生殖发育毒性评价有助于提高风险评估的准确性。从生育力与早期胚胎发育毒性试验、胚胎-胎仔发育毒性试验、围产期发育毒性试验和体外生殖发育毒性评价等方面综述了家兔在药物生殖发育毒性评价中的研究进展,并探讨了家兔在药物生殖发育毒性评价研究中存在的问题及今后的发展方向,以期为今后研究提供参考。     

超声引导介入治疗异位妊娠37例分析

目的 探讨超声引导下介入治疗异位妊娠的临床应用.方法 应用超声引导对37例孕囊型异位妊娠患者进行孕囊穿刺注射氨甲喋呤(MTX)30 mg(溶于1～2 ml注射用水中),观察血β-hCG、病灶包块吸收情况、毒副反应.结果 37例中35例治疗后血β-hCG明显下降,病灶包块缩小或者消失,免于手术,治疗成功率为94%,其中2例术中发生破裂出血急诊手术治疗.结论 超声引导下介入治疗异位妊娠成功率高、不良反应小,为临床保守治疗异位妊娠提供了一种新的治疗方法.     

静脉滴注盐酸赖氨酸致过敏性皮疹1例

1病例介绍患者女,32岁,因车祸致头外伤伴头痛、呕吐3h于2005年8月21日22:30分急诊来院,入院后给予脱水、抗炎、止血等治疗,20d后病情逐渐稳定,遂调整治疗方案:给予5%葡萄糖500ml 盐酸赖安酸3.0静脉滴注,每日1次(盐酸赖安酸:商品名为镇通,广西南宁邕江药业有限公司生产)。当第2d