新生大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养及标记方法

本文用等密度沉降离心法分离出新生大鼠骨骼肌卫星细胞,观察其生长规律,检测分裂指数及生长曲线。用胶体金、DAPI及Brdu标记液分别标记细胞8、24、48h,测标记后细胞的生长曲线及标记率。结果表明分离所得肌卫星细胞纯度95％以上,梭形,培养第5天细胞排列出现方向性,并开始融合成肌管,第3—5天增殖旺盛,5代以内生长较快。三种标记方法对肌卫星细胞有不同程度毒性。胶体金标记法毒性最小,标记率100％;DAPI标记细胞率为100％;Brdu毒性最大且标记率仅为10％。本实验方法简单、快速,所得肌卫星细胞纯度高,性能好。胶体金标记法适合于电镜研究,DAPI标记法适合于光镜研究,Brdu标记法较差。     

应用5-氮胞苷体外诱导P19细胞分化为心肌细胞

目的 探讨P19细胞体外经5-氮胞苷(5-aza)诱导向心肌细胞分化的特征.方法 将P19细胞接种于铺有琼脂的培养皿中,用含不同浓度5-aza的培养基诱导培养7d,细胞悬浮生长形成类胚体(EBs).将EBs用生长培养基黏附培养,观察细胞收缩情况;免疫细胞荧光检测α一横纹肌肌动蛋白(asarcomeric actin)、心肌肌钙蛋白(cTnT)的表达;RT-PCR检测GATA-4、a-MHC基因表达,鉴定细胞分化.结果 将5-aza诱导形成的:EBs黏附培养后,在EBs周围的生长晕中出现自发性节律收缩的细胞团片,α-sarcomeric:actin及cTnT染色阳性,表达GATA-4、αMHC基因.10μmol/L5-aza处理组心肌细胞分化率较高.结论 5-aza暴露结合悬浮培养可诱导P19细胞向心肌细胞分化,其分化与5-aza浓度有关.     

加强孕产妇系统管理，降低孕产妇和婴儿死亡率

孕产妇死亡率是衡量一个国家和地区社会经济、医疗卫生、妇幼保健水平的重要指标，只有加强孕产妇系统管理，才能降低孕产妇和婴儿的死亡率。孕产妇系统管理是指对孕妇产前、产时、产后整个过程的管理。     

伪人参皂苷GQ的排泄试验研究

目的:研究大鼠舌下静脉给药伪人参皂苷GQ后,其在胆汁、粪和尿中的排泄情况。方法:采用高效液相-蒸发光散射色谱(HPLC-ELSD)法测定大鼠胆汁、粪和尿中伪人参皂苷GQ,Diamonsil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以甲醇-水(24∶7)为流动相,流速1.0 mL.min^-1,检测温度为50℃,灵敏度为10,以氮气为载气,压力为303 975 Pa。结果:HPLC-ELSD测定方法的标准曲线线性关系、样品回收率和日内、日间精密度均符合要求。伪人参皂苷GQ大鼠舌下静脉给药后,主要以胆汁排泄为主,占总药量的41.60%;其次为粪排泄,占总药量的9.97%;尿液中仅检出少量伪人参皂苷GQ。结论:大鼠胆汁、粪和尿中主要以伪人参皂苷GQ原形药物排泄。     

豚鼠耳蜗内Corti氏器NOS免疫组织化学研究的体会

内耳骨迷路埋藏在颞骨岩部内 ,对内耳的免疫组化研究技术关键在于脱钙 ,既要制作出完整的耳蜗切片 ,又要保存抗原。特别是一氧化氮合酶 ( NOS)本身是一种蛋白质 ,更容易受温度和酸度的影响。本实验选用中性脱钙剂对内耳进行脱钙 ,改良石蜡包埋法进行石蜡包埋切片 ,取得了良好效果。现介绍如下 :1 .实验材料与方法 :( 1 )取豚鼠1 0只 ,快速断颈处死 ,沿外耳颞侧暴露出内耳 ,取出螺旋器 ,先从蜗底以 5号针刺一小孔 ,再吸取适量的 4%多聚甲醛固定液 (用p H7.4的 0 .1 M PB配制 )自蜗顶注入膜蜗管内 ,将螺旋器放入 4%多聚甲醛固定液内继续固…     

三刺三才刺结合溶栓抗凝通脉治疗下肢深静脉血栓形成后综合征68例

目的：观察三刺三才刺凤凰展翅行针拔罐结合溶栓抗凝通脉治疗下肢深静脉血栓形成后综合征的临床疗效。方法：把68例下肢深静脉血栓形成后综合征患者随机分为2组,观察组采用三刺三才刺凤凰展翅行针拔罐结合溶栓抗凝通脉,对照组单纯溶栓抗凝通脉。结果：观察组比对照组血浆 D －二聚体下降快（P ＜0.05）,下肢周径差更缩小（P ＜0.001）,疗效更好（P ＝0.040）。结论：三刺三才刺凤凰展翅行针拔罐结合溶栓抗凝通脉治疗下肢深静脉血栓形成后综合征临床疗效好,值得进一步探讨和研究,并应用到临床。     

超声对胎盘早剥的诊断价值

妊娠20周后或分娩期正常位置的胎盘在胎儿娩出前，部分或全部从子宫壁剥离称胎盘早剥。胎盘早剥是妊娠晚期严重并发症，具有起病急，发展快的特点，若处理不及时可危及母儿生命。所以，及时诊断，正确处理，对挽救母婴生命尤为重要。     

2型糖尿病大鼠心肌细胞病理改变与罗格列酮的干预效应

目的:观察罗格列酮对2型糖尿病大鼠心肌细胞病理改变的作用。方法:实验于2003-01/2003-10在河北医科大学第二医院动物室,河北医科大学电镜室、组胚教研室完成。选择健康8周龄SD雌性大鼠40只。随机选用10只大鼠为对照组:普通饲料喂养。12周时每日给予同实验组等体积的高压消毒水灌胃。给予其余30只大鼠高脂高糖饲料喂养。6周时,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(30mg/kg,溶于0.1mol/L枸橼酸缓冲液中,pH4.4)。8周时,24只空腹血糖≥7.8mmol/L(造模成功)。12周时将24只大鼠随机分为糖尿病组和罗格列酮组各12只。罗格列酮组:每日给予罗格列酮1.42mg/(kg·d)灌胃治疗。糖尿病组:每日给予同罗格列酮组等体积的高压消毒水灌胃。24周麻醉大鼠,取出心脏,然后取部分左心室组织置于中性甲醛固定,脱水,石蜡包埋,常规切片,进行苏木精-伊红染色,光镜下观察心肌细胞病理变化,另取部分心室组织透射电镜下观察心肌细胞超微结构变化。结果:①因造模失败脱失6只,最终进入结果分析34只。②光镜可见对照组大鼠心肌细胞排列整齐,致密,结构清晰,细胞核呈卵圆形。糖尿病组大鼠心肌细胞排列紊乱,扭曲,间质有免疫细胞聚集。罗格列酮组心肌细胞排列趋于整齐,结构接近正常。③电镜可见对照组大鼠心肌细胞排列整齐,密集,细胞连接清晰。细胞核呈卵圆形,胞浆内可见大量的结构正常的线粒体和糖原。糖尿病组大鼠肌纤维排列紊乱、稀疏,线粒体肿胀,数量减少,糖原减少。罗格列酮组心肌细胞的结构基本接近正常。结论:罗格列酮可以减轻糖尿病大鼠心肌细胞的病理改变,延缓糖尿病心肌病变的发展。     

大鼠骨骼肌成肌细胞与乳鼠心肌细胞共培养对缝隙连接蛋白43表达的影响

目的 观察体外共培养的乳鼠心肌细胞与大鼠骨骼肌成肌细胞(简称L6细胞)以及乳鼠心肌细胞与转染外源性缝隙连接蛋白43(Cx43)基因的L6细胞(简称L6-Cx43细胞)间Cx43蛋白的表达情况,从而探讨共培养时心肌环境对成肌细胞的作用.方法 将乳鼠心肌细胞与4′,6-二脒基-2-苯基吲哚标记的大鼠骨骼肌成肌细胞进行共培养...     

重庆市2010年手足口病流行病学特征

目的分析重庆市2010年手足口病流行特征,为手足口病的防治提供科学依据。方法下载"疾病监测信息报告管理系统"疫情数据,描述病例流行病学特征,收集重庆市手足口病监测资料,分析死亡病例流行特征及实验室检测结果。结果 2010年报告病例19970例,重症42例,死亡26例,发病率为69.85/10万,死亡率为0.091/10万。4-5月为发病高峰,主城区比远郊区县高发,1～3岁组的散居儿童为高发人群。0～3岁男性散居儿童为手足口病死亡的高危人群,临床表现以高热、手足部出疹为主,伴有不同程度的神经、呼吸、循环、消化系统症状和体征。聚集性病例多发生在学校和幼托机构。荧光PCR检测阳性率为63.26%,轻症病例以柯萨奇病毒A16型为主(39.09%),但引起死亡的均为肠道病毒71型,病毒分离率为24.30%。结论手足口病疫情的防控重点应放在及时发现重症病例,加强重症病例的临床就治,降低死亡率等方面。