早期惨叫声音应激对雌鼠学习记忆能力的影响

目的：探讨早期惨叫声音应激对雌鼠成年后空间学习记忆能力、血清去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)及皮质酮(corticosterone,CORT)水平和肾上腺形态的影响。方法：通过对新生Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠施加惨叫声音应激(21 d),建立SD雌性大鼠早期应激模型。成年后采用Morris水迷宫方法检测早期应激对其空间学习记忆能力的影响;分离血清,采用放射免疫法测定血清中NE和CORT的浓度;摘取肾上腺,以甲醛固定、石蜡包埋、切片后采用HE染色观察肾上腺形态变化。结果：早期惨叫应激后大鼠的逃离潜伏期明显变短(P<0.05),穿越平台次数显著增多(P<0.05);血清NE含量升高、CORT升高趋势明显(P<0.05);肾上腺充血较为明显、细胞增大。结论：新生雌鼠早期惨叫声音应激增强了成年期的空间学习记忆能力,使下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴和交感神经系统活化。     

激光捕获显微切割结合RNA线性扩增技术在膀胱移行细胞癌相关基因研究中的应用(英文)

目的当对有间质细胞混杂的膀胱移行上皮细胞与膀胱移行细胞癌进行基因差异表达分析时,激光捕获显微切割技术(laser cap-ture microdissection,LCM)是不可缺少的,然而从 LCM 所得的细胞中获取足够 RNA 量相当困难。本文首次将 LCM 与 RNA 线性扩增结合用于膀胱癌相关基因研究,目的是确定一条切实可行的技术路线,将膀胱移行上皮细胞从膀胱粘膜中分离出来,将膀胱癌细胞从肿瘤间质细胞中分离出来,并对其进行 RNA 体外线性扩增,以备进一步研究。方法采用 LCM 技术分别从正常膀胱粘膜及膀胱癌组织冰冻切片中获取膀胱移行上皮细胞及膀胱癌细胞,提取 RNA,并对微量RNA 进行体外线性扩增。然后用 RT-PCR 验证扩增前、后 RNA 中β-actin 基因表达水平。结果对照实验Ⅰ证实经 LCM 后 RNA 完整性较好;经对照实验Ⅱ初步确定设定条件下 LCM shooting 次数与可获得 RNA 量间对应关系。从膀胱粘膜种捕获膀胱移行上皮细胞25万 shootings;从膀胱癌组织中获取癌细胞20万 shootings。产物 RNA 扩增后获得片段大小为0.5～2.5kb 的 aRNA,且β-actin 基因表达表达完整。结论 LCM 结合 RNA 体外线性扩增技术能成功地获取较为单一的研究目的细胞,扩增后 RNA 完整性较好,能用于进一步研究中。