丝素蛋白来源的一体化纤维环-髓核支架的制备与评估

目的 评估以丝素蛋白为材料构建的一体化纤维环-髓核双相支架作为组织工程椎间盘支架的可行性。方法 以丝素蛋白溶液为原料, 分别采用石蜡球致孔法和相分离法制备三维多孔一体化纤维环-髓核支架。采用体视显微镜、 扫描电镜观察支架内部结构, 测定双相支架纤维环相和髓核相的孔径、 孔隙率及一体化压缩弹性模量; 分离培养兔纤维环细胞和髓核细胞, 接种至双相支架的相应部位, 体外培养 48 h, 扫描电镜、 死活 （Live/dead） 细胞染色评价支架与细胞的生物相容性; CCK-8 检测细胞的增殖活性。结果 体视显微镜和扫描电镜可见双相支架纤维环相和髓核相均呈相互连通的多孔结构, 孔隙高度连通, 纤维环髓核交接区域结合紧密; 纤维环相孔径为 （220.0±23.1）μm, 髓核相孔径为 （90.0±17.8） μm; 孔隙率分别为 91%和 93%; 一体化支架压缩弹性模量为 （150.7±6.8） kPa。扫描电镜可见均匀地黏附在支架表面, 细胞周围有细胞外基质分泌; Live/dead 染色显示细胞在支架上活性良好, 无死细胞;CCK-8 增殖分析显示纤维环细胞和髓核细胞均具有良好的增殖活性。结论 以天然丝素蛋白构建一体化纤维环髓核双相支架, 具有良好的孔径、 孔隙率和细胞相容性, 一体化支架两部分结合紧密, 并且具有优越的力学性能, 是构建组织工程椎间盘的理想支架载体。     

新型丝素蛋白支架复合兔髓核细胞体内初步构建组织工程髓核的研究

目的探讨新型丝素蛋白多孔支架复合经PKH26标记的兔髓核细胞初步构建组织工程髓核的可行性。方法消化分离兔髓核细胞,培养获取P1代细胞,对P1代髓核细胞行番红O以及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色;PKH26标记兔髓核细胞,MTT法检测标记前后髓核细胞增殖情况,将标记后的细胞接种支架,体外培养4 d后,将细胞-支架复合物植入裸鼠皮下,体内培养12周后,进行活体荧光成像技术检测、HE染色、甲苯胺蓝染色、番红O染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果 P1代髓核细胞番红O染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性;标记后细胞荧光强度分布均匀,标记前后髓核细胞光密度(OD)值比较差异无统计学意义(P>0.05);活体成像技术显示裸鼠皮下植入的细胞-支架复合体呈现强烈荧光;HE染色见多孔支架内壁有大量髓核细胞填满并分泌大量细胞外基质;甲苯胺蓝染色、番红O染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色均呈阳性,细胞周围大量细胞外基质分泌。结论以新型丝素蛋白多孔支架复合兔髓核细胞经体内培养形成的类髓核样组织,可用于组织工程化髓核的构建。     

不同休克程度产后出血患者DSA影像表现与临床治疗效果比较分析

目的探讨不同休克程度产后出血患者DSA影像特点,比较分析不同治疗方法的临床治疗效果,为临床医师选择合适的治疗方法提供参考依据。方法收集整理我院治疗产后出血132例患者的临床资料进行休克程度分度,依据不同治疗方法分组,采用产科治疗的患者称为产科组,采用介入治疗的患者称为介入组。比较两组患者不同休克程度产后出血治疗的休克纠正时间、补血量、补液量、子宫保有率及康复时间有无统计学意义;比较不同休克程度DSA表现。结果轻度休克的患者共61例,产科组37例,采取保守治疗,介入组24例,采取介入治疗,两组均无子宫切除,两组患者休克纠正时间、康复时间比较有统计学意义,补血量、补液量、子宫保有率比较无统计学意义,DSA图像可见子宫染色较浓;中度休克的患者共40例,产科组19例,其中采用双侧子宫动脉/髂内动脉结扎术18例,子宫全切术1例,介入组21例,采取介入治疗,无子宫切除。两组患者休克纠正时间、补血量、补液量、康复时间比较有统计学意义,子宫保有率比较无统计学意义,DSA图像可见子宫局部呈“小点”状或“小片”状对比剂外溢及积聚征象;重度休克的患者共31例,产科组13例,其中采用双侧子宫动脉/髂内动脉结扎术8例,子宫全切术5例,介入组18例,采取介入治疗,术后1例行子宫全切术,DSA图像可见“片”状、“大片”状或“团”状对比剂外溢或积聚。结论不同休克程度产后出血患者DSA影像表现不同,揭示出血情况不同;轻度休克的患者产科治疗、介入治疗均可选择,治疗效果均佳;中度休克的患者产科治疗、介入治疗均可选择,介入治疗的效果优于产科治疗;重度休克的患者应首选介入治疗,介入治疗的效果明显优于产科治疗;产后出血的治疗应根据不同的医疗条件、不?     

人附睾蛋白4化学发光定量测定法的建立与评价

目的建立人附睾蛋白4(HE4)的化学发光定量检测方法,并进行方法学评价。方法血清中HE4与包被抗HE4单克隆抗体的微磁珠和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗HE4单克隆抗体反应形成双抗体夹心结构,HRP可催化发光底物液(含鲁米诺-H2O2-增强剂)产生大量光信号,根据光信号的量计算血清中HE4的浓度。依据国家体外诊断试剂性能评价指南性文件和美国临床和实验室标准化协会(CLSI)指南性文件,对本方法进行系统评价。结果建立的方法空白限(LoB)为1.014pmol/L、检测限(LoD)为5.252 pmol/L、定量检测限(LoQ)为10.568 pmol/L;甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)≤400 IU/mL、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)≤1 777μg/L、糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)125≤3 500 U/mL、CA19-9≤3 500U/mL对本方法无明显交叉反应;线性范围为20~1 700 pmol/L;在100 000 pmol/L时未出现明显钩状(Hook)效应;批内变异系数(CV)为1.5%~3.6%;日间CV为3.8%~6.4%;回收率为98.36%~99.14%;血红蛋白≤4.8 g/L、胆红素≤1 077.5μmol/L、乳糜微粒≤6 000浊度、生物素≤50μg/L、类风湿因子≤1 000 U/L对测定结果无明显影响;37℃保存7 d后相对偏差为-6.63%~10.23%;建立的方法(Y)与Fujirebio公司的ELISA试剂(X)进行方法学比对,相关曲线为Y=1.023X-12.280,r=0.989 7(P0.01)。结论本研究建立的HE4磁微粒化学发光免疫测定法各项性能符合临床实验室需求,为卵巢癌的辅助诊断提供了有效工具。     

极低和超低出生体重儿高频次输血相关因素分析

目的:分析影响极低和超低出生体重儿高频次输血的相关危险因素,为此类患儿临床输血治疗提供帮助。方法:回顾性分析2019年1月—2022年6月出生并输血的极低出生体重儿(very low birth weight infant, VLBWI)和超低出生体重儿(extremely low birth weight infant, ELBWI)临床资料。根据输血次数分为普通组(输血次数≤3次)和高频次组(输血次数>3次),收集2组患儿的一般资料、住院期间疾病发生和治疗情况及母亲一般情况,比较2组差异,通过Lasso回归结合logistic回归分析影响VLBWI和ELBWI高频次输血的危险因素。结果:本研究共纳入142例,其中普通组79例,高频次组63例。2组间出生体重、胎龄、阿氏评分1 min、阿氏评分5 min、出生时血红蛋白、住院时长、首次输血日龄、首次输血前抽血次数、累计输血量、平均输血量、新生儿败血症、早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity, ROP)、新生儿脑病、支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia, BPD)比...     

白细胞介素-37在结肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞增殖、侵袭的作用

目的 探讨白细胞介素-37(IL-37)在结肠癌组织中表达的变化,并通过体外实验探讨其对结肠癌细胞增殖、侵袭的作用.方法 收集2017年4月—2019年4月在西安市第四医院手术切除的结肠癌组织及对应的癌旁组织,检测其IL-37的表达量;培养结肠癌HT29细胞,随机分为对照组、转染空白pcDNA3.1质粒的空白质粒组、转...     

改良Cordis圈套器的临床应用

目的 探讨可回收下腔静脉滤器回收失败时,使用改良Cordis圈套器进行滤器回收的临床应用效果。方法 回顾性分析2010年1月—2014年12月河北医科大学第三医院血管外科收治的128例可回收下腔静脉滤器置入并回收患者的临床资料。其中,男72例,女56例;年龄16～87岁,平均(48±8.1)岁。患者均首先采用Cordis圈套器回收下腔静脉滤器,对于回收失败者采用改良Cordis圈套器进行下腔静脉滤器回收。观察改良Cordis圈套器进行滤器回收的临床效果及患者并发症发生情况。结果 128例患者中,98例采用Cordis圈套器成功回收,30例回收失败患者采用改良Cordis圈套器后,全部成功回收。使用Cordis圈套器与改良Cordis圈套器患者术中、术后均无血管破裂、出血、血肿形成等并发症发生。结论 改良Cordis圈套器克服了Cordis圈套器支撑力弱的缺点,对被血栓包埋的回收钩有切割作用,为Cordis圈套器回收失败提供了一种安全、有效的解决方法。     

无标签NT-proBNP重组蛋白的获得及多克隆抗体的制备

摘要：目的：通过原核表达,获得不带标签的NT-proBNP重组蛋白,并用其免疫新西兰大白兔,制备兔抗NT-proBNP抗体。 方法：从重组菌pET-32a(+)-NT-proBNP提取重组质粒,通过PCR扩增出目的DNA片段,插入pCold TF载体,转化入大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白。经镍柱亲和纯化、HRV 3C蛋白酶酶切、镍柱亲和纯化,制备不带标签的纯蛋白质,并用临床商品化试剂盒验证其抗原性。用该蛋白质免疫新西兰大白兔制备抗体,western blot鉴定其特异性。 结果：成功获得高纯度的不带标签的NT-proBNP蛋白,该蛋白质能被商品化的试剂盒识别。用该蛋白质免疫新西兰大白兔成功制备出高效价高特异的抗体。 结论：成功制备高纯度的无标签NT-proBNP蛋白及其多克隆抗体,为NT-proBNP在临床上的广泛应用奠定了基础。     

强化管理护理模式对腹腔镜子宫肌瘤切除术后患者生活质量的影响

目的 探讨强化管理护理模式对腹腔镜辅助下行子宫肌瘤切除术后患者生活质量的影响.方法 选取2015年2月至2019年1月间西安市人民医院收治的行腹腔镜辅助切除术治疗的94例子宫肌瘤患者,按照护理方式不同分为两组.采用传统护理的47例患者纳入传统组,采用强化管理模式护理的47例患者纳入强化组.比较两组患者的生活质量评分、免...     

糖化血红蛋白、胰岛β细胞功能在妊娠糖尿病诊断中的临床价值

目的:探讨糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素释放水平和胰岛β细胞功能指标在妊娠糖尿病(GDM)诊断中的临床价值。方法:选取2016-01—2017-04在西安市第四医院产科门诊就诊的405例孕24~28周产前检查妇女为研究对象,将其分为GDM组289例,糖耐量正常(NGT组)116例,行75g口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素释放试验,分别测定HbA1c、血糖、胰岛素水平。根据血糖结果,将GDM组进一步分为GDM1组:空腹血糖≥5.1mmol/L;GDM2组:1h血糖≥10.0mmol/L;GDM3组:2h血糖≥8.5mmol/L;GDM4组:多点血糖异常(2点或2点以上血糖异常)。比较不同时间点血糖特点患者的稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMAIR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、葡萄糖曲线下面积(AUCG)、胰岛素曲线下面积(AUCI)和胰岛素敏感性(ISI)。结果:(1)与NGT组比较,GDM组的HbA1c、血糖、胰岛素均显著增高,差异有统计学意义(P0.01);(2)GDM组的AUCG、AUCI、HOMA-IR与NGT组比较均明显升高,差异有统计学意义(P0.01或P0.05),HOMA-β、ISI与NGT组比较均明显降低,差异有统计学意义(P0.01或P0.05);(3)其中GDM1-4组的AUCG,GDM1、2、4组的AUCI,GDM1、3、4组的HOMA-IR均高于NGT组(P0.01或P0.05);GDM2、3、4组的HOMA-β,GDM1-4组的ISI均低于NGT组(P0.01或P0.05);(4)相关性分析结果显示,各时间点血糖均与HOMA-IR呈正相关,其中空腹血糖(FPG)与HOMA-IR的相关性最大(r=0.51),同时FPG与HOMA-β呈负相关(r=-0.28),餐后各时间点血糖与HOMA-β关系不大,各时间点血糖均与ISI呈负相关(P0.01)。结论:HbA1c能更好地反映GDM患者的血糖水平且结果稳定,胰岛素释放试验能反映GDM患者的胰岛β细胞功能,GDM患者的胰岛素抵抗较NGT增高,胰岛分泌功能下降,不同时间点的血糖孕妇其基础状态及糖负荷后的胰岛素分泌功能均有不同程度受损。