DWI鉴别子宫癌肉瘤与Ⅰ级子宫内膜样腺癌

目的 探讨ADC值及DWI相对信号强度（rSI）鉴别诊断子宫癌肉瘤与Ⅰ级子宫内膜样腺癌的价值。方法 经手术病理证实的13例子宫癌肉瘤和23例Ⅰ级子宫内膜样腺癌患者均接受常规MRI及DWI扫描,测量并比较2种肿瘤的平均ADC值（ADC_mean）、最小ADC值（ADC_min）及rSI。结果 子宫癌肉瘤rSI（8.20±1.77）高于Ⅰ级子宫内膜样腺癌（6.95±2.19,P=0.04）。以rSI=7.42为临界值,rSI鉴别诊断子宫癌肉瘤与Ⅰ级子宫内膜样腺癌的ROC曲线下面积为0.71（P<0.05）,敏感度、特异度和准确率分别为69.23%、60.87%和61.11%。子宫癌肉瘤与Ⅰ级子宫内膜样腺癌间ADC_mean和ADC_min差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 ADC值鉴别诊断子宫癌肉瘤与Ⅰ级子宫内膜样腺癌的价值有限,DWI的rSI有助于鉴别。     

LASIK术后边缘无菌性角膜浸润

Lasik术后边缘无菌性角膜浸润是一种见于Lasik术后1～5天罕见并发症。发病机制目前认为可能与免疫反应有关,有待进一步观察。     

甲状腺细针穿刺细胞病理学检查分析

目的:分析甲状腺经细针穿刺细胞病理学检查的临床应用价值.方法:选取2018年3月至2019年我院收治的76例甲状腺细针穿刺患者,均甲状腺穿刺,分析病理细胞,讨论检验价值.结果:共计71例成功检验,成功率为93.42％;良性结节47(61.84％)例,包含甲状腺囊肿14例,甲状腺功能亢进症并发桥本甲状腺炎2(2.63％)...     

金属镉促进甲状腺未分化癌FRO细胞增殖的作用及机制

目的 探讨金属镉对甲状腺未分化癌FRO细胞增殖的影响及其作用机制.方法 Western blot法检测FRO、MCF-7和MAD-MB-231细胞中G蛋白偶联受体1(G protein-coupled estrogen receptor,GPER1)表达水平.不同浓度(0、0.25、0.50、0.75、1.00 mmol/L)镉(CdC12)处理FRO、MCF-7及MAD-MB-231细胞48 h后,MTF法检测细胞增殖率.0.5 mmol/L镉分别处理FRO细胞0、5、10、15、30 min,Western blot法检测ERK1/2和Akt的磷酸化水平.GPER1抑制剂G15处理FRO细胞后,设计合成针对GPER1的小干扰RNA(GPER-siRNA)并转染FRO细胞,采用Western blot再次检测ERK1/2和Akt磷酸化水平.分别用GPER1抑制剂G15、ERK1/2抑制剂(PD98059)和PI3 K-Akt抑制剂(LY294002)、GPER-siRNA处理FRO细胞,MTT法检测细胞增殖率.结果 GPER1在MAD-MB-231细胞中表达水平明显低于MCF-7、FRO细胞.不同浓度CdC12处理FRO、MCF-7及MAD-MB-231细胞48 h后,低浓度CdCl2促进FRO、MCF-7细胞增殖,对MAD-MB-231细胞增殖无显著影响;高浓度CdC12对细胞均具有抑制作用.0.5 mmol/L CdC12处理FRO细胞不同时间后,ERK1/2与Akt的磷酸化水平在15 min达最大值.GPER1抑制剂G15处理FRO细胞,ERK1/2与Akt的磷酸化水平显著降低(P＜0.05).GPER1的小干扰RNA干扰后,ERK1/2与Akt的磷酸化水平明显降低(P＜0.05).G15、PD、LY和GPER-siRNA处理FRO细胞,细胞增殖率均显著下降.结论 金属镉通过GPER1-ERK/Akt信号通路促进FRO细胞的增殖.     

血清HE4、CA125检测及ROMA模型在卵巢癌诊断中的应用价值

目的 探讨人附睾分泌蛋白4(HE4)、糖类抗原125(CA125)及卵巢恶性肿瘤风险预测模型(ROMA)在卵巢癌诊断中的应用价值.方法 采用酶联免疫吸附试验及化学发光方法检测56例卵巢癌患者、73例卵巢良性肿瘤患者及50例健康对照者血清HE4及CA125水平,根据患者的绝经状况通过公式计算ROMA指数,绘制受试者工作特征(ROC)曲线并计算曲线下面积(AUC).结果 HE4、CA125水平及ROMA指数在卵巢癌组分别为(345.33士605.03)pmol/L、(701.46±1 500.30)U/mL、(58.72±31.00)％,卵巢良性肿瘤组分别为(53.84±14.68)pmol/L、(44.25±45.81)U/mL、(10.80±6.75)％,健康对照组分别为(46.03±10.26) pmol/L、(17.39±10.64) U/mL、(6.92±3.85)％,卵巢癌组血清HE4、CA125水平及ROMA指数高于卵巢良性肿瘤组,差异有统计学意义(P＜0.05).健康对照组和卵巢良性肿瘤组比较,HE4水平和ROMA指数差异无统计学意义(P＞0.05).而CA125水平差异有统计学意义(P＜0.05).血清HE4、CA125水平和ROMA指数对卵巢癌诊断的灵敏度分别为71.43％、76.79％、89.28％,特异度分别为93.15％、53.42％、94.52％,ROC-AUC分别为0.930、0.809、0.937,当对卵巢癌诊断的特异度为95.00％时,HE4、CA125和ROMA指数对卵巢癌诊断的灵敏度分别为80.40％、53.60％和83.90％.结论 联合检测HE4和CA125计算ROMA指数对卵巢癌诊断灵敏度和特异度较高.     

Decorin基因过表达对HEK 293T细胞微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达的影响

目的:构建人核心蛋白聚糖(DCN)重组质粒,研究其对微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达的影响。方法:从人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)提取总RNA,经RT-PCR获得decorin的全长cDNA,克隆至T-载体pUM-T并测序,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,再次测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,利用RT-PCR、Western Blot方法检测空载体组和重组质粒转染组微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl转录水平及翻译水平的表达。结果:经DNA测序证实人DCN cDNA片段正确插入真核表达载体中。Western Blot结果显示经磷酸钙共沉淀法转染的HEK 293T细胞中目的基因高表达。RT-PCR和Western Blot结果显示,与空载体组相比,重组质粒转染组LC3转录水平显著降低,beclin1和LC3-II的翻译水平均显著降低。结论:成功构建人DCN重组质粒,其在HEK 293T中过表达可以显著降低微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达,为进一步研究DCN与自噬的相互作用奠定了基础。     

利用退火反应产生粘性末端的基因克隆新方法

目的通过引物设计和退火反应产生内切酶的粘性末端,旨在开发一种高效、简单、可靠的分子克隆方法。方法选定限制性内切酶（平末端或者粘性末端）设计3条或4条引物,同时进行两次独立的聚合酶链式反应（PCR）,随后把两次PCR产物回收后混在一起经过解链退火,再将其与双酶切的载体质粒进行连接反应,最后转化即可得到目的克隆。结果利用此方法成功一次性将若干靶基因（P90rsk、Nprl2、Mios、Ragc、S6k、Pkca）构建在经EcoRV和NotI双酶切后的pcDNA3.1(+)载体上,经酶切及测序验证。结论该方法无需考虑靶基因内部是否存在酶切位点,可省去PCR产物酶切及之后的纯化回收过程,可快速并准确地克隆目标基因。     

慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达

目的分析慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达,初步探讨其分化表型。方法采集分离健康人和慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC),利用多种荧光标记抗体标记细胞表面分子,再用流式细胞仪检测CD8 和CD4 T淋巴细胞表面CD27和CD28分子的表达。结果31例慢性乙型病毒性肝炎患者CD8 CD27 CD28 T细胞占CD8 T细胞(41.13±24.89)%,低于28例健康对照组的(71.93±14.47)%(P<0.05)。而CD8 CD27-CD28-T细胞占CD8 T细胞(42.16±10.98)%,显著高于健康对照组的(9.16±5.24)%(P<0.01)。慢性乙型病毒性肝炎患者CD4 CD27 CD28 T细胞(80.89±7.93)%和健康对照组(83.17±8.31)%比较,差异无统计学意义。结论健康人外周血T淋巴细胞以CD27 CD28 早期分化表型为主。而慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中不同的亚群分化特征又有所不同,CD4 T淋巴细胞的分化表型仍然以CD27 CD28 早期分化表型为主,而CD8 T淋巴细胞中早期分化表型明显减少,晚期分化表型(CD27-CD28-)显著增加。     

大鼠Uqcrfs1重组质粒的构建及其在HEK293T细胞中的表达

目的:构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法:应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK 293T细胞,使用RT-PCR、Western Blot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果:测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论:成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。     

天然药物成分致突变性风险预测与评价方法研究进展

天然药物成分复杂，无法逐一完成系统的致癌性风险评价及体内遗传毒性试验。鉴于计算机毒理学结合体外致突变风险评价方法在遗传毒性杂质致突变性评价方面的快速发展，也可考虑将此评价模式应用于天然药物成分的致突变性筛选与机制研究。从计算机毒理学和体外致突变性评价两方面出发，综述天然药物致突变性的研究方法，为其遗传毒性试验评价及监管提供借鉴。