一个新的MPL基因异常剪接体MPL L391-V392ins12的鉴定及其在248例骨髓增殖性肿瘤患者中的筛查结果

目的 鉴定MPL L391-V392ins12异常剪接体,了解其在骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者中突变发生情况.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)联合克隆测序方法对MPL基因异常剪接体进行鉴定,采用等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)在248例MPN患者及200名健康正常人中筛查其突变情况.结果 发现并确认了MPL基因的一个异常剪接体MPL L391-V392ins 12,即MPL基因的外显子7和外显子8之间保留了36 bp的内含子序列,导致蛋白编码序列的氨基酸位点391与392之间插入12个氨基酸(谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、缬氨酸).248例MPN患者中19例(7.66％)检出MPL L391-V392ins12突变,真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、原发性骨髓纤维化(PMF)患者的检出率分别为1.92％(1/52)、9.66％(14/145)、7.84％ (4/51);200名正常人中未检测到MPL L391-V392ins12突变.结论 MPL L391-V392ins12是存在于MPN中的一种病理性剪接体,在PV、ET、PMF中均可发生,但多见于ET、PMF,可能是MPN发病的潜在原因之一.     

异牛肝菌素对人胃癌细胞生物学特性的影响及机制

目的 探讨异牛肝菌素对人胃癌细胞（SGC-7901）生物学特性的影响及机制。方法 取对数生长期SGC-7901细胞，用2.83、5.66和11.32μmol/L异牛肝菌素分别作用于SGC-7901细胞，设为异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组和异牛肝菌11.32μmol/L组，异牛肝菌0μmol/L组仅加入等容量生理盐水。CCK-8法检测SGC-7901细胞增殖，流式细胞术检测SGC-7901细胞凋亡，Transwell检测SGC-7901细胞侵袭，细胞划痕实验检测细胞迁移，克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，采用Real-time PCR法检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin mRNA表达，Western blotting法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达，流式细胞术检测活性氧（ROS）水平。结果 与异牛肝菌0μmol/L组相比，异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组、异牛肝菌11.32μmol/L组细胞增殖...