小分子化合物多克隆抗体纯化方法优化及比较研究

目的比较多克隆抗体的纯化方法,探讨多克隆抗体纯化的优化方案。方法以丙烯酰胺多克隆抗体为纯化对象,进行抗体浓度、识别特征、亲和常数等对比研究,比较盐析(辛酸-饱和硫酸铵法)、蛋白G亲和纯化、载体蛋白亲和纯化、全抗原亲和纯化4种抗体纯化方法对于小分子多克隆抗体的纯化效果。结果采用的4种方法对于多克隆抗体的纯化效果有一定差异,蛋白G亲和纯化与载体蛋白纯化联合使用的纯化效果较为理想,获得的抗体纯度高、单一识别小分子抗原,且具有最佳的亲和常数。结论通过本文研究,优化的蛋白G亲和纯化与载体蛋白纯化的组合方案提高了多克隆抗体质量,为后续免疫分析方法研究提供技术基础。     

内镜下双气囊扩张治疗贲门失弛缓症的疗效

目的评价内镜直视下双气囊扩张治疗贲门失弛缓症的疗效和安全性。方法 2005年1月—2009年10月,沈阳军区总医院采用经内镜双气囊扩张治疗贲门失弛缓症的患者54例,分析术前及术后的症状评分,并评价其疗效及术后并发症情况。结果 54例患者首次均采用2种不同直径(12和15 mm)的气囊进行扩张。扩张术后1、6、12个月的症状评分均显著低于扩张术前(P值均<0.01)。术后1个月的疗效评估示扩张成功率达92.6%(50/54)。并发症包括疼痛(100%)、出血(33.3%)、反流(9.3%)和发热(1.9%)。结论内镜下双气囊扩张术是治疗贲门失弛缓症的一种安全、有效的方法。     

血清miR-133a在脓毒症心肌损伤患者诊断及预后评估中的临床价值

目的探讨miR-133a在脓毒症心肌损伤患者临床诊断及预后评估中的价值。方法选取脓毒症心肌损伤患者50例作为研究对象（观察组）,根据入住ICU 28 d内是否存活,分为存活组（30例）及死亡组（20例）。另选取该院体检中心健康体检者25例作为对照组;收集其临床资料及相关观察指标,检测患者入组后第24、48、72小时患者血清心肌肌钙蛋白Ｉ（cTnI）、CK-MB,计算急性生理学与慢性健康状况评分系统 Ⅱ（APACHEⅡ评分）及序贯器官衰竭评分（SOFA评分）,运用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应技术（qRT-PCR）检测所有受试者血清miR-133a的表达水平,分析其与cTnI、APACHEⅡ评分的相关性,分析血清miR-133a在脓毒症心肌损伤患者诊断及预后评估中的价值。结果观察组与对照组在性别、年龄、体质指数方面差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,观察组心率、平均动脉压、WBC、乳酸、cTnI、CK-MB、BNP、APACHEⅡ评分、SOFA评分均明显升高（P<0.05）。观察组血清miR-133a表达水平与对照组相比明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。在入组24、48、72 h时,死亡组患者的cTnI、CK-MB浓度以及APACHEⅡ评分、SOFA评分、miR-133a表达水平均明显高于存活组,差异有统计学意义（P<0.05）,各个时间点检测的miR-133a表达水平和cTnI含量以及APACHEⅡ评分均呈显著正相关,差异有统计学意义（P<0.05）。乳酸、APACHEⅡ评分、cTnI、miR-133a表达水平等因素是脓毒症心肌损伤患者预后的影响因素（P<0.05）。结论脓毒症心肌损伤患者血清miR-133表达水平与cTnI及APACHE Ⅱ评分相关性好,可以作为诊断脓毒症心肌损伤的潜在生物学标记物,对预测疾病严重程度及预后有一定的临床价值。     

乳头嵌顿性胆源性结石的内镜治疗

目的 探讨乳头嵌顿性胆源性结石患者的内镜治疗策略及临床应用价值.方法 回顾性分析和总结沈阳军区总医院内窥镜科2003年6月-2008年12月经内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)治疗乳头嵌顿性胆源性结石患者90例的临床资料.临床均为梗阻性黄疸入院,并在内镜治疗中明确诊断为乳头嵌顿性胆源性结石,部分病例CT诊断提示乳头嵌顿性结石.内镜取石治疗主要采用还纳法和非还纳法,不能还纳的结石应用乳头括约肌切开术辅助插管和取石,结石常在乳头括约肌切开后自行脱出.结果 90例患者中50、70、80岁以上患者的百分比分别是44.4%(40/90)、18.9%(17/90)、8.9%(8/90),内镜取石治疗成功率100%,无死亡病例.还纳取石17例,非还纳取石73例.非还纳法患者先应用乳头括约肌切开术,其中弓形月切开36例,针状刀切开23例,两刀联合应用14例.术后鼻胆管引流59例.胆道内支架引流8例,应用胰管内支架12例.结论 乳头嵌顿性胆源性结石的内镜治疗是一种安全有效的方法,对于无法还纳的嵌顿性结石乳头括约肌切开术是治疗的关键性技术.     

茶叶及茶饮料中儿茶素和咖啡因的多组分HPLC分析方法

目的　建立茶叶及茶饮料中儿茶素和咖啡因多组分HPLC测定方法。方法　以水 -乙醇 (3∶7)为提取剂 ,超声提取 ,提取液离心后 ,采用C1 8柱分离 ,HPLC- UV检测。以 0 . 1%H3PO4 的甲醇溶液为流动相A ,0 .1%H3PO4 的水溶液为流动相B ,进行梯度洗脱 ,流速为 1ml min,检测波长为 2 10nm。结果　在给定的浓度范围内 ,各儿茶素组分和咖啡因的峰面积与其相应浓度呈现良好的线性相关 ,r>0. 999。添加已知儿茶素含量的茶粉回收试验结果显示 ,各组分儿茶素及咖啡因的平均回收率为 6 1. 7%～ 117. 4 % ,相对标准差 <10 %。结论　本方法分离度好 ,灵敏度高 ,准确快速 ,为研究儿茶素在机体内的吸收利用提供了可靠手段。     

葡萄酒中生物胺多组分的UVD/FLD串联HPLC方法研究

目的建立葡萄酒中多组分生物胺的柱前衍生反相高效液相色谱-荧光/紫外串联检测器的测定方法。方法以正丁醇/氯仿(1∶1)为萃取液提取葡萄酒中生物胺,丹磺酰氯为衍生剂,1,7-二氨基庚烷为定量内标,采用C18色谱柱分离,甲醇/水为流动相梯度洗脱,流速1.5ml/min,紫外检测波长254nm,荧光激发波长(Ex)350nm,发射波长(Em)520nm。结果色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、精胺和亚精胺在30分钟内得到良好分离。在给定的浓度范围内,各组分生物胺呈现良好线性相关(r>0.99)。在葡萄酒中添加生物胺混合标准溶液,平均回收率为79.2%~127.9%,相对标准偏差RSD小于10%。结论采用荧光/紫外检测器串联方法检测,满足了葡萄酒中多组分生物胺检测的需要。     

食品中丙烯酰胺的测定方法

2002年4月瑞典研究人员发现淀粉类食品在高温加工过程中产生大量丙烯酰胺。由于丙烯酰胺具有神经毒性、遗传毒性和致癌作用,这一发现引起了国际社会的高度重视,各国科学家分别对本国食品进行广泛分析,从而使食品中丙烯酰胺的测定方法取得了很大的进展。本文综述了食品中丙烯酰胺测定方法的进展,包括样品的提取、净化、衍生化、色谱方法及其和质谱联用技术的进展。     

母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠的免疫调节作用

目的研究母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠的免疫调节作用。方法30只豚鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及母牛分枝杆菌菌苗组。用卵白蛋白建立哮喘模型,母牛分枝杆菌菌苗组每只豚鼠在卵白蛋白致敏前10d肌注22.5μg母牛分枝杆菌菌苗。检测豚鼠肺组织IL4、IL5及IFNγmRNA表达,测定血清总IgE、卵白蛋白特异性IgE含量。结果母牛分枝杆菌菌苗组豚鼠肺组织IL4mRNA表达(OD值0.060±0.018)低于哮喘组(0.111±0.025,P<0.05)、IL5mRNA表达(0.052±0.006)低于哮喘组(0.106±0.030,P<0.05)、IFNγmRNA表达(0.127±0.051)高于哮喘组(0.041±0.018,P<0.05);血清总IgE(1.85±0.48)kU·L-1、卵白蛋白特异性IgE(0.59±0.07)kU·L-1均低于哮喘组对应的(3.75±0.60)kU·L-1和(1.40±0.17)kU·L-1(P均<0.05)。结论母牛分枝杆菌菌苗能够调节哮喘豚鼠肺组织Th1/Th2免疫反应并降低血清IgE含量。     

奥马珠单抗对支气管哮喘的治疗作用

免疫球蛋白E(IgE)在支气管哮喘发病中起关键作用。奥马珠单抗(omalizumab)是一种重组人源化抗IgE单克隆抗体,通过与游离IgE结合而显著降低游离IgE的水平,阻断IgE与肥大细胞、嗜碱粒细胞结合,防止炎症介质的释放。奥马珠单抗不但能够显著改善哮喘病人的症状、肺功能及生活质量,减少哮喘恶化的发作次数,减少糖皮质激素的用量,而且使用安全,哮喘病人耐受性良好,因此是一种前景广阔的治疗支气管哮喘的新药。     

动态监测诱导痰Tc1/Tc2比值在COPD患者中的临床价值

目的 探讨动态监测诱导痰Tc1/Tc2比值在COPD患者中的临床价值.方法 选取90例研究对象,分为不吸烟组为A组、戒烟组为B组、吸烟组为C组,每组30人,D组10例正常对照.入组后动态监测入院时、出院时、出院6月及12月诱导痰中相关指标并进行统计学分析.结果 A、B、C三组在各时间点CD8+T细胞％、Tc1/Tc2比...