神经元保护蛋白TAT-Bcl-XL的体外高效表达及其功能的初步研究

目的：在原核表达系统中表达对凋亡神经元具有保护作用的重要蛋白Bcl-XL与蛋白质转导序列（PTD）的融合蛋白，并检测重组蛋白对重金属离子所诱导的细胞凋亡的保护作用。方法：通过RT-PCR的方法，用Bcl-XL特异引物从乳腺癌细胞系MCF-7细胞的总RNA中扩增出Bcl-XL基因，构建相应的原核表达载体，体外表达的TAT-Bcl-XL融合蛋白经镍亲和层析介质纯化后，通过免疫荧光方法检测其转导293T细胞的能力；并用流式细胞仪检测融合蛋白抑制细胞凋亡的能力。结果：经RT-PCR从MCF-7细胞总RNA中得到相应的TAT-Bcl-XL基因片段，并将其克隆入pCRT7/CT-TOPO载体中，重组质粒pTBTOPO转化大肠杆菌后，在SDS-PAGE和Western blot的结果中出现了与预期分子量相同的蛋白条带和阳性信号，纯化的TAT-Bcl-XL重组蛋白经免疫荧光检测，主要分布于细胞的细胞质中。流式细胞仪的检测结果显示融合表达蛋白可以有效地抑制Zn2＋离子所诱导的细胞凋亡，使细胞的存活率提高40%。结论：TAT-Bcl-XL融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达，初步的功能性检测表明融合蛋白具有抑制细胞凋亡的功能。     

MTT法评价医用高分子材料的细胞毒性

为研究医用高分子材料的细胞毒性，采用能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的比色分析方法-MTT比色法，分别检测三类医用高分子材料的浸提液对小鼠成纤维细胞L929细胞相对增殖率的影响，评价其细胞毒性。参照美国药典的评价标准，三类医用高分子材料均呈现出高的细胞相对增殖率，其细胞毒性为l级，即无细胞毒性。     

针对S基因的siRNA或shRNA表达框对HepG2.2.15细胞中HBV基因表达和病毒复制的抑制作用比较

目的 化学合成针对乙型肝炎病毒（HBV）S基因的siRNA，同时制备针对相同区段的shRNA表达框，并比较二者对HepG2．2．15细胞中HBV基因表达和病毒复制的抑制作用。方法 化学合成针对HBVS基因的带有FITC标记的siRNA，设计合成带有FTrc标记的引物，PCR扩增含有RNA聚合酶Ⅲ启动子H1序列和shRNA编码序列的表达框，并对扩增产物进行纯化，将等摩尔数siRNA和shRNA表达框分别用脂质体转染稳定表达HBV的HepG2．2．15细胞，转染1d后流式细胞仪检测转染效率，转染3d后RT-PCR检测靶基因mRNA的水平，用SDS-PAGE、Westem blot及间接免疫荧光染色检测HBsAg的表达。收集转染前和转染后1、3、5和7d的细胞培养上清，检测HBsAg水平，同时用荧光定量PCR方法检测HBV　DNA的含量。结果成功制备了针对HBVS基因的shRNA表达框，将其与等摩尔数siRNA分别转染HepG2．2．15细胞后，RT-PCR证实细胞中HBV　mRNA水平降低，SDS-PAGE、Westem blot及间接免疫荧光染色检测到HBsAg的表达受到抑制，细胞培养上清中HBsAg和HBV DNA含量下降。与siRNA相比，shRNA表达框对HBV的抑制作用虽然起效较慢，但持续时间更长。结论shRNA表达框和siRNA均可明显抑制HBV的转录和表达，与siRNA相比，shRNA表达框能够更持久地抑制靶基因的表达。     

肝病患者血清T_3、T_4、TSH RIA的变化

我们自1993年6月以来对住院60例成人肝炎、肝硬变患者进行了血清T_3、T_4、促甲状腺激素(TSH)的RIA检测.结果发现肝硬变患者T_3、T_4有明显降低,与正常对照组和肝炎组进行t检验分析具有显著差异(P<0.001),而TSH无明显变化.现将结果报告如下.材料和方法一、对象:肝炎组27例(男24例,女3例),平均年龄40岁;肝硬变组33例(男31例,女2例),平均年龄42岁;正常对照组34例(男26例,女8例),平均年龄39岁.二、方法:TSH测定,RIA双抗体法;T_3、T_4测定,磁性微粒——抗体法.三、统计方法:包括平均数、标准差、t检验.     

精神分裂症病人及家属受歧视状况

目的：了解精神分裂症病人及其家属受歧视状况，探讨歧视对精神分裂症病人及其家属的影响。方法：应用自编问卷在北京地区对精神分裂症病人(N=225)、精神分裂症病人家属(N=230)、社区居民(N=257)和精神科医护人员(N=283)进行调查。结果：42％的病人报告他们受到了单位不公正对待，受到同事或同学歧视，被邻居看不起，并导致恋爱或婚姻失败。56%的家属报告为避免歧视把病人患精神病的事对外保密。全部4组受试中85％以上的人相信歧视会降低病人的自信心，75％以上的人相信歧视给家属造成很大的心理压力，70％以上的人相信歧视严重影响病人的生活，60％以上的人相信歧视使病人的家庭成员减少了他们应有的社交活动。与其他三组人群比较，精神科医护人员更同意精神病人及其家属受歧视是常见的现象，更相信歧视会给他们的生活带来严重影响。与病人和家属比较，对歧视现象的存在社区居民的认同较低，但他们同样认为歧视对病人和家属有消极影响。结论：精神分裂症病人遭遇到的歧视突出地表现在与个人基本社会生活密切有关的工作、婚姻和人际交往三个方面。社会歧视对病人及其家属的心理和社会生活产生了严重影响。     

益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路的影响

目的 基于NOD样受体蛋白3（NLRP3）/胱天蛋白酶-1（Caspase-1）/消皮素D（GSDMD）细胞焦亡通路,探讨益气养阴活血方防治糖尿病肾病（DKD）肾脏损伤的可能作用机制。方法 随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只、造模组42只。造模组高糖高脂饮食6周后予一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导建立DKD大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、缬沙坦组（8.33 mg·kg^-1）、益气养阴活血方低、高剂量组（11、22 g·kg^-1）。连续灌胃6周后检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）及24 h尿蛋白定量（24 h-UTP）;苏木素-伊红（HE）染色观察肾组织病理形态学变化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组大鼠肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白及其mRNA表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠FBG、CHO、TG、BUN、SCr、24 h-UTP及血清IL-1β、IL-18水平均显著升高（P<0.01）,肾组织病变程度严重,且肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白及其mRNA表达水平显著升高（P<0.01）;与模型组比较,各药物组FBG、CHO、TG、BUN、SCr、24 h-UTP及血清IL-1β、IL-18水平均明显下降（P<0.05,P<0.01）,肾组织病变程度得到改善,且肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白及其mRNA表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,以益气养阴活血方高剂量组效果最佳。结论 益气养阴活血方可通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制细胞焦亡,缓解DKD大鼠炎症反应,减轻肾脏病理损伤。     

ATP生物荧光检测在气管镜清洗消毒质量监测中的应用研究

目的探讨三磷酸腺苷(ATP)生物荧光检测对气管镜清洗消毒合格参考值范围和检测方法。方法选取360条患者使用后的气管镜随机分为A、B、C三组,每组120条。A组床旁预处理后分为A1、A2两组(每组60条气管镜),B组气管镜在人工清洗后分为B1、B2两组,C组气管镜在高水平消毒后分为C1、C2两组,A1、B1、C1组采用细菌采样,A2、B2、C2组进行ATP生物荧光采样。两种采样方法对气管镜表面采样为全部长度涂抹采样,管腔的采样方法均为冲刷法。同时选取临床使用后的60条气管镜经过人工清洗后,对管腔运用冲洗法,对冲洗液进行ATP生物荧光检测,比较冲洗法和冲刷法对管腔采样的有效性。结果气管镜在人工清洗后,对管腔采样的冲洗法和冲刷法,两组ATP总量的相对发光值(RLU)差异有统计学意义(P=0.040)。气管镜在A1、B1组的细菌采样中,管腔和表面菌落数差异均有统计学意义(P均<0.001),高水平消毒后表面和管腔菌落数均为0;气管镜在A2、B2、C2三组的ATP生物荧光检测采样中,表面ATP总量RLU值A2与B2组间比较差异有统计学意义(P<0.001),B2与C2组间比较差异有统计学意义(P=0.040);管腔ATP总量RLU值A2与B2组间比较差异有统计学意义(P<0.001),B2、C2两组差异无统计学意义(P=0.450)。结论 ATP生物荧光采样冲刷法对气管镜管腔采样更有效;人工清洗环节非常重要,人工清洗后气管镜表面和管腔ATP总量建议低于10 000和3 400。     

西部医院图书馆存在的主要问题与对策

本文就西部医院图书馆存在主要问题和对策加以探讨。 1 主要问题 1.1 观念陈旧、认识不足观念陈旧是影响发展的主要因素,西部是多民族地区,经济发展相对滞后。改革开放20多年来,西部地区的面貌也发生了很大的变化,人们的观念也不断地更新。但西部人传统的观念却仍根深蒂固,在医学情报信息工作中明显滞后于东南沿海各省市。西部各级医院对图书馆普遍重视不够,对图书情报信息工作在医院发展中的作用认识不足。21世纪是信息化时代,计算机技术、网络技术、通信技术、高密度存储技术已成为时代的特征。我们还没有充分认识到医学图书馆所面临的这一新特点。当今信息服务的时间、空间、类型、范围及提供信息服务的质量和价值等都发生了巨大变化,因此改变原有工作方式、管理方式和知识结构显得非常必要。发展面向网络化的医学情报事业,加快步伐向数字化图书馆进军,才能适应知识经济和西部大开发的需要。     

基于生物信息学探讨SARS-CoV-2介导免疫炎症反应诱发动脉粥样硬化进展的潜在机制与防治中药筛选

目的 应用生物信息学技术,从免疫炎症角度探索严重急性呼吸综合征冠状病毒-2(severe acute respiratory syndrome coronavirus-2,SARS-CoV-2)感染诱导动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）进展的核心靶点及重要通路,进而预测潜在防治中药。方法 从基因表达数据库（Gene Expression Omnibus,GEO）中获取新型冠状病毒肺炎患者和动脉粥样硬化患者芯片数据,利用“limmar”包及“Venn”包筛选2种疾病的共同差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs）,对共同DEGs进行基因本体论（gene ontology,GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）分析,注释其功能及重要通路。对2组基因集进行免疫细胞和免疫功能打分,评估免疫细胞浸润水平。利用STRING数据库,构建蛋白-蛋白互作（protein-protein interaction,PPI）网络;通过Cytoscape的CytoH...     

改良新产程模式管理硬膜外麻醉无痛分娩产程对母婴结局的影响

目的探讨应用改良新产程模式管理硬膜外麻醉无痛分娩产程对母婴结局的影响。方法选取2018年1月-2020年2月在长春市妇产医院自愿行硬膜外麻醉无痛分娩的单胎初产足月妊娠产妇220例为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组各110例。观察组产妇应用改良新产程模式管理无痛分娩,对照组产妇应用新产程模式管理产程无痛分娩。观察两种产程管理模式管理产程对母婴结局影响。结果观察组产妇潜伏期、加速期及第二产程时间均较对照组明显缩短,差异均有统计学意义(均P<0.01)。两组产妇剖宫产率和产后出血率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组产妇阴道助产率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组产妇产后出血量明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组新生儿脐动脉血pH值<7.2比例低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用改良新产程模式管理的硬膜外麻醉无痛分娩产妇产程时限明显缩短,阴道助产率降低,产后出血量明显减少,新生儿脐动脉血pH值<7.2比例明显降低,因此改良新产程模式管理产程,可有效保证母婴安全。