一种在单克隆抗体生产中挽救有用的杂交瘤的实用方法

某些已建立的杂交瘤细胞在长期反复培养过程中可能降低或丧失其分泌抗体的能力,这通常是由于其中非抗体分泌细胞或分泌无关抗体的杂交瘤细胞过度生长所致,也可能是分泌细胞本身遗传不稳定发生突变的结果。用标准有限稀释法(下简称有限稀释法)再克隆杂交瘤是恢复分泌所期望抗体细胞的一种方法,然而有时不能奏效。本文介绍一种简单的方法,称为“预克隆细胞分种法”,在标准化克隆技术不成功时可提高从污     

分泌小鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

采用活体内生长ＳＰ２／０骨髓细胞为融合伙伴,用ＳＰ２／０细胞与甲胎蛋白免疫的ＢＡＬＡ／Ｃ小鼠脾细胞进行融合,建立了２株稳定分泌抗ＡＦＰ单克隆抗体的小鼠杂交瘤株。冻存两年后复苏,仍稳定地分泌特异抗体。培养上清的抗体效价达１０＾－３,腹水效价达１０＾－６,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４识别抗原表位不同,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４均属于小鼠ＩｇＧ１亚类。     

国际疾病分类ICD-10在我院的应用

国际疾病分类是世界卫生组织主要合作项目之一。不仅是国际共同的疾病、损伤和死亡原因的国际统计分类法 ;应用范围已扩大 ,还应用在国内与国际交流、医疗、研究与教学 ;医院管理、医疗付款等方面。由于疾病谱的变化等诸多原因 ,原 ICD- 9标准已不能满足当前疾病分类的需要 ,世界卫生组织 (WHO)对现行的 ICD- 9国际疾病分类标准进行了修订 ,并颁布了 ICD- 10新标准。我国将于 2 0 0 2年 1月 1日正式推广使用这一新标准。　　我院是肿瘤专科医院 ,1998年开始由病案室进行病案的输入首页。 2 0 0 0年 10月开始应用我院网络信息中心开发的…     

板蓝根低极性流分的分离及其免疫活性

目的：进行板蓝根低极性流分及其亚流分的分离,并研究其免疫活性。方法：用快速低压干柱柱层析从板蓝根中分离出一个低极性流分及其一组亚流分;用化学发光法检测其对人多形核细胞化学发光的影响。结果：板蓝根低极性流分具有双向免疫活性,在低浓度时具有激活作用,在高浓度时具有抑制作用;而亚流分的免疫活性并未因其纯度的提高而相应提高。结论：板蓝根低极性流分及其亚流分含有抗炎成分。     

异丙酚联合米索前列醇用于无痛人工流产的临床观察

目的:观察异丙酚联合米索前列醇用于无痛人工流产的临床效果。方法:将异丙酚单独或联合米索前列醇用于无痛人工流产,并与一般人工流产手术对比。观察镇痛效果、手术时间、用药量、术中出血量及人工流产综合征发生率、不良反应等指标。结果:异丙酚联合米索前列醇用于无痛人工流产,镇痛率100%,手术时间缩短,宫颈充分软化率高,术中用药少,人工流产综合征发生率低,术中出血量少。结论:异丙酚联合米索前列醇用于无痛人工流产,具有简单易行、副反应少、效果好等优点。     

噬菌体肽库技术及在肿瘤研究中的应用

噬菌体展示肽库技术是一种用于筛选蛋白、多肽的强有力的生物技术,将外源蛋白与噬菌体外壳蛋白融合而表达于噬菌体颗粒表面,被展示的外源蛋白可以保持相对独立的空间结构和生物活性。目前,此技术已被广泛应用于生命科学研究的不同领域,尤其在肿瘤的诊断和治疗方面。     

肿瘤血管导向肽与人突变IL-2融合蛋白的克隆、表达及生物学活性分析

目的获得具有生物学活性的与肿瘤血管导向肽（NGR）融合表达的突变人IL-2蛋白.方法将突变人IL-2与NGR的融合基因重组到表达载体pET-22b（＋）并转化E.coli BL21（DE3）,测序正确后,IPTG诱导表达,并对产物进行纯化、复性和鉴定.结果目的蛋白以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的40%以上,Western blot分析显示纯化后的目的蛋白具有免疫结合活性,CTLL-2细胞增殖实验证明具有生物学活性.结论具有生物学活性的与肿瘤血管导向肽融合表达的重组人IL-2蛋白可成功地克隆并表达,为进一步的肿瘤导向治疗打下基础.     

黄芩类黄酮对人免疫细胞化学发光及淋巴细胞增殖的影响

目的：探讨黄芩类黄酮对人免疫细胞影响。方法：检测了从黄芩中纯化的３’,５,６,７－四羟基－２‘,８－二甲氧基黄酮,２’,５－二羟基－６,６’,７,８－四甲氧基黄酮,５,７,８－三羟基黄酮（２Ｒ,３Ｒ）－２‘,３,５,６’,７－五羟基黄烷醇,黄芩甙和黄芩酮６种类黄酮成分对人多形核细胞（ＰＭＮ）,单个核细胞（ＭＮＣ）化学发光反应和ＰＨＡ诱导淋巴细胞增殖的影响。     

噬菌体展示肽库在乳腺癌血清肿瘤标志物筛选中的应用

目的用噬菌体随机12肽库对乳腺癌患者的血清进行差异性筛选,以获得乳腺癌特异性的新的肿瘤标志物。方法对噬菌体随机12肽库进行三轮差异性筛选,用ELISA法测定噬菌体克隆对乳腺癌患者血清结合的特异性。结果经过三轮筛选,噬菌体富集率逐轮递增,经47例乳腺癌患者和正常人血清的ELISA法检测验证,获得一株与乳腺癌患者血清特异较好的噬菌体,经DNA测序和推导,其短肽序列为短肽(QVSAEHKVQGFW)。结论成功筛选到能与乳腺癌患者血清高亲和力特异结合的12肽序列,为今后研究乳腺癌肿瘤标志物奠定了基础。     

~(131)I抗AFP抗体-MMC双弹头导向治疗肝癌31例

目的观察化疗兼内照射的新型双弹头免疫导向治疗肝癌的疗效．方法以马抗人ＡＦＰ多克隆抗体（抗ＡＦＰＡｂ）和大鼠抗人ＡＦＰ单克隆抗体（抗ＡＦＰＭｃＡｂ）为载体，核素１３１Ｉ和丝裂霉素（ＭＭＣ）为双弹头，采用改良氯胺Ｔ法制备１３１Ｉ抗ＡＦＰＭｃＡｂＭＭＣ（双弹头１）和１３１Ｉ抗ＡＦＰＡｂＭＭＣ（双弹头２），静脉滴注，每月１次，治疗不能切除中晚肝癌３１例（治疗组）．治疗１，２，３次分别占４，１７和１０例，放射剂量（ＭＢｑ／例）均值依次为１９３５１±３７７４，６５１９±２３２４和９９２０±２３０５．结果治后肿瘤缩小率、血清ＡＦＰ下降率和１，２年生存率分别高于同期经动脉插管灌注（ＴＡＩ）或化疗栓塞（ＴＡＣＥ）的对照组（５００％，１５／３０比３００％，９／３０Ｐ＜００５；６６７％，１８／２７比２８０％，７／２５Ｐ＜００１和５００％比３３０％，３４０％比３３％Ｐ＜００１），治疗组病例的进展率（１００％）明显低于对照组（４００％，Ｐ＜００１）．结论双弹头疗效提高，由于抗体、核素１３１Ｉ和抗癌药的协同作用而增强了对癌细胞的杀伤力所致．