丙戊酸钠对雌雄APP/PS1双重转基因小鼠行为学及老年斑的影响

目的 探讨丙戊酸钠(VPA)对不同性别APP/PS1双重转基因阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的空间学习记忆能力及脑内老年斑(SP)的沉积的影响.方法 3月龄APP/PS1双重转基因AD模型小鼠20只,雌雄各半,随机分为VPA治疗组和生理盐水对照组(每组10只).VPA(30mg·kg-1·d-1)腹腔注射4周后进行Morris水迷宫实验,以检测各组小鼠的空间学习记忆能力;行为学实验结束后,取脑组织进行免疫组化染色以观察老年斑的沉积.结果 行为学实验结果显示:可视平台下,两组小鼠找到平台的时间、搜索的平均路程以及雌雄小鼠的游泳速度均差异无显著性(P＞0.05);隐蔽平台下,VPA治疗组小鼠找到平台的时间及搜索的平均路程较对照组明显缩短(P＜0.01),雄性AD模型鼠无论是治疗组还是对照组找到平台时间和路径均短于雌鼠(P＜0.05);免疫组化结果显示,VPA治疗组雄性小鼠大脑皮质及海马区域的老年斑数量[(11.23±3.78)个]较同性别对照组[(28.17±3.46)个]明显减少(t=14.67,P＜0.01),且比雌性VPA治疗组老年斑[(20.36±4.21)个]也有明显减少(P＜0.05).结论 VPA能显著改善雌性和雄性AD模型小鼠空间学习记忆障碍,减少脑内老年斑的沉积,该改变具有性别差异.

Abstract：

Objective To investigate whether valproic acid (VPA) affect spatial learning memory and senile plaques in the APP/PS1 double transgenic AD mouse model of different gender. Methods Twenty 3-month old APP/PS1 double transgenic AD mice,male and female mouse evenly,were randomly divided into VPA-treated and saline-treated groups ( 10 for each group). 30 mg· kg-1 · d-1 of VPA and the same amount of saline were peritoneally injected into mice for 4 weeks. Morris water maze was conducted to check the effect of VPA on the capability of spatial learning and memory of AD mouse model. Immunohistochemical staining was used to examine the effect of VPA on the morphological changes in the brains of mice. Results Visible platform test showed that VPA-treated and saline-treated mice had similar escape latency (P＞0.05) and path length (P＞0.05) ,the swimming speed between male and female mice had no difference (P＞0.05). Hidden platform test showed that VPA treated mice had a significantly shorter latency (P＜0.01) and path length (P＜0.01) to reach the platform compared with saline-treated mice. Meanwhile, both in VPA-treated and control groups, the male mice had a shorter correlation escape latency and path-length than female mice had(P＜0.05 ). Immuohistochemical staining showed that the number (11.23±3.78) of senile plaques (SP) in the cerebral cortex and hippocampus of VPA-treated male mice were notably decreased than that(28.17 ±3.46) in the control group ( t= 14.67, P＜0.01 ),furthermore,the number of SP in the cerebral cortex and hippocampus of VPA-treated male mice was significantly reduced,as compared with which (20.36 ±4.21)in the VPA-treated female mice(P＜0.05). Conclusion VPA can significantly lower formation of SP, and remarkably improve the capability of spatial learning and memory of APP/PS1 transgenic mice,which have gender difference.     

胰淀素在痴呆小鼠和正常小鼠脑内的分布和表达变化

目的 观察胰淀素在正常小鼠、阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠和肥胖模型小鼠脑内的分布和表达情况,分析其与小鼠脑内老年斑的关系,探讨胰淀素是否参与老年性痴呆的发病.方法 取5月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠(AD模型小鼠)、ob/ob肥胖模型小鼠及野生型小鼠(正常小鼠),采用免疫荧光染色方法检测胰淀素和老年斑在各组小鼠脑内的分布和表达.结果 免疫荧光双标检测结果显示:胰淀素免疫阳性神经元广泛分布于APP/PS1双转基因小鼠脑内,包括皮质、海马、丘脑等区域,强阳性表达于岛叶和梨形皮质区域(P＜0.01),而老年斑则选择性表达于新皮质、海马等区域,胰淀素的分布范围较老年斑的分布广泛,在部分老年斑的周围可见胰淀素免疫阳性物质分布.5月龄AD模型小鼠、ob/ob肥胖模型小鼠新皮质内胰淀素阳性神经元数目明显高于正常小鼠(P＜0.05,P ＜0.01).结论 胰淀素在AD模型小鼠、ob/ob肥胖模型小鼠及正常小鼠脑内的分布和表达存在差异,这种差异有可能促进老年斑的形成以及参与AD疾病的发生.     

丙戊酸钠对APP/PS1双转基因小鼠脑内星形胶质细胞和神经营养因子的影响

目的：观察丙戊酸钠（valproic acid sodium salt,VPA）对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）模型小鼠脑内星形胶质细胞、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）和胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line-derived neu－rotrophic factor,GDNF）的影响。方法：取3月龄的APP/PS1双转基因小鼠AD模型小鼠24只,按随机数字表法平均分为治疗组和对照组。VPA治疗组小鼠腹腔注射VPA 30 mg/（kg·d）,对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水,采用免疫组化学法观察2组小鼠皮质和海马区星形胶质细胞数量的变化,Western blot检测2组小鼠皮质和海马BDNF 和GDNF的表达水平。结果：与对照组比较,VPA治疗组小鼠皮质和海马区星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的阳性细胞数量均明显减少（t=5.476、8.793,P均＝0.00０）,BDNF 和GDNF 表达水平均明显升高（t=4.303,P=0.001;t=2.376,P=0.032）。结论：VPA可抑制星形胶质细胞增生,提高神经营养因子的表达水平。     

慢性脑缺血模型小鼠视网膜内血管内皮生长因子和胶质纤维酸性蛋白的表达变化

目的：探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic pro－tein,GFAP）在慢性脑缺血模型小鼠视网膜内的表达规律及两者的关系。方法：采用C57小鼠建立慢性脑缺血模型,结合免疫组化方法,观察缺血不同时间段小鼠视网膜中 VEGF、GFAP在时间和空间上的表达变化。结果：在假手术组中 VEGF、GFAP呈弱表达或不表达;在手术组中,缺血120 d时 VEGF、GFAP表达增加（P=0.002,P=0.006）,随缺血时间的延长,缺血180 d时 VEGF、GFAP表达强度及空间分布范围呈进行性增加（P=0.050,P=0.000）。结论：VEGF、GFAP在慢性脑缺血模型小鼠视网膜中表达进行性上调,提示两者参与了视网膜缺血损伤的病理改变过程,并在视网膜缺血损伤机制中起着重要作用。     

脊髓内去甲肾上腺素能纤维的来源

目的：研究脊髓内去甲肾上腺素(NA)能纤维的来源。方法：选用Wistar大鼠，应用神经递质NA特异性的标志酶——多巴胺β羟化酶(DBH)抗体注入其脊髓单侧，分别于注射后1h-7天灌注大鼠，取出脊髓和脑组织作免疫组化染色。结果：ADBH注入脊髓后48h内依次在腰、胸、颈髓同侧观察到大量DBH阳性纤维，对侧仅少量阳性纤维出现：注射后3—4天，双侧上橄榄核、LC、SC、KF核、臂旁核中出现大量阳性神经元，在延髓内仅见大量阳性纤维，未观察到阳性神经元胞体出现；注射后7天，上述阳性神经元和阳性纤维消失。结论：脊髓内的NA能纤维及终末几乎全部来源于脑桥NA能细胞群。     

卵巢切除对APP/PS1双转基因小鼠脑内老年斑及自噬的影响

目的研究雌激素对APP/PS1双转基因小鼠脑内老年斑及自噬的影响,探讨雌激素缺乏导致阿尔茨海默病(AD)的病理机制。方法将3月龄雌性APP/PS1双转基因AD模型小鼠分为卵巢切除组与假手术组,术后2个月采用免疫组化染色及透射电镜观察两组小鼠脑内老年斑及自噬功能的变化,同时检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达情况。结果免疫组化结果显示,与假手术组相比,卵巢切除组小鼠脑内老年斑显著增加,分布更广,自噬相关蛋白LC3、Beclin-1阳性神经元数量均显著下降。电镜观察可见,与假手术组相比,卵巢切除组小鼠海马神经元及突起肿胀明显,暗神经元增加,神经元突起周围自噬小泡显著增多。结论雌激素缺乏可导致自噬泡成熟受阻、活性降低、自噬功能减弱,从而导致AD病理改变加重。     

“以器官系统为中心，基础与临床全线整合”教学模式解剖学知识点整合的实践与思考

正回顾高等医学教育课程模式,20世纪50年代"以器官系统为中心"的课程模式问世;90年代,美国医学院校协会在全国推行"医学院校培养目标研究项目",许多院校实行了以器官系统为中心的课程、以问题为导向的课程、以社区为基础的课程等整合课程,成为第2次医学教育改革,对     

胆囊动脉变异2例

笔者在解剖2具经10%福尔马林固定的男性尸体腹腔动脉及分支时,发现胆囊动脉变异,男一胆囊动脉起自肝固有动脉后分3支入胆囊;男二胆囊动脉起自迷走肝右动脉。为积累国人解剖学数值资料和为临床提供参考,现报道如下:常规方法解剖暴露腹腔内的肝胆结构、腹腔动脉及分支的起点、走行、分支及分布情况。用游标卡尺(精度0.02 mm)测量各分支的基本数据,记录并拍照。两男尸腹主动脉均在