“以器官系统为中心”神经系统整合课程教学改革实践

重庆医科大学自2010年起,从神经系统自身特点出发,打破传统以学科为中心的课程模式,通过对神经系统涉及的基础学科和临床学科进行全线整合,建立神经系统整合课程体系,并在该校五年制卓越医师班进行试点。新课程模式引导学生将知识点连接成面,加强知识的纵向和横向联系,精简重复内容,帮助学生形成整体连贯的创新性思维。课程整合是医学教育改革的必然趋势。     

梓醇对APP/PS1双转基因小鼠焦虑行为和脑内神经元的影响

目的：观察梓醇对APP/PS1双转基因小鼠焦虑行为和脑内神经元的影响。方法：将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠按随机数字表法分为梓醇治疗组和生理盐水对照组,每组10只,用梓醇[（5 mg/（kg·d）]和等量生理盐水腹腔注射阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）模型小鼠3周,应用高架十字迷宫检测两组小鼠的焦虑情绪的变化;应用免疫组织化学染色和Western blot检测脑内神经元及突触相关蛋白的表达变化。结果：与生理盐水对照组比较,梓醇治疗组小鼠进入开放臂的次数（P=0.000 2,t=4.742）和时间（P=0.001,t=3.936）显著增加,神经元数量（P=0.028 4,t=2.872）及突触蛋白表达（P=0.002,t=5.265）明显增多。结论：梓醇治疗能显著缓解AD模型小鼠的焦虑情绪,这种改善作用可能是通过改善神经元及突触的丢失来实现的。     

二氢杨梅素对APP/PS1转基因小鼠学习记忆和脑内自噬的影响

目的:研究二氢杨梅素(DHM)能否通过影响自噬对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠发挥保护作用。方法:实验动物分为3组:7月龄的APP/PS1转基因痴呆模型小鼠随机分为AD组和DHM组,同月龄野生型(WT) C57BL/6J小鼠作为WT组,每组10只。DHM处理DHM组,同浓度DMSO稀释液处理AD组和WT组。采用Morris水迷宫实验检测各组学习记忆功能;免疫组织化学(IHC)、甲硫素S(ThS)染色以及ELISA法检测β-淀粉样蛋白(Aβ)的水平; Western Blot法检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62、Cathepsin D和LAMP1的表达水平;透射电镜检测脑内自噬结构微观变化。结果:与WT组相比,AD组小鼠在水迷宫检测中平均潜伏期、探索路径增长(P <0.01),穿越平台次数减少(P <0.01);脑内Aβ斑块增加(P <0.01),出现较严重的水肿,并发现了深染的晚期自噬体; LC3-Ⅱ/Ⅰ比值降低(P <0.01),p62、LAMP1和Cathepsin D表达增加(P <0.01); DHM处理后可以改善AD小鼠的学习记忆功能(...     

脊髓进行性压迫损伤过程中脊髓神经细胞内Ca2+和Ire1的变化

目的 观察脊髓进行性压迫损伤(SCII)过程中神经细胞内钙离子(Ca2+)浓度、内质网跨膜激酶(Ire1)表达变化规律,探讨其在内质网应激过程中的意义.方法 制作大鼠脊髓压迫模型,运用生物化学、免疫组化、Western blot、RT-PCR和图像分析等方法,观察SCII后脊髓神经细胞内Ca2+浓度、Ire1表达变化规律.结果 SCII后神经细胞内Ca2+浓度于术后1、3、7、14、21、28d呈升高趋势,手术组与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05).术后1d Ire1 mRNA和Ire1即有较高水平表达,术后3、7、14d迅速增高,术后21、28d逐渐下降,手术组与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 SCII导致细胞内Ca2+浓度升高而引起内质网应激.Ire1表达标志着内质网上未折叠蛋白积聚以及相关蛋白表达增加.表明Ca2+和Ire1都参与了内质网应激所致细胞凋亡信号转导的调节.     

蛋白酶体抑制剂处理神经细胞系后Nicastrin的表达变化及其与Aβ的关系

目的 探讨蛋白酶体抑制剂处理后神经细胞内Nicastrin(NCT)的表达变化,及其与γ-分泌酶活性和Aβ生成的关系.方法 运用亚细胞器分级分离技术、免疫共沉淀、Western blot和ELISA等检测神经细胞内NCT的表达及Aβ水平.结果 正常情况下NCT主要分布于内质网和高尔基复合体,极少量分布于溶酶体,蛋白酶体抑制剂Lactacystin处理后NCT水平升高(P<0.001),且细胞内增多的NCT也主要聚集在内质网和高尔基复合体;NCT与泛素在细胞内共存;NCT的蛋白降解不受PS的影响;NCT降解受阻可引起细胞内γ-分泌酶的底物C99、C83显著减少,而γ-分泌酶的产物Aβ40、Aβ42的生成显著增多(P<0.01).结论 NCT的降解可通过泛素-蛋白酶体途径实现,蛋白酶体抑制剂处理后神经细胞内NCT水平升高,且增多的NCT可促进APP的代谢及Aβ的生成.     

丙戊酸钠对APP/PS1转基因小鼠自主活动及脑形态结构的影响

目的研究丙戊酸钠(valproic acid,VPA)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠自主活动及脑组织形态结构的影响,探讨VPA对AD的保护作用及可能机制。方法将3月龄APP/PS1双转基因小鼠及同窝野生型小鼠分为VPA处理组和生理盐水对照组,运用VPA[30 mg/(kg.d)]和等量生理盐水腹腔注射4周。旷场实验观察各组小鼠的自主活动能力;尼氏染色、透射电镜观察各组小鼠脑组织的病理改变。结果行为学结果显示:与野生型小鼠相比,AD模型小鼠自主活动明显减少(P<0.05);野生型小鼠VPA处理组与对照组自主活动无明显差异(P>0.05);而AD模型小鼠VPA处理组比对照组的自主活动明显减少(P<0.05)。尼氏染色显示:AD模型小鼠脑内神经元密度显著低于野生型小鼠。AD模型小鼠中,对照组脑内神经细胞明显肿胀,尼氏小体明显减少而致细胞质淡染,神经细胞密度降低(85.2±13.3);而VPA处理组脑内神经元肿胀程度明显减轻,神经元数量显著回升(116.9±16.2,P<0.05),但VPA不影响野生型小鼠脑内的神经元数量及形态(VPA处理组:142.2±24.4 vs生理盐水对照组:136.7±23.1,P>0.05)。电镜结果显示AD模型小鼠对照组脑内神经元细胞核、线粒体及神经毡肿胀明显,突触结构稀松;而AD模型小鼠VPA处理组脑内神经元细胞核、线粒体及神经毡的水肿明显减轻,突触结构清晰。结论 VPA可显著减少APP/PS1双转基因AD模型小鼠的自主行为,显著减轻躁狂症状;VPA可改善APP/PS1双转基因小鼠脑内神经细胞的形态结构,减少肿胀的神经元并抑制神经元数量的减少。     

甘草素通过抗炎发挥对阿尔茨海默病的保护作用

目的研究植物雌激素甘草素(liquiritigenin,LG)是否通过抗炎对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发挥保护作用。方法 LG是从中药甘草中提取的一种黄酮类化合物单体,具有多靶向作用,如抗炎、抗氧化等。本实验用N2A细胞(神经瘤母细胞)作为正常对照细胞和稳定表达瑞士突变型淀粉样蛋白前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)的N2A细胞(N2AAPP)作为AD细胞模型,结合LG处理,通过MTT、ELISA、Western blot、RT-PCR检测LG对AD模型细胞的细胞活性、雌激素受体(ERβ)、炎症相关蛋白NLRP3和caspase-1以及炎症因子IL-1β、TNF-α的影响。结果与正常的N2A细胞相比,N2A-APP细胞中APP、BACE1蛋白表达以及Aβ水平显著增加,说明N2A-APP作为AD模型细胞的有效性。MTT结果显示LG不影响N2A的细胞活力(P0.05)。Westers blot结果显示,与正常N2A细胞相比,N2A-APP细胞内ERβ的表达显著下调,而LG处理可显著逆转ERβ的表达。Westers blot结果还发现,与正常细胞相比,N2A-APP细胞内炎症相关蛋白NLRP3和p-caspase-1蛋白表达显著增强,而LG处理可有效逆转NLRP3和p-caspase-1的表达上调(P0.01)。相应地,RT-PCR结果发现,LG可显著降低N2A-APP细胞内炎症因子IL-1β、TNF-α的水平。结论甘草素可有效抑制AD模型细胞的炎症反应,其机制可能与其上调ERβ蛋白的表达有关。     

转录因子AP-2α对脑外伤后蓝斑神经元TH表达的影响

目的 探讨转录因子激动蛋白-2α(activator protein 2α, AP-2α)对脑外伤后蓝斑去甲肾上腺素能神经元中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)表达的影响.方法 将90只Wistar大鼠分为对照组和脑外伤组,脑外伤组又分为外伤后1、3、6、24、72 h共5个组(n=15).用Feeney氏法制作机械性脑外伤大鼠模型,分别于脑外伤后各相应时间点取出脑干,对蓝斑(locus ceruleus, LC)所在部位作冷冻切片,用免疫荧光双标检测TH和AP-2的表达,观察二者在外伤后各相应时间点LC神经元中的表达变化.结果 在脑外伤后各时段,LC神经元的TH和AP-2α 阳性细胞数量和荧光强度值均比对照组明显增加(P《0.05),3 h达到高峰,随后逐渐降低,但72 h仍然高于对照组;而且TH和AP-2α的表达变化趋势基本一致,在同一神经元可以共表达.结论 机械性脑外伤使LC去甲肾上腺素能神经元中TH表达增加,使去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)合成增多,NE在外伤应激过程中起着重要作用;AP-2α参与了TH的表达调控,AP-2α上调可能是导致了TH表达增加的重要原因.     

生命视角下人体解剖学课程思政教学与实践体系的构建及拓展

<正>习近平总书记在全国高校思想政治工作会议上指出,“要坚持把立德树人作为中心环节,把思想政治工作贯穿教育教学全过程,实现全程育人、全方位育人,努力开创我国高等教育事业发展新局面”^[1]。在这一宏大的历史背景下,医学专业教师落实“课程思政”对大学生“价值引领”的举措很多,在教学内容、教学方法、教学评价等角度都有涉猎[2-4]),形式多样而效果欠佳,原因在于未能找准育人角度。     

外科系列专业学位研究生应用解剖学教学的思考

分析外科系列专业学位研究生应用解剖学基础薄弱的原因,提出搭建外科系列专业学位研究生应用解剖学实验和研究平台,建立双导师培养模式,将应用解剖学的教学贯通于基础课程学习、临床能力训练、科研能力培养三个阶段,切实提高外科系列专业学位研究生的培养质量。