慢性脑缺血对APP/PS1双转基因小鼠行为学及脑组织形态学的影响

目的:探讨慢性脑缺血对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠的行为学以及脑组织形态学的影响。方法:将20只3月龄APP/PS1 AD模型小鼠随机分成2组,每组10只,对其中一组采用改良的双侧颈总动脉狭窄术,另一组双侧颈总动脉未结扎小鼠为假手术对照组。术后1个月分别采用Morris水迷宫、组织学和免疫组化染色,检测模型组和假手术组小鼠行为学的改变、海马区神经细胞形态学的改变、海马区神经细胞内Neu N和APP及Aβ的表达变化。结果:行为学实验结果:(1)可视平台下,2组小鼠找到平台的时间(t=1.31,P=0.19)及搜索的平均路程(t=0.04,P=0.97)无显著差异;(2)隐蔽平台下,脑缺血模型组小鼠(26.39±1.37)找到平台的时间较假手术对照组(20.19±1.19)明显延长(t=3.44,P=0.00);(3)空间探索实验中,经过平台的次数,脑缺血模型组小鼠(3.11±0.37)较对照组(4.25±0.34)明显减少(t=2.24,P=0.03)。HE染色:脑缺血模型组小鼠海马内神经细胞明显肿胀、细胞排列紊乱。免疫组化结果:脑缺血模型组小鼠海马内Neu N阳性神经元数量(93.40±10.44)较对照组(156.20±24.16)显著减少(t=2.39,P=0.04);而APP-阳性神经元(t=2.35,P=0.047)、Aβ40-阳性神经元(t=2.54,P=0.04)以及Aβ42-阳性神经元(t=2.476,P=0.04)较假手术组明显增加。结论:本实验新建立的改良双侧颈总动脉狭窄术能导致小鼠慢性脑缺血;慢性脑缺血可加速APP/PS1双转基因AD模型小鼠的病理进程。     

重庆医科大学遗体捐献工作40周年的总结和思考*

正遗体是医学教学、科研与临床诊疗的宝贵资源,遗体捐献对医学教育及科研起着不可替代的重要作用,是培养合格医护工作者的重要基础保障,也是医疗科学事业的重要基石。遗体捐献是指自然人生前自愿表示在死亡后,由其执行人将遗体的全部或者部分捐献给医学科学事业的行为,以及生前未表示是否捐献意愿的自然人死亡后,由其直系亲属将遗体的全部或部分捐献给医学科学事业的行为。由于人们对遗体入土为安传统思想观念根深蒂固,我国自20世     

大鼠脑外伤后蓝斑去甲肾上腺素能神经元变化的研究

目的 观察脑外伤应激对大鼠蓝斑内去甲肾上腺素能（NA）神经元的表达变化的影响。方法 健康Wistar大鼠70只，随机分为正常组和脑外伤模型组，用改进的Feeney’s法制作大鼠脑挫裂伤模型。分别于伤后3、6、12、24、48、72h取出其脑干，切片后做多巴胺β羟化酶（DBH，合成NA的一种标志性酶）免疫组化。结果 脑挫裂伤后，大鼠出现右侧前后脚偏瘫，BBB评分降低；免疫组化显示，脑外伤后各时段大鼠蓝斑内出现大量深染的DBH阳性神经元，其数量和染色较正常组均显著增加（P〈0．01）。结论 大鼠脑外伤后蓝斑NA能神经元被激活，DBH表达增加，使NA合成增多，以适应机体内外环境的变化，提示蓝斑产生的NA在脑外伤应激过程中扮演了十分重要的角色。     

蛋白酶体抑制剂对神经细胞前咽缺陷蛋白-1表达的影响

目的 探讨神经细胞内前咽缺陷蛋白-1(Aph-1)的蛋白降解是经蛋白酶体途径还是经溶酶体途径介导.方法 在人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)建立稳定表达Aph-1细胞株的基础上,应用蛋白酶体和溶酶体酶抑制剂分别处理Aph-1细胞株,并结合Western blotting、放射性同位素脉冲示踪技术(Pulse-chase)、免疫荧光双标等技术,检测细胞内Aph-1的蛋白表达变化.结果 Western blotting结果显示,特异性蛋白酶体抑制剂能显著提高神经细胞内源性和外源性Aph-1的蛋白表达水平,且高度特异的蛋白酶体抑制剂乳胞素(Lactacystin)对Aph-1表达的增强效应呈剂量依赖性和时间依赖性;而非蛋白酶体蛋白酶抑制剂ALLM和溶酶体酶抑制剂对Aph-1的蛋白表达无影响;Pulsechase结果显示,蛋白酶体抑制剂可增强细胞内新合成Aph-1的表达水平,其增强作用是通过阻止35S-Aph-1的蛋白降解实现;免疫荧光双标结果显示,Aph-1与泛素在细胞内共存.结论 神经细胞内Aph-1的蛋白降解由蛋白酶体途径介导,与溶酶体途径无关;Aph-1在降解之前经泛素化修饰.

Abstract：

Objectives To investigate whether degradation of anterior pharynx decfective-1(Aph-1) goes through proteasomal pathway or lysosomal pathway.Methods Various methods such as cell culture,Western blotting,pulse-chase metabolic labeling technique,double immunofluoresecnt staining,combined with proteasomal and lysosomal inhibition were used to check Aph-1 expression level in stable Aph-1-transfected or non-transfected neuronal(SH-SY5Y)cell line.Results Using Western blotting,treating the neuronal cells with proteasome specific inhibitors significantly increased the expression of both endogenous and exogenous Aph-1.The effect of the proteasome inhibitors on Aph-1 expression was dose-and time-dependent Lysosomal pathway was not involved in Aph-1 degradation. Pulse-chase metabolic labeling experiment showed that the turnover of newly-synthesized radiolabeled Aph-1 protein was blocked by Lactacystin.Double immunofluorescent staining revealed colocalization of Aph-1 and ubiquitin in the same cells.Conclusion Degradation of Aph-1 protein is mediated by proteasomal pathway in neuronal cells,and is not related to lysosomal pathway.Aph-1 protein is ubiquitinated before degradation.     

急性损伤后脊髓内神经元可塑性的研究

神经系统具有可塑性 ,即在一定的生理及病理条件下神经元的形态或化学性质会发生转变。对神经系统可塑性的研究将为阐明神经系统对内外环境变化的适应性反应、功能代偿、损伤修复具有十分重要的意义。目前对神经元形态结构的可塑性研究较多 ,而对其化学性质的可塑性研究较少。本课题在制作脊髓 (SC)损伤动物模型的基础上 ,用去甲肾上腺素 (NA)特异性的标志酶——多巴胺β羟化酶 (DBH)作免疫组化 ,结合体视学观察来研究损伤脊髓内 NA能神经元化学性质的可塑性。实验结果 :正常脊髓的前角、后角及侧角内广泛存在去甲肾上腺素 (NA)能神经…     

医学留学生解剖学教学模式的改革与实践

解剖学是基础医学主干课程之一,医学中有2／3的医学术语来自解剖学,是学习其他基础学科和临床学科的基础[1]。我室承担留学生系统解剖学与局部解剖学的全英文教学10年,初步创建了留学生全英文教学模式和教育质量保障体系。本文就留学生解剖学教学方面的经验及体会报告如下。     

应用解剖学联合外科以专题为导向训练教学模式在专业学位研究生培养过程中的实践

正自教育部1998年启动专业学位研究生的培养工作以来,我国临床医学专业学位研究生的培养规模不断扩大,而如何提高其培养质量成为了亟待解决的问题~([1-3])。对于外科学研究生而言,应用解剖学基础是其临床实践能力提高的基石、临床科研能力和技术创新的源泉,更是决定其临床工作发展后劲的重要因素之一~([4])。那么,在研究生培养模式转变的新形势下,应用解剖学的教学模式应该如何应对是值得思考的问题。     

二氢杨梅素对APP/PS1转基因小鼠学习记忆和脑内自噬的影响

目的:研究二氢杨梅素(DHM)能否通过影响自噬对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠发挥保护作用。方法:实验动物分为3组:7月龄的APP/PS1转基因痴呆模型小鼠随机分为AD组和DHM组,同月龄野生型(WT) C57BL/6J小鼠作为WT组,每组10只。DHM处理DHM组,同浓度DMSO稀释液处理AD组和WT组。采用Morris水迷宫实验检测各组学习记忆功能;免疫组织化学(IHC)、甲硫素S(ThS)染色以及ELISA法检测β-淀粉样蛋白(Aβ)的水平; Western Blot法检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62、Cathepsin D和LAMP1的表达水平;透射电镜检测脑内自噬结构微观变化。结果:与WT组相比,AD组小鼠在水迷宫检测中平均潜伏期、探索路径增长(P <0.01),穿越平台次数减少(P <0.01);脑内Aβ斑块增加(P <0.01),出现较严重的水肿,并发现了深染的晚期自噬体; LC3-Ⅱ/Ⅰ比值降低(P <0.01),p62、LAMP1和Cathepsin D表达增加(P <0.01); DHM处理后可以改善AD小鼠的学习记忆功能(...     

留学生局部解剖学教学方法探索

良好的教学方法，对提高留学生局部解剖学的教学具有重要意义。对教学过程中，就如何采用多种教学方法。来提高留学生学习的兴趣，培养留学生观察、分析思考能力、动手能力和严谨的科学态度，进行了探讨。