sPD-1封闭PD-L促进抗瘤免疫的机制研究

为了研究自行构建的可溶性PD-1（sPD-1）真核表达质粒pPD-1A的抑瘤机制。采用转染了pPD-1A的BHK细胞分泌产物封闭树突状细胞上的PD-1配体（PD-L），并用MTT法检测树突状细胞（DC）对小鼠脾细胞的增殖激活作用。BALB／c小鼠接种H22肝癌细胞后次日开始接受质粒pPD-1A的注射。用RT—PCR法分析小鼠脾细胞的细胞因子和共刺激分子的mRNA表达水平，用流式细胞术测定肿瘤内T淋巴细胞的数量。结果显示：在淋巴细胞活化的早期sPD11对IL-10-DC激活淋巴细胞的作用有一定的促进，但作用并不十分显著（P〉0．05）。注射了质粒pPD-1A的小鼠产生了较强的抗瘤免疫反应，H22肝癌细胞的生长明显受到抑制（P〈0．01）。     

可溶性PD-1协同HSP70-肽复合物抑制荷瘤小鼠肝癌的研究

目的 :研究基因转染和表达的可溶性PD 1(solubleprogrammeddeath 1,sPD 1)对HSP70 肽疫苗抗肿瘤效果的影响及协同机制。方法 :以HSP70 肽疫苗免疫BALB/c小鼠后 ,用半定量RT PCR技术检测和分析HSP70 肽疫苗对小鼠脾细胞上PD 1及其配体基因表达的影响。体内转染表达sPD 1,用MTT比色法检测HSP70 肽疫苗免疫小鼠对肿瘤生长的抑制作用以及脾淋巴细胞的细胞毒活性。结果 :单独的sPD 1就有抗肿瘤效应。HSP70 肽疫苗不仅能预先在动物体内诱导肿瘤特异性的CTL ,而且可使脾细胞上抑制性共刺激受体PD 1及其配体的表达显著升高。用sPD 1与HSP70 肽疫苗联合治疗荷瘤小鼠 ,能提高脾CTL的杀伤效率并延长HSP70 肽疫苗的免疫效果。结论 :sPD 1可通过阻断PD 1与其配体的结合作用 ,及减弱PD 1的负反馈抑制作用 ,而增强HSP70 肽疫苗的抗肿瘤效应     

Are Cancer Stem Cells the Sole Source of Tumor？

Tumors are believed to consist of a heterogeneous population of tumor ceils originating from rare cancer stem cells （CSCs）. However, emerging evidence suggests that tumor may also origi- nate from non-CSCs. To support this viewpoint, we are here to present definitive evidence indicating that the number of tumorigenic tumor cells is greater than that of CSCs in tumor, and tumor can also derive from non-CSCs. To achieve this, an idealized mathematical model was employed in the pre- sent study and theoretical calculation revealed that non-CSCs could initiate the occurrence of tumor if their proliferation potential was adequate. Further, experimental studies demonstrated that 17.7%, 38.6% and 5.2% of tumor cells in murine B16 solid melanoma, H22 hepatoma and Lewis lung carci2 noma, respectively, were potentially tumorigenic. Thus, based on the aforementioned findings, we propose that the scarce CSCs, if exist, are not the sole source of a tumor.     

sPD-1封闭PD-L促进抗瘤免疫的机制研究

目的研究本室构建的可溶性PD-1（sPD-1）真核表达质粒pPD-1A的抑瘤机理.方法用转染了pPD-1A的BHK细胞分泌产物去封闭树突状细胞上的PD-1配体（PD-L）,并用MTT法检测树突状细胞（DC）对小鼠脾细胞的增殖激活作用.BALB/c小鼠接种H22肝癌细胞后次日开始接受质粒pPD-1A的注射.用RT-PCR法分析小鼠脾细胞的细胞因子和共刺激分子的mRNA表达水平,用流式细胞术测定肿瘤内T淋巴细胞的数量.结果在淋巴细胞活化的早期sPD-1对IL-10-DC激活淋巴细胞的作用有一定的促进,但作用并不十分显著（P＞0.05）.注射了质粒pPD-1A的小鼠产生了较强的抗瘤免疫反应,H22肝癌细胞的生长明显受到抑制（P＜0.01）.脾脏淋巴细胞的4-1BB、B7.1、IFN-γ和TNF-α表达均上调,以IFN-γ的增加最明显;OX40、IL-10表达下调.肿瘤内TIL数量明显增多（75.86%）.结论sPD-1通过对PD-L的封闭,不仅增加了肿瘤内部CD3＋T细胞的数量,而且可以调节细胞因子和共刺激分子的表达,从而促进抗瘤免疫.