SARS冠状病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的:SARS 冠状病毒(SARS-CoV)核衣壳蛋白 N(nucleocapsid protein)单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)的制备及鉴定。方法:用基因重组的 SARS-CoV N 蛋白免疫 BALB/c 小鼠制备 McAb,并采用间接 ELISA、免疫印迹法进行筛选和鉴定。结果:筛选出2株抗 SARS-CoV N 蛋白 McAb 杂交瘤细胞株,间接 ELISA 证实这组单克隆抗体仅与 SARS-CoV 产生特异性反应,而与其他病原体无交叉反应,IgG 亚类鉴定1株为 IgG1,另1株为 IgG2b。2株抗体亲和常数分别为4.14×10~(-9)和3.19×10~(-9)。结论:获得特异性针对 SARS-CoV 的单克隆抗体,为 SARS-CoV 早期诊断试剂的研制奠定了基础。     

鼠肺支原体单克隆抗体的研究

通过杂交瘤技术建立了３株抗鼠肺支原体单克隆抗体细胞株，它们分别是ＢＡ１１，ＢＤ７和Ｂ６１２．试验表明：３株细胞所分泌的抗体均属ＩｇＧ１亚类，都是鼠肺支原体的特异性抗体，与多种其它支原体无交叉反应。     

中国科学技术协会第六次全国代表大会在北京召开

中国科学技术协会第六次全国代表大会于2001年6月21日至25日在北京隆重召开。代表着全国各地区、各行各业科技工作者的947名代表和128名特邀代表出席了本次大会。他们当中有为我国科技事业无私奉献、奋斗不息,作出了卓越贡献的老一辈科学家,有顽强拼搏,锐意创新,在经济建设、社会进步和科技发展中取得优异成绩的中青年科技工作者。有取得重大科技成果享有广泛声誉的科学泰斗,也有在科技、科普第一线辛勤耕耘的科技工作者和科协、学会工作者。     

加味参芪地黄汤对系膜增殖性肾炎家兔影响的研究

目的 :观察加味参芪地黄汤对系膜增殖性肾小球肾炎兔模型的保护作用并初步探讨了其作用机制。方法 :采用灌胃法给予实验兔加味参芪地黄汤 ,分别观察实验期间模型兔 2 4h尿蛋白定量、肾功能 (BUN、Scr)、血清T细胞数、B细胞数、淋转率、红细胞免疫功能 (C3b -RR、IC -RR)以及肾组织形态学改变。结果 :与模型组相比 ,加味参芪地黄汤具有明显的降尿蛋白、增加T细胞数及淋转率、增强红细胞免疫功能的作用 ,其肾脏病理损害较轻 ,而模型组病理损害较重。结论 :加味参芪地黄汤能够从多方面改善MesPGN兔的肾脏病变     

弓形虫McAb的制备和鉴定

弓形虫是一种人兽共患病的病原寄生虫,是一级实验动物必须检测的项目之一。目前最常用的检查方法是检测血清抗体。抗原检查应该是最直接、直观的手段,但是直接涂片、饱和盐水漂浮和动物接种等方法或检出率低或步骤繁琐。制备制异性的ＭｃＡｂ,用于弓形虫抗原检测是这个研究的出发点。我们通过小鼠腹腔繁殖弓形虫速殖子,利用Ｇ２砂蕊漏斗过滤,提纯速殖子,反复冻融及超声波粉碎,制备可溶性抗原。常规方法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,免疫剂量为１００μｇ／只,取免疫后小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合,间接ＥＬＩＳＡ法筛选,有限稀…     

鸡胚致死孤儿病毒和鸡减蛋综合症病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用

目的 建立鸡胚致死孤儿病毒(CELO)和鸡减蛋综合症病毒(EDS)的多重PCR检测方法并进行初步应用.方法 参照GenBank提供的基因序列,设计了2对特异性引物分别扩增CELO长纤突蛋白和EDS六邻体蛋白的基因序列,建立检测CELO和EDS的多重PCR方法,考察该方法的特异性和敏感性,并使用该方法检测流感疫苗主种子批病毒是否存在外源性禽腺病毒的污染.结果 该多重PCR方法成功扩增得到了两条特异性目的条带,并经测序验证.该方法特异性好,灵敏度显示核酸最低检测量可达10^-4μg/mL.使用该方法检测12批次流感疫苗主种子批病毒,外源性禽腺病毒的检测结果均为阴性.结论 成功建立鸡胚致死孤儿病毒和鸡减蛋综合症病毒的多重PCR检测方法,灵敏度高,特异性好.在流感疫苗主种子批病毒的外源性禽腺病毒的检测中具有很高的使用价值和应用前景.     

“一患一医一护”管理模式对维持性血液透析患者生命质量的影响

目的探索应用“一患一医一护”管理模式对维持性血液透析患者（MHD）生命质量的影响。方法随机抽取开展“一患一医一护”管理模式以前在本院正规血液透析1年以上的MHD患者的临床资料，共30例，为A组；随机抽取在本院进行正规血液透析1月以上的患者30例，以接受“一患一医一护”管理模式的管理，随访并指导1年，为B组。比较两组患者营养状态、贫血改善率、心血管事件发生率、感染发生率、透析间期干体重达标率、高血压控制率、相关生化指标等。结果A组的营养不良发生率、心血管事件发生率、感染发生率、高钾血症、高磷血症、低钙血症的发生率均明显高于B组；而透析间期干体重保持率、贫血及高血压控制率明显低于B组；内瘘重建率两组的差异无显著性。结论“一患一医一护”管理模式可以显著改善维持性血液透析患者的预后。     

小鼠不同基因型与乙肝疫苗免疫应答的关系研究

目的 研究实验小鼠基因型与乙肝疫苗免疫应答的关系.以保证根据小鼠基因型选择适于进行免疫应答检测的实验小鼠,保证进行疫苗免疫应答检测时的规范化和标准化.方法 应用小鼠NIH1、2、3个种群和BALB/c、DBA/1共3种不同品系和同一品系不同种群的小鼠各40只,乙肝疫苗稀释4个不同的稀释度,每个稀释度注射动物10只.酶标法检测乙肝疫苗免疫效力,测定乙肝疫苗的半数有效剂量(ED50)值,再通过微量细胞毒法和PCR方法 检测小鼠的H-2单倍型,计算不同品系小鼠H-2q的百分比,得出乙肝疫苗与不同动物种群的相关性.结果 重组乙肝疫苗(酿酒酵母)经BALB/c鼠检测疫苗的ED50值为2.5μg/ml;经1号种群NIH鼠检测疫苗的ED50值为2.0μg/ml;经2号种群NIH鼠检测疫苗的EDM50值为1.3μg/ml;经3号种群NIH鼠检测疫苗的ED50值为2.3μg/ml;经上海某公司DBA/1鼠检测疫苗的ED50值为0.8μg/ml,对乙肝疫苗的效力反应最强.根据<中国药典>2005年版三部的规定,疫苗的ED50值为≤1.5μg/ml.所以得出的结果 是2号种群NIH鼠和DBA/1鼠检测疫苗是合格的.基因检测结果 DBA/1为H-2q近交系小鼠,2号种群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是96%,3号种群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是30%,而1号种群NIH小鼠含有H-2q型基因百分比为56%,因此DBA/1小鼠和2号种群NIH鼠对乙肝疫苗均产生高应答效应,且远远高于免疫基因型为H-2d的BALB/c小鼠.结论 在进行乙肝疫苗效力鉴定时选择含有q型基因较多的NIH小鼠作为检测动物可以取得较好的应答效果.     

活疫苗及其生产基质中Sendai病毒RT-PCR检测方法的研究

对我国六个主要单位饲养的KM小鼠的体重及10种脏器重量进行测定,并计算其脏器重量系数。结果显示,六个KM小鼠群体间体重及10种脏器重量均有差异（P＜0．05）,在屏障环境下饲养的KM小鼠群体的体生长及大部分脏器发育比较快;而脾脏和肾上腺发育显得较为缓慢,与其它5个群体相比存在极显著性差异。作者认为,加速我国KM小鼠的标准化研究迫在眉睫。     

BALB/c小鼠遗传质量检测的新方法

目的比较随即扩增多态性方法（RAPD）、微卫星方法（STR）与生化标记方法对近交系小鼠遗传质量检测的差异,为近交系动物遗传质量控制提供一种分子生物学方法。方法提取近交系小鼠BALB/c基因组DNA,用6条RAPD引物和20对STR引物对其进行PCR扩增,用生化标记法检测13个位点。结果在6条RAPD引物中,引物2（p2）、引物3（p3）、引物5（p5）和引物6（p6）这四条引物扩增的条带出现差异,表现为不同的RAPD图谱;在20对STR引物中,引物2、4、10和11,这四对引物扩增的条带出现差异,表现为不同的STR图谱;13个生化标记位点中,过氧化氢酶-2（Ce-2）等6个生化位点发现杂合基因。结论RAPD和STR可用于验证生化标记方法的实验结果,并用于保证近交系动物的遗传质量。