定量PCR检测体外扩增脐带血造血干细胞HOXB4基因的表达

目的:通过检测HOXB4基因表达,评价体外扩增的脐带血干细胞(CBSC)自我更新的能力。方法:CBSC在含造血细胞因子(TPO SCF FL G鄄CSF)的无血清培养基体外扩增7天和14天,抽提细胞总RNA,采用定量PCR检测HOXB4基因的表达。结果:CBSC体外培养后,细胞总数可以增加近100倍,但HOXB4的表达较扩增前下降。培养7天HOXB4的水平为扩增前的18%,培养14天,HOXB4表达仅为扩增前的3%左右。结论:CBSC体外扩增细胞数量增加的同时,自我更新能力逐渐下降,甚至消失。     

肿瘤坏死因子预处理促进骨髓间充质干细胞成骨分化潜能

目的:观察肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α预处理骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)后,对其核因子(nuclear factor,NF)-κB通路以及成骨分化能力的影响?方法:实验分为BMMSCs阴性对照组(A组)?TNF-α预刺激1 d组(B组)及TNF-α预刺激7 d组(C组)?预刺激结束后,采用Western blot方法检测各组IκBα和p-IκBα蛋白水平的表达;采用RT-PCR方法检测各组BMMSCs中分泌红细胞生成素和肝细胞受体B4(erythroprotein-producing hepatocellular receptor B4,EPHB4)?胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)?骨保持素(osteoprotegerin,OPG)?白细胞介素(interleukin,IL)-7及基质金属蛋白酶(metrix metalloproteinase,MMP)-1 mRNA表达水平的变化;加成骨诱导剂诱导后,茜素红及碱性磷酸酶检测各组成骨分化能力?同时观察加用NF-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对TNF-α作用的影响?结果:与A组相比,B组和C组IκBα蛋白的表达水平降低(P < 0.05),p-IκBα蛋白的表达水平增高(P < 0.05);与A组相比,B组和C组的EPHB4?IGF-1?OPG mRNA表达水平上调(P < 0.05),IL-7及MMP-1 mRNA表达水平下调(P < 0.05);与A组相比,B组和C组的成骨分化能力增强,而加用NF-κB抑制剂后,B组和C组的成骨分化能力减弱?结论:体外实验表明,BMMSCs经TNF-α预处理后,可以促使BMMSCs成骨分化活性,并且多次刺激较单次刺激效果明显,其促进成骨分化效果至少部分是通过NF-κB通路介导的?     

多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞体外生长特性和转化生长因子-β1基因的表达及其意义

  目的　探讨多发性骨髓瘤（ MM）患者骨髓间充质干细胞（BMMSC）体外生长特性和转化生长因子-β1（TGF-β1）基因表达变化及意义。方法　以7例MM患者为试验组（MM组）,10例单纯缺铁性贫血患者为对照组,取骨髓单个核细胞进行BMMSC 体外培养,观察BMMSC 体外生长形态并计数,绘制生长曲线。取BMMSC 提取总RNA,反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定两组BMMSC 中TGF-β1 mRNA表达水平。结果　MM患者BMMSC 生长活性与对照组无明显差别;MM组BMMSC中TGF-β1 mRNA表达水平（0.01241±0.00419）较对照组（0.00122±0.00030）升高,差异有统计学意义（t＝3.218,P＜0.05）。结论　MM患者BMMSC中TGF-β1高表达可能与MM发病有关。     

抗CD4、CD8单抗诱导异基因骨髓移植嵌合供体小鼠免疫耐受

目的 探讨诱导骨髓移植物的免疫耐受。方法 通过尾静脉给ICR系小鼠注入抗CD4、CD8单抗和同种异基因昆明系小鼠的骨髓，使之成为嵌合体小鼠。最后将该嵌合体小鼠的骨髓移植到宿主体内。结果 实验组和对照组的植活皮片中位累计生存率分别为100％和33．33％，经Wilcoxon检验P＜0．05。结论 抗CD4、CD8单抗与异基因骨髓细胞的联合应用可诱导供体产生特异性免疫耐受，将该嵌合供体的骨髓移植后可延长受体的生存期。     

脐血CD34+细胞体外扩增时HOXB4基因表达的变化

同源盒基因家族成员HOXIM反映原始造血干／祖细胞（PHSC／PHPC）的自我更新和增殖能力。本研究采用实时定量RT—PCR的方法在mRNA水平上检测HOXIM基因的表达，以观察体外扩增脐血CD34^＋细胞自我更新的水平。结果显示：随着体外培养时间的延长，虽然CD34^＋细胞数增加，但HOXB4表达下降；周后，HOXB4几乎检测不到，与成熟外周血淋巴细胞表达HOXIM的水平相同；CD34^＋细胞与骨髓间充质干细胞（BM—MSC）共培养可以减缓CD34^＋细胞HOXIM表达的下降。结论：脐血CD34^＋细胞体外扩增过程中自我更新能力逐渐下降。CD34^＋与BM—MSC共培养有助于减缓体外扩增的CD34^＋细胞自我更新能力的丧失。     

硼替佐米对骨髓间充质干细胞VEGF表达的影响

目的研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米对骨髓间充质干细胞(BMMSC)生长增殖能力及其对血管内皮生长因子(VEGF)基因表达水平的影响。方法通过密度梯度离心法分离体外培养BMMSC,运用MTT法检测硼替佐米对体外培养的BMMSC的生长抑制作用,RT-PCR方法检测BMMSC经硼替佐米(2.5nmol/L)处理后VEGF mRNA表达水平的变化。结果硼替佐米对BMMSC的生长抑制作用呈时间、剂量依赖性,VEGF mRNA相对表达量在硼替佐米处理后减少(P<0.05)。结论硼替佐米可抑制BMMSC的生长,降低其VEGF的表达。     

多发性骨髓瘤龛位

既往研究提示造血十细胞（HSC）的自我更新、分化等生物学特性受骨髓内特定的微环境即龛位调节。HSC龛位由黏附分子、细胞表达的信号分子、骨髓基质细胞、血管内皮细胞和成骨细胞等非细胞与细胞成分构成。近期多项研究提示在骨髓瘤的发生、发展过程中,骨髓中也存在与HSC龛位类似的骨髓瘤细胞龛位。骨髓瘤细胞通过细胞间直接接触,或可溶性因子的分泌诱导其周围骨髓微环境出现多种异常,产生适合骨髓瘤（于）细胞的龛位,而骨髓瘤细胞龛位反过来参与骨髓瘤（干）细胞的自我更新、分化、耐药等过程。本文就骨髓瘤细胞的龛位作一综述。     

多发性骨髓瘤龛位

既往研究提示造血干细胞(HSC)的自我更新、分化等生物学特性受骨髓内特定的微环境即龛位调节.HSC龛位由黏附分子、细胞表达的信号分子、骨髓基质细胞、血管内皮细胞和成骨细胞等非细胞与细胞成分构成.近期多项研究提示在骨髓瘤的发生、发展过程中,骨髓中也存在与HSC龛位类似的骨髓瘤细胞龛位.骨髓瘤细胞通过细胞间直接接触,或可溶...     

骨髓衰竭患者骨髓间充质干细胞白介素-6的表达及其意义

目的:了解再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)、骨髓增生异常综合征(marrow mesenchymal stem cells,MDS)患者骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达,并分析其意义。方法:用半定量RT-PCR方法检测AA和MDS患者MSCs IL-6 mRNA的表达水平。结果:AA患者MSCs IL-6的表达明显低于MDS组和正常对照组,P<0.05;MDS患者和正常对照组之间IL-6的表达无明显差异,P>0.05。结论:AA患者MSCs IL-6的表达存在明显异常,这可能与AA的发病有一定的关系。     

原发中枢神经系统淋巴瘤误为脱髓鞘脑病1例分析并文献复习

目的：探讨原发中枢神经系统淋巴瘤临床特征,展望治疗前景。方法：分析1例原发中枢神经系统淋巴瘤患者的临床资料,复习国内外相关文献。结果：该病少见,病因及发病机制尚不明确。早期易误诊,显像技术、病理组化技术的进步提高早期诊断率。结论：原发中枢神经系统淋巴瘤预后差,以甲氨蝶呤为主的化疗联合放疗或者自体移植为主要疗法,但大多患者最终会复发。