骨髓间充质干细胞与骨髓瘤细胞共培养时EphB4/ephrinB2表达异常

目的:研究正常骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)在与骨髓瘤细胞株U266?RPMI8226共培养过程中,骨髓瘤细胞对MSC EphB4/ephrinB2表达的影响?方法:应用Transwell培养体系,将正常骨髓MSC分别与骨髓瘤细胞株U266?RPMI8226细胞共培养7?12 d后分别应用实时定量RT-PCR和细胞免疫化学方法检测骨髓MSC的EphB4/ephrinB2 mRNA和蛋白表达水平?结果:骨髓MSC与U266?RPMI8226共培养后,与对照组MSC相比,生长和形态未见明显改变,应用实时定量RT-PCR方法检测骨髓MSC EphB4/ephrinB2的mRNA水平较对照组均降低,在共培养7 d的时间点上除EphB4在RPMI8226共培养组与对照组差异无统计学意义,其余组间差异均有统计学意义(P < 0.05),在12 d上差异无统计学意义(P > 0.05)?细胞免疫化学结果显示共培养组MSC 胞膜胞浆 EphB4/ephrinB2 表达下降?结论:骨髓瘤细胞株U266?RPMI8226在与正常骨髓MSC共培养后,诱导骨髓MSC EphB4/ephrinB2表达的下调,可能通过MSC成骨-破骨活动的脱耦合,参与骨髓瘤骨病的发生?     

骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞可异常影响骨髓瘤细胞株的趋化功能

背景：多发性骨髓瘤患者骨髓微环境中间充质干细胞有多种异常,但异常的间充质干细胞对骨髓瘤细胞的趋化功能影响目前仍不清楚。 目的：比较正常人与多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞在体外对骨髓瘤细胞株趋化迁移的影响。 方法：体外培养的正常人骨髓间充质干细胞或初诊骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞,在有或无硼替佐米条件下,分别与骨髓瘤细胞株U266细胞直接共培养,比较U266细胞的Transwell迁移率、定量PCR检测mRNA的表达水平。同时还检测U266细胞对正常人骨髓间充质干细胞或骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞培养液上清的Transwell迁移情况。 结果与结论：正常人骨髓间充质干细胞或骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞与U266细胞直接共培养后,两组骨髓瘤细胞的趋化特性有区别,表现为骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞组的U266细胞基础Transwell迁移率高、CCR1的表达水平高(P均 < 0.05)。硼替佐米处理U266细胞后并不能消除两组的的区别。然而,U266细胞对正常人骨髓间充质干细胞或骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞培养液上清的Transwell迁移并没有明显区别。结果提示骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞本身存在一些内在缺陷,在与骨髓瘤细胞株U266相互作用过程中,可以影响U266的体外趋化功能,并且这一影响主要是通过骨髓间充质干细胞与骨髓瘤细胞直接相互作用引起的。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程      

多西环素对骨髓瘤细胞株H929内源性凋亡的影响及其作用机制

目的:探索多西环素(DOX)诱导骨髓瘤H929细胞株凋亡的作用及其可能机制。方法:用DOX、MEK抑制剂U0126和RAS激动剂ML-098单独或联合处理H929细胞,Western blot检测p-MEK、caspase-3、caspase-9、c-Jun等蛋白的表达;CCK8法检测细胞增殖;Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。结果:经DOX处理H929细胞后,p-MEK蛋白表达明显减少(P<0.05),伴有caspase-3、9蛋白剪切体的明显增加(P<0.05)。U0126处理H929细胞后,p-MEK蛋白水平明显下降(P<0.05),伴有caspase-3、9蛋白剪切体的明显增加(P<0.05)。DOX联合ML-098处理H929细胞后,H929细胞凋亡比例较DOX单独处理组减少;两药联合处理组p-MEK及p-Erk1/2蛋白表达明显高于DOX单独处理组(P<0.05), Caspase-3、9蛋白剪切体的水平较DOX单药处理组均明显下降(P<0.05)。DOX处理H929细胞后,c-Jun mRNA和蛋白表达水平均明显增加...     

类风湿关节炎患者CD4+CD25+CD127-调节性T细胞CXCR4的研究

目的：研究类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血(peripheral blood,PB)及关节滑液(synovial fluid,SF)中调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)表达CXC趋化因子受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)的水平以及与疾病活动标志物的相关性,探讨CXCR4⁺Treg参与RA的发病机制。方法：(1)收集51例RA患者及40例健康人外周血,常规关节穿刺术抽取10例RA患者和8例骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者膝关节滑液,流式细胞术检测外周血及关节液中CD4⁺CD25⁺CD127^-Treg及CXCR4⁺Treg细胞比例。收集RA患者临床资料,与外周血Treg及CXCR4⁺Treg比例进行相关性分析。(2)Ficoll密度梯度离心法分离RA患者和健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuc...     

DNA测序鉴定新等位基因HLA-DRB1*1609

目的 鉴定HLA新等位基因DRB1＊1609。方法 应用分子克隆和DNA测序的技术测定HLA新等位基因的核苷酸序列，进行HLA等位基因序列比对分析和新等位基因的血清学分型及家系分析。结果 新等位基因DRB1第二外显子（exon2，Ex2）序列与所有已知的HLA等位基因序列均不相同，与同源性最高的HLA-DRB1＊160101相比，第127位碱基由A→T，引起相应编码第47位氨基酸由酪氨酸Tyr（Y）→苯丙氨酸Phe（F）。血清学分型表明抗原特异性为DR16。家系分析提示该志愿者DRB1＊1609等位基因遗传自母亲。结论 DNA测序表明被测标本含有HLA-DRB1新等位基因，被WHOHLA因子命名委员会正式命名为HLA-DRB1＊1609。     

转HOXB4基因人骨髓MSC促进脐血CD34~+细胞体外扩增

目的 研究转HOXB4基因的人骨髓间充质干细胞(MSC)对脐血CD34~+细胞体外扩增的支持作用.方法 用病毒载体质粒转染包装细胞293T,收获病毒上清(VCM)感染MSC后,用潮霉素筛选获得转HOXB4的MSC(MSC-HOX).分别将MSC(对照组)与MSC-HOX细胞(实验组)作为CD34~+细胞体外扩增的饲养层细胞,结合细胞因子Fh3/Flk3配体(FL)、促血小板生成素(TPO)、干细胞因子(SCF)和粒细胞-集落生长因子(G-CSF)体外扩增脐血CD34~+细胞10 d,收集所有脐血细胞,检测细胞总数、CD34~+细胞总数,集落细胞形成单位(CFU)数.结果 生产重组逆转录病毒可有效将HOXB4基因转入靶细胞内并表达.脐血CD34~+细胞经体外扩增10 d后,细胞总数和CFU数两组间差异无统计学意义(P>0.05),脐血CD34~+细胞总数和比例高于对照组(P<0.05).结论 转HOXB4基因的人骨髓MSC在脐血CD34~+细胞体外扩增中,可保持CD34~+细胞未分化状态,有潜在的应用价值.     

多发性骨髓瘤骨病成骨与破骨脱耦合机制的研究进展

多发性骨髓瘤的主要临床特征之一是骨骼被破坏,其发生机制涉及到破骨细胞的骨吸收与成骨细胞的成骨活动,二者不能互相配合、顺序发生。产生成骨与破骨的不平衡或称脱耦合。在生理情况下,骨代谢过程中成骨与破骨的耦合包括两种形式,即因子耦合(coupling factors)和位置特异性耦合(position-specific co...     

与骨髓瘤细胞共培养时对骨髓间充质细胞表达DKK1和HGF的影响

目的:研究缺铁性贫血患者骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在与骨髓瘤细胞株U266共培养过程中.骨髓瘤细胞对MSCs DKK1和HGF表达的影响.方法:将体外培养的骨髓MSCs,在Transwell的条件下与骨髓瘤细胞株U266共培养后.检测骨髓MSCs的生长、培养液上清中肿瘤坏...     

POEMS综合征伴脑梗死一例

患者,男,58岁.因胸闷气急、头昏乏力、右耳听力下降、四肢末端麻木3个月伴盗汗于2003年10月入院.体检:血压120/70 mm Hg,皮肤黝黑(图1),双下肢可见凹陷性水肿,颈胸部可见突出于皮面的结节,有黑色物沉积(图2),双侧乳房发育(图3).全身浅表淋巴结不大,双肺底叩诊音浊,呼吸音低,心界扩大,心音遥远.