Toll样受体4介导小鼠肠缺血再灌注诱导的肺损伤及肺炎症反应

内脏器官缺血是临床重症患者的常见病变之一,不但会造成局部内脏器官的缺血性损害,而且会引发远隔部位脏器病变.在诸多脏器中,肺脏最易受到机体远隔脏器缺血性病变的影响,成为机体失控炎症损害的主要靶器官之一,常常迅速进展为急性呼吸窘迫综合征,病情凶险顽固,预后极差.前期研究证实,局部脏器缺血引发的炎症反应是肺损伤的发病基础,肺损伤的本质是全身炎症反应在肺部的表现,是炎症肺损伤.在炎症肺损伤发生发展的过程中,诸多炎性细胞和炎症介质通过不同的信号转导途径,构成炎症反应的“细胞刚络”和“生物介质网络”,直接参与炎症肺损伤的发生发展,但其潜在的分子生物学机制目前还不甚明朗.本研究拟通过利用Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)基因突变小鼠和TLR4野生型小鼠,在肠缺血再灌注(IR)损伤基础上,以肺脏为靶器官,初步研究TLR4信号通路在脏器IR引发炎症肺损伤中的作用机制.     

体外培养组织工程皮肤几种活性肽及细胞外基质的表达

目的观察体外培养组织工程皮肤的生物学活性. 方法将表皮细胞和(/或)成纤维细胞种植于脱细胞真皮表面,经培养后形成各种皮肤替代物,分别于接种后3、7 d时收集培养上清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定白细胞介素(IL)-6、IL-8和转化型生长因子β1(TGF-β1)的含量,采用放射免疫法测定层粘连蛋白、透明质酸、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的含量. 结果各皮肤替代物上清中均可检测到一定量的细胞因子、生长因子和细胞外基质成分,培养7 d与3 d时相比,除TGF-β1外,其余各指标的含量均明显上升(P＜0.01).含表皮细胞和成纤维细胞的皮肤替代物与单纯含成纤维细胞的皮肤替代物相比,培养上清中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显减少(P＜0.01). 结论体外培养的皮肤替代物具有较强的生物学活性,种植表皮细胞对成纤维细胞的功能具有一定的调节作用.     

烧伤大鼠肺泡巨噬细胞CD14蛋白表达对细胞因子的影响

目的：探讨严重烧伤对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)CD14膜蛋白(mCD14)表达变化及其对AM分泌细胞因子的影响。方法：20％Ⅲ度烧伤大鼠检测早期外周血LPS浓度。AM以烧伤血清及LPS刺激，再分别以抗CD14抗体作用，免疫组化检测mCDl4蛋白表达变化；ELISA检测培养液中川TNFα和IL—6浓度。结果：烧伤血清和LPS刺激后．mCD14蛋白表达从1h起就开始增加，2h达峰值，尔后逐渐减弱，上述改变在12h内持续，细胞因子分泌相应增加；抗CD14抗体阻断CD14作用后，mCD14的蛋白表达显著降低，细胞因子分泌亦相应减少。结论：严重烧伤后随LPS增加，激活内毒素信号传导通路，使AM分泌细胞因子增加，此作用可以被抗CDl4抗体所阻断，提示严重烧伤后可以通过调节CD14的作用而减少细胞因子的合成和分泌。     

腺病毒绿色荧光表达载体追踪皮肤组织工程种子细胞的转归

目的：用转基因技术标记组织工程种子细胞，探索一种追踪种子细胞转归的方法。方法：用腺病毒荧光表达载体转染人皮肤成纤维细胞，观察转染率及其荧光表达。再将细胞种植在真皮支架上，活体观察荧光标记的效果和持续时间。结果：所制备的腺病毒荧光表达载体能转染靶细胞，转染率＞95％。转染的细胞经一次传代后，尽管荧光强度降低，细胞轮廓仍清晰可见。细胞种植至真皮支架上，观察2周，可以在荧光显微镜下较清晰地观察到培养物活体上细胞的形态。结论：应用腺病毒荧光表达载体标记皮肤组织工程种子细胞以追踪细胞的转归是方便、可行的。     

TGF-β1、TNF和维拉帕米对烧伤小鼠CD14表达的影响

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子(TNF)和维拉帕米对严重烧伤小鼠早期腹腔巨噬细胞(Mψ)CD14表达的影响.方法:BALB/c小鼠被随机地分成烧伤组和假烫组,将收集到的腹腔巨噬细胞分别加入不同浓度TGF-β1(0.02,0.20,2.00μg/ml)、TNF(0.1,1.0,10.0 μg/ml)和维拉帕米(10,100,1 000 pm01/ml)培养.用细胞原位杂交方法,观察TGF-β1、TNF和维拉帕米对小鼠MψCD14 mRNA表达的影响.结果:(1)烧伤后腹腔MψCD14 mRNA的表达明显增加.(2)0.02,0.20 μg/ml TGF-β1可使烧伤小鼠MψCD14 mRNA表达增加,2 μg/ml则可使烧伤小鼠MψCD14 mRNA表达减少.TNF、维拉帕米各浓度对烧伤小鼠MψCD14 mRNA表达均无明显影响.结论:TGF-β1能通过改变MψCD14 mRNA的表达,调节其功能状态.TNF、维拉帕米对烧伤小鼠MψCD14 mRNA表达无明显影响.     

原油蒸气对机体影响的实验研究1．对学习记忆、心和肾的影响

本研究观察大鼠、小鼠经原油蒸气（３０ｇ／ｍ３，１５ｇ／ｍ３，３ｇ／ｍ３）吸入染毒，对学习记忆、心电图和肾的影响。结果表明；（１）原油蒸气可影响动物的学习记忆能力，其机制与脑内单胺类和氨基酸类神经递质变化有关．“神乐康”可改善原油蒸气降低的学习记忆能力。（２）其心电图和肾脏末发现有病理意义的改变。     

人工真皮支架在大面积撕脱伤救治中的应用

目的 研究人工真皮支架在大面积撕脱伤救治中的应用。方法 回顾性分析第二军医大学长海医院烧创伤外科2011年1月至2014年12月收治的大面积撕脱伤患者20例,年龄6~68岁,撕脱面积占总体表面积（total body surface area,TBSA）10%~40%。按照治疗方法不同将患者分为两组,每组各10例,对照组患者一期行清创+负压引流术,二期行取植皮术;治疗组患者一期行清创+真皮支架+负压引流术,5~7 d后更换负压装置,观察基底血管化程度,伤后12~14 d行取植皮术。分别统计两组患者从清创到植皮的间隔时间,供皮区愈合时间和愈合质量以及植皮区皮片成活率、愈合时间及愈合质量。结果 与对照组相比,治疗组患者从清创到植皮的间隔时间延长[（13.30±2.06）d vs（7.90±1.10）d,P<0.01];供皮区愈合时间缩短[（8.10±0.99）d vs（13.10±1.10）d,P<0.01],供皮区愈合质量提升（4.40±1.58 vs 7.80±1.14,P<0.01）;植皮区皮片成活率[（87.30±5.27）% vs（85.10±5.53）%]、愈合时间[（17.80±1.14）d vs（18.70±2.06）d]、愈合质量（8.40±1.07 vs 9.00±1.05）差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 在大面积撕脱伤的治疗过程中早期应用真皮支架联合负压引流技术,可避免在伤后1周左右大范围取皮,手术损伤少,对全身干扰小,可保证患者平稳度过病程早期阶段;同时通过支架自身的血管化可促进创面恢复,减少植皮所需皮片厚度,从而缩短供皮区愈合时间、提高供皮区愈合质量。     

负压创面治疗技术的研究应用进展

负压创面治疗技术（NPWT）是最近十几年来创立并开展的创面治疗新方法,近年已被广泛用于各种急慢性创面的治疗而且取得了确切的疗效。本文概括比较了负压创面治疗技术的两个关键技术：封闭负压引流技术和封闭负压辅助闭合技术,阐明了二者是原理相同,但选材、方法和适应证不同的两种技术。另外,本文也归纳了负压创面治疗技术促进伤口愈合的作用机制,主要是通过促进创面血液循环、减轻水肿、抑制细菌繁殖、机械应力促使肉芽组织生长、抑制细胞凋亡从而促进创面愈合。同时,本文还总结了近年来临床上将NPWT技术运用于各种急慢性创面治疗的进展。最后,作者也对负压治疗技术的发展前景提出了自己的看法与见解。     

p38丝裂原活化蛋白激酶在烧伤大鼠急性肺损伤中的作用机制

目的　研究 p38丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号转导通路在严重烧伤大鼠肺部促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)产生及肺血管内皮细胞损伤中的作用和相关机制。　方法　健康成年雄性SD大鼠 4 8只 ,随机分为假烫 (A)组、烫伤对照 (B)组和烫伤 p38MAPK抑制剂SB2 0 35 80(C)组 ,每组各 16只。观察烫伤 (以下称烧伤 ) 2 4h后大鼠血清和支气管肺泡灌洗液 (BALF)中TNF α和IL 1β含量、血浆和肺脏微血管vonWillebrand因子 (vWF)含量、肺脏激活蛋白 1(AP 1)活性等指标的改变。　 结果　B组大鼠烧伤后 2 4h血清和BALF中TNF α和IL 1β含量明显增高 ,血浆vWF含量为 (194 .2± 2 8.3) % ,显著高于A组的 (93.2± 14 .3) % (P <0.0 1);肺脏微血管vWF含量的积分值为 1.1± 0 .3,显著低于A组的 3.3± 0 .4 (P <0.0 1);其肺脏AP 1活性上升。C组血清和BALF中TNF α和IL 1β含量、血浆及肺脏微血管vWF含量、肺脏AP 1的活性较B组变化幅度明显偏小。　结论　p38MAPK活化后 ,通过活化转录因子AP 1,介导了严重烧伤后肺脏促炎性细胞因子TNF α和IL 1β的产生和肺血管内皮细胞的损伤     

外固定支架联合负压封闭引流术治疗下肢开放性粉碎性骨折合并严重软组织损伤

目的探讨外固定架联合负压封闭引流术（vacuum sealing drainage,VSD）处理合并严重软组织损伤的下肢开放性粉碎性骨折的效果。方法 86例严重软组织损伤的小腿骨折患者均采用急诊清创、外固定架联合负压封闭引流术治疗,若合并大面积皮肤软组织撕脱,则取撕脱皮肤并打薄回植,以VSD覆盖;若合并软组织缺损,则清创后以VSD覆盖;若合并骨筋膜室综合征,则在切开减张后同期VSD覆盖。结果 86例患者中,除3例因个人因素中途出院外,其余83例均完成了既定治疗方案,转移皮瓣和植皮均成活,创面愈合良好,无一例截肢。结论合并严重软组织损伤的小腿骨折患者,早期简单清创后采取外固定架联合负压封闭引流术的方法,在迅速稳定骨折的同时,能有效封闭创面,改善二期创面修复环境,有利于骨折愈合,减少并发症。