抗人红细胞抗体和HIV抗原融合蛋白的构建及活性鉴定

目的构建及表达抗红细胞(RBC)单链抗体(ScFv)和HIV抗原的融合蛋白,并做活性测试。方法将鼠抗人红细胞单链抗体可变区重链、轻链基因与HIV抗原基因相连,重组于高效表达载体中,并在大肠埃希菌中表达。结果经ELISA检测和红细胞凝集检测,证明表达的融合蛋白具有HIV抗原和抗人红细胞的双重活性,可使含有HIV抗体的红细胞悬液凝集。结论融合蛋白构建成功,可用于HIV的快速检测。     

HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测试剂盒的研制与评价

目的研制HIV-1／2抗体和P24抗原联合检测酶免疫试剂盒并评价其实用性。方法联合使用基因工程HIVI／2型抗原和抗HIVP24单克隆抗体包被酶联反应板，以辣根过氧化物酶标记的HIVI／2型抗原和生物素化的兔抗HIVP24抗体作为标记物，研制了联合检测HIVI／2抗体和P24抗原的ELISA诊断试剂，并对其特异性、敏感性、稳定性等进行评价和临床考评。结果检测P24抗原质控品的灵敏度可达0．2ng／ml；与雅培公司试剂比较检测78份AIDS患者血清和85份正常人血清、对照检测中国药品生物制品检定所研制的HIV参比血清，特异度和灵敏度均为100％。临床考核检测12051份各种血清，灵敏度为100％（543／543），特异度为99．48％（11448／11508）。试剂在37℃放置6d后，试验结果无明显差异。结论本试剂盒具备特异度强、敏感度高、稳定性好、操作简便等优点，可以一步检出HIV特异性抗体和HIVP24抗原，缩短了HIV感染的检测窗口期，适用于HIV感染的实验室诊断和流行病学调查。     

甲型肝炎患者血清特异性IgM、IgA及总抗体动态变化与临床意义

对６０例甲型肝炎患者血清抗甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）ＩｇＭ、ＩｇＡ及总抗体从发病起进行了１年动态观测，并以病程、病情不同分组观察分析。发现病程、病情不同患者抗－ＨＡＶ－ＩｇＡ滴度变化不同，病程长、病情重者，该抗体下降缓慢，持续阳性时间稍长。     

抗HIV-1核心抗原p24单克隆抗体的制备及特性的初步鉴定

目的 :建立分泌抗HIV 1p2 4单克隆抗体 (mAb)的杂交瘤细胞株 ,并对其特性进行初步鉴定。方法 :以纯化的基因工程制备的p2 4抗原免疫BALB/c小鼠 ,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2 /0骨髓瘤细胞融合 ,经HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化后 ,用间接ELISA法及Dotblot对其进行筛选和特性鉴定。结果 :筛选到 2株可分泌抗HIV 1p2 4mAb的杂交瘤细胞 ,其腹水效价为 1×10 -5,亲和力为 1.7× 10 4～ 1.8×10 4mol/L ,mAb的Ig亚类均为IgG1。两株mAb与HBcAg、HCVRNA阳性血清及HIVgp4 1等均无交叉反应 ,只与HIV 1p2 4抗原阳性血清产生特异反应。结论 :成功地建立了 2株可分泌抗HIV 1p2 4mAb的杂交瘤细胞 ,为进一步研制HIV 1p2 4抗原的ELISA检测试剂盒奠定了基础     

电子线治疗下颈段淋巴结转移灶的模拟定位技术

探讨电子线治疗下颈段淋巴结转移灶的模拟定位技术。     

肝细胞癌人源异种移植模型应用研究进展

人源异种移植(patient-derived xenograft,PDX)模型是将取自临床患者的新鲜肿瘤标本直接异种移植到免疫缺陷小鼠体内而建立的动物模型,可以较好的保持原发肿瘤的组织形态、异质性以及基因异常等特征,并保留与患者相似的遗传特性.本文就人肝细胞癌PDX模型构建的实验动物、移植组织类型和方式的选择、最新应用...     

SARS病毒抗体第一代参考品的研制及初步应用

目的 建立严重急性呼吸综合征(SARS)病毒抗体参考品，用于对SARS病毒抗体诊断试剂的实验室评价。方法 收集临床确诊为SARS病人血清和非SARS人群血清，用不同的SARS病毒抗体诊断试剂进行检测筛查，选择不同样品组成参考品。并用该参考品对不同试剂进行初步评价。结果 SARS病毒ISM抗体的参考品由38份组成，其中包括11份阳性参考品、20份阴性参考品、灵敏度样品6份，精密性样品1份；SARS病毒总抗体(包括IgG)由46份组成，其中包括18份阳性参考品、20份阴性参考品、灵敏度样品7份，精密性样品1份。结论 初步应用结果显示该参考品确实能够反应不同试剂的质量差异。     

FGT-A型便携式野外媒介生物标本采集保存运输监测系统的研制与应用

目的在病媒生物监测中,为解决野外远距离、大面积、长时间的媒介昆虫、动物器官、血液标本的采集、保存和运输难题,保障带回实验室作为分离鉴定的媒介生物体内的病毒、细菌等仍具生物活性,研制一套便携设备和工具。方法该系统利用手持全球定位系统,对标本采集相关的地理因素进行定位;使用EBI温度记录仪,实时记录整个标本采集期间的温湿度以及标本保存温度的变化曲线;采用便携式冷藏冷冻设备对标本进行保存运输;使用多功能标本采集包,携带采样工具和其他设备;采用不间断供电装置保障电源不间断。结果整个系统启动后,横跨7个省市,行程15000多km,历时30d,经火车、汽车、山路、公路、铁路、荒漠草原以及人工搬运等,设备运转正常,标本完整无损,运动轨迹全程以电子文档形式记录在案;标本保存温度始终保持在-15.2℃以下。结论FGT-A型野外生物活性标本采集保存运输监测系统具有携带方便、保存标本完整、制冷速度快、保温效果好、抗震效果强、无噪音、功耗低、节省经费等优点。在疾病监测工作中,是采集、保存以及长途运输野外生物活性标本的理想工具。     

自身免疫性肝炎新型抗原分子高迁移率族蛋白B1的克隆表达鉴定及蛋白纯化

目的获得高纯度的人高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),为制备单克隆抗体及研究其与自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)的关系打基础。方法应用PCR从乳腺文库中扩增得到HMGB1基因片段,并将其克隆到pET28a( )载体上,对获得的pET28a( )-HMGB1重组质粒扩增后进行PCR、酶切和测序鉴定。将鉴定完全正确的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析和Western blotting鉴定。最后进行大量诱导并纯化,得到带His标签的HMGB1蛋白。结果成功构建pET28a( )-HMGB1重组质粒,并经诱导表达,得到了纯化的His-HMGB1蛋白。结论构建pET28a( )-HMGB1重组质粒并得到其表达蛋白,为今后深入研究HMGB1在AIH中的作用机理提供有力的实验工具。     

HIV疫苗研究概况

现在全世界艾滋病（AIDS）病魔猖獗。据UNAIDS／WHO最新统计，截至2005年底全球约有4030万HIV-1型或2型感染者，在这些感染者中有3800万为成年人（男性2050万人、女性1750万人），15岁以下儿童230万。仅2005年，全球就有490万新感染病例（15岁以儿童感染70万），因AIDS死亡病例有310万（其中15岁以下儿童有57万），其中95％的新HIV感染者在发展中和低收入国家。我国性病艾滋病防治协会会长、卫生部艾滋病专家委员会主任戴志澄在2005年10月22日“中国首届性医学国际论坛”上表示，白1985年中国发现第1例AIDS病例以来，中国估计已有HIV现有感染者84万，AIDS患者8万。