成人麻疹基础研究进展

麻疹是由麻疹病毒引起的呼吸道传染病,在20世纪50年代以前,每隔2!3年会有1次麻疹大流行,人群中易感者超过40%即可引起大流行。自1963年世界各国开始推广使用麻疹疫苗,麻疹的流行情况一度得到了控制,在21世纪最初10年中地球上全面消灭麻疹已成为世界各国奋斗的目标。但     

乙型肝炎病毒e抗原结构、功能及变异的临床意义

HBeAg并非HBV装配、复制或感染所必需,但却具有免疫调节和影响病毒复制的重要功能,而HBeAg变异后出现的HBeAg阴性慢性乙型肝炎更有特殊的临床特征。此文就近年有关HBeAg结构及功能的研究进展及其变异临床意义进行综述。     

HIV多抗原位点串联基因的表达及活性鉴定

目的在原核表达载体系统中对HIV—1／2型外壳蛋白多个抗原位点串联基因进行表达、纯化并鉴定其活性。方法人工合成含HIVgp41的2个抗原位点、gp120的3个群的各3个抗原位点及gp36的2个抗原位点的串联基因，克隆到原核表达载体pRSETB中，构建重组表达质粒pRSETB-env，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达，利用固化金属离子配体亲和层析技术纯化表达蛋白．利用逐渐降低尿素浓度透析法使目的蛋白复性。用免疫印迹和ELISA法分别对表达产物进行鉴定。结果目的基因在BL21中有较高表达率，纯化后表达蛋白经十二烷基硫酸钠．聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)可见一条约32KD的蛋白带．与设计分子量相符。免疫印迹、ELISA试验显示该表达蛋白可与HIV患者血清较好结合．而与其它患者血清无交叉反应。结论成功构建了由HIV外膜蛋白多个抗原位点串联基因片段的表达载体pRSETB-env，并在原核细胞中高效表达，表达蛋白经一步纯化后纯度较高．并具有良好特异性和活性。     

凝集素亲和层析离心柱化学发光检测AFP-L3在肝细胞癌诊断中的应用

目的为了评价凝集素亲和层析离心柱化学发光检测甲胎蛋白异质体（AFP-L3）在诊断原发性肝癌中的意义。方法应用凝集素亲和层析离心柱化学发光法检测185份肝癌与171份非肝癌患者血清AFP-L3/AFP,以〉10%为阳性。结果185例肝癌组患者血清中,AFP-L3阳性率为73.0%,171例非肝癌患者血清中,AFP-L3阳性率为29.8%,两组之间具有显著性差异。结论凝集素亲和层析离心柱化学发光法应用于原发性肝细胞癌的诊断具有高特异性,适合大规模、高通量的临床标本检测。     

急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒序列的研究

目的:研究急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒序列。方法:提取急性乙型肝炎患者血清中HBV DNA,扩增其表面抗原序列,测序并相互比较。结果:测定5例急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒均为adw亚型,其中3例同源性>99%。结论:adw亚型HBV感染后较多为急性病变,由于病毒变异少,机体有可能清除HBV。     

乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS1蛋白基因在原核细胞中的高效表达及其表达产物的抗原性分析

目的将乙型脑炎病毒NS1蛋白基因克隆至pET28-a( )表达载体,构建原核表达载体pET-NS1,并使该基因在E.coli中高效表达,为进一步研制乙脑早期诊断试剂奠定基础。方法根据GenBank中提供的乙型脑炎病毒SA14-14-2株全基因序列设计引物,通过反转录及巢式PCR方法扩增目的片段,测序后连接pET28-a( )载体,构建重组表达载体pET-NS1,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导获得高效表达。结果扩增出了1300bp的基因片段,与预期大小一致,测序后经Blast验证与已发表乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS1蛋白基因序列同源性为100%,成功克隆至表达载体pET28-a( )并获得高效表达,表达产物分子量约为45kD,Western blot分析表明该表达产物具有良好抗原性。结论该表达产物的稳定高效表达及其抗原特异性为乙脑的诊断试剂开发提供了依据。     

乳糖化人血清白蛋白单磷酸阿糖腺苷抗病毒导向治疗的实验研究

对病毒性肝炎的抗病毒导向治疗具有靶向性较强、特异性较好的特点。交联物的结构纯度在99％以上,结构清楚,水溶性强,稳定性好,以平板滤膜超滤除热原获得成功,建立了超滤法分离纯化的工艺,快速方便,分离纯度高,回收率好,适合批量生产。交联物所用原料为人血清白蛋白及抗病毒药单磷酸阿糖腺苷,已广为     

多次血浆置换治疗63例(160次)重型乙型肝炎临床分析

目的 探讨多次血浆置换治疗重型乙型肝炎的临床效果. 方法 对63例重型乙型肝炎患者反复进行血浆置换治疗,比较置换前后患者症状、总胆红素(TBIL)、凝血酶原活动度(PTA)的变化和有效好转率. 结果 治疗后患者症状明显减轻,TBIL、PTA均有不同程度的改善,治疗前后TBIL分别为(429.56±143.65)μmol/L和(268.93±92.86)μmol/L,治疗前后PTA分别为(31.94±12.02)%和(52.36±12.15)%.63例患者中28例好转,35例无效(包括肝移植或死亡),好转组TBIL、PTA在治疗结束第3 d TBIL反弹幅度均较无效组差异有统计学意义(P<0.05),治疗好转组患者在结束治疗第3 d TBIL反弹至原来水平的(0.78±0.23),而无效组反弹至原来水平的(0.98±0.19),治疗好转组患者在结束治疗第3 d PTA能保持在血浆置换后(0.81±0.23),而无效组为(0.58±0.19).同时在多次血浆置换中治疗好转组TBIL平均数值呈现逐步下降趋势,而无效组显示无明显下降. 结论 人工肝血浆置换能显著改善患者临床症状及生化指标,监测TBIL及PTA的变化有助于决定是否多次行血浆置换治疗.     

我国新分离呼肠病毒血清型鉴定

在 2 0 0 3年上半年SARS流行中 ,本实验室从北京地区临床确诊的SARS患者的含漱液和咽拭子标本以及尸检肺标本中 ,先后分离到 4株呼肠病毒[1 ] 。经血清交叉中和试验证明 ,从不同地区、不同患者所分离到的呼肠病毒其抗原性均相同[2 ] 。最近又对其中 1株呼肠病毒进行了血清型的鉴定。抗呼肠病毒 1～ 3型豚鼠免疫血清由解放军第 30 2医院病毒室制备 ,其中 1型血清中和效价为 1∶32 0 (1980年 4月 5日制备 ) ,2型血清中和效价为 1∶32 0 (1980年 4月 12日制备 ) ,3型血清中和效价为 1∶16 0 (1983年 7月 15日制备 ) ,均为 - 80℃保存 ,近期…