IA-2基因的克隆及原核表达研究

目的 应用基因获取足量且具有免疫活性IA－2重组蛋白,为建立IA－2抗体检测方法奠定基础。方法 通过逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法从小鼠脑组织RNA中扩增编码IA－2胸内结构域的cDNA,构建表达型重组质粒,以DNA序列分析确证后,在大肠杆菌中表达,用亲和层析纯化融合目的蛋白,并以斑点印迹技术（Dot blot)鉴定其免疫原性。结果 所获特异CR产物正确重组至Pimpoint Xa-1表达载体中。经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核表达及亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约56000的融合目的蛋白,表达量约1mg蛋白／升菌液,且表达产物与谷氨酸脱羧酶抗体阳性的糖尿病患者血清及健康对照血清发生的显色反应差异有显著性（P＜0.05)。结论 原核表达的IA－2融合蛋白具有免疫学活性,可用用于糖尿病患者血清中相关抗体的检测。     

差异显示PCR分析高脂饮食诱导的肥胖大鼠脂肪组织的基因表达谱

本实验采用高脂饮食饲养ＳＤ大鼠 ,建立肥胖大鼠模型 ,用差异显示ＰＣＲ(ＤＤ ＰＣＲ)方法比较高脂饲料组大鼠与普通饲料组大鼠脂肪组织中基因表达的差异 ,力求发现受饮食调控的基因 ,探讨高脂饮食致肥胖的分子机制。一、材料和方法1.动物模型与标本采集 :2 0只ＳＤ大鼠分为高脂饲料组和普通饲料组。动物饲养 16周。2 .脂肪组织总ＲＮＡ的抽提及处理 :(1)脂肪组织总ＲＮＡ的抽提 :取 1ｇ大网膜脂肪组织按照Ｔｒｉｚｏｌ总ＲＮＡ抽提试剂盒说明书进行。 (2 )总ＲＮＡ的处理 :用不含ＲＮＡ酶的ＤＮＡ酶处理抽提的总ＲＮＡ以去除含有的少量基因…     

Palindrome H新型肝素涂层带隧道带涤纶套导管对凝血系统的影响

背景:Palindrome H肝素涂层带隧道带涤纶套导管(简称Palindrome H肝素涂层导管)有望降低导管相关感染率和减少导管功能不良的发生,目前缺乏该导管对凝血系统影响的研究。目的:评估Palindrome H肝素涂层导管的对血液透析患者凝血系统的影响。方法:选取2014年1月至2016年6月在佛山市第一人民医院血液净化中心需维持性血液透析,而无法建立内瘘的患者,分为Palindrome H肝素涂层导管组和非肝素涂层Palindrome导管组2组,分别置管。所有患者每3个月检测血小板计数、凝血酶原时间、国际标准化比值(INR)、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原降解产物等指标,进行组间对比。试验方案通过了广东省佛山市第一人民医院医学伦理委员会的讨论审核,批准号:L[2014]第5号。结果与结论:最终纳入患者60例(Palindrome H肝素涂层导管组28例,Palindrome导管组32例),进行了为期30个月的随访,结果数据为置管后第0,3,6,9,12,15,18,21,24,27,30个月检测的平均值。结果显示两组患者的血小板计数、凝血酶原时间、国际标准化比值(INR)、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原降解产物等指标比较均无统计学差异(P>0.05),没有实验室检查表明发生了肝素诱导的血小板减少症。说明在临床应用中,Palindrome H肝素涂层导管与非肝素涂层Palindrome导管相比较,对患者凝血系统无明显影响。     

2011年丹棱县法定报告传染病疫情分析

目的 了解2011年丹棱县传染病发病情况和特征,为制定相应的传染病防治措施和预防接种提供科学依据.方法 收集丹棱县2011年法定报告传染病疫情资料,用描述性流行病学方法统计分析.结果 丹棱县2011年无甲类传染病报告；报告乙、丙类传染病14种346例,报告发病率为212.00/10万；无死亡病例.报告发病率居前5位的传染病依次为肺结核(93例)、病毒性肝炎(83例)、手足口病(73例)、其他感染性腹泻(28例)、痢疾(22例)分别占发病总数的26.88％、23.99％、21.10％、8.09％、6.36％.各类传染病中以肠道传染病为主,共报告153例,占发病总数的44.22％；其次为呼吸道传染病,共报告103例,占发病总数的29.77％；血源及性传播传染病,共报告85例,占发病总数的24.57％.结论 2011年丹棱县法定报告传染病主要为肠道传染病和呼吸道传染病,应进行重点防治,加强健康教育,降低传染病发病率.     

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目的观察冲压法上颌窦底提升同期牙种植体植入术对上颌窦黏膜的影响。方法收集2012年1月至2015年8月于第四军医大学口腔医院口腔种植科就诊,因上颌后牙区垂直骨高度不足连续行冲压法上颌窦底提升术的患者100例(共100侧上颌窦),同期植入Straumann种植体126枚。于术前、术后1 d、术后6个月拍摄锥形束CT(CBCT),分析该术式对上颌窦黏膜的影响。结果上颌窦正常黏膜和增厚黏膜在术后1 d的CBCT上均观察到黏膜厚度的增加,与术前黏膜厚度的差异有统计学意义(P<0.05);术后1 d上颌窦鼻道开口阻塞发生率显著增加(0.09%),与术前差异有统计学意义(P<0.05)。不同时期上颌窦假性囊肿直径无明显变化(P>0.05)。结论从对上颌窦黏膜及生理功能的影响来看,上颌窦黏膜增厚和假性囊肿并非冲压法上颌窦提升术的绝对禁忌证。     

甲状腺激素反应蛋白1的原核生物表达

目的 应用基因工程技术表达甲状腺激素反应蛋白1(TRP-1)。方法 应用RT-PCR方法，从新生大鼠脑组织RNA中扩增编码TRP-1的cDNA片段，构建表达型重组质粒，经DNA序列分析确证后，在大肠杆菌中表达，以Western印迹来初步鉴定是否表达了目的融合蛋白，用亲和层析纯化融合目的蛋白，并以SDS-PAGE电泳测定其相对分子质量。结果 所获特异PCR产物正确地重组入Pinpoint Xa-1表达载体中。Western印迹表明经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核细胞表达产生了目的融合蛋白，亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约23400的融合目的蛋白。结论 应用原核细胞表达体系成功地表达了TRP-1融合蛋白，为进一步研究其在脑发育中的所起的作用以及该蛋白的其它功能提供了可能。     

髌腱透明细胞肉瘤一例报告

 透明细胞肉瘤最早由Enzinger于1965年报告［1］,是一种具有黑色素细胞分化的、通常累及肌腱和腱膜的软组织恶性肿瘤。临床罕见,约占软组织肉瘤的1%,恶性度高,预后差。好发年龄为20~40岁。约半数患者主诉疼痛,肿块有压痛,部分患者就诊前疼痛症状可持续达5年［2］。最常见的好发部位为足踝部,发生于髌韧带者未见文献报道。我科诊治1例发生于髌腱的透明细胞肉瘤。
女,36岁,左膝前疼痛半年、发现左膝前肿物4个月入院。疼痛以蹲起、上下楼及跳跃时为著。体格检查：左膝髌韧带近端可触及1.5　cm×1.5　cm×1.5　cm包块,质硬、触压痛、不活动、与周围组织分界不清,皮肤色泽正常,无溃破及出血,皮温不高,无波动感,肿块无血管搏动。     

石墨炉和火焰原子吸收测定车间空气中的钡

目的探讨分析火焰和石墨炉原子吸收在测定车间空气中钡的应用。方法利用火焰测定经超声洗脱滤膜中的钡,在测定过程中使其难以形成钡的氧化物,影响实际测定数据。并运用石墨炉原子吸收测定低浓度的车间空气。结果火焰原子吸收在0~50 mg/L范围内线性关系良好。线性方程y=0.00 028x+0.00 027,相关系数为r=0.9 990,以相对标准偏差作为精密度为0.46%~0.66%,加标回收率为99.27%~100.2%;石墨炉原子吸收在0~50μg/L范围内线性关系良好,线性方程y=0.0 024x+0.00 786,相关系数为r=0.9 996,以相对标准偏差作为精密度为0.39%~0.90%,加标回收率为98.60%~102.00%。结论适合利用火焰和石墨炉原子吸收法测定车间空气中的钡,既避免了使用富氧空气-乙炔火的特殊装置,也合理利用原子吸收光谱仪测定元素的单一性。根据现场车间空气中钡的浓度选择火焰或石墨炉原子吸收进行测定,既避免使用昂贵的ICP-AES和ICP-MS仪器,又利于开展日常的劳动卫生分析工作。     

静息态fMRI评价脑瘫患儿手术前后的脑功能

目的联合静息态功能磁共振成像(resting-state functional MRI,rs-fMRI)中较常用的低频振幅(amplitude of low-frequency fluctuation,ALFF)及局部一致性(regional homogeneity,ReHo)两种分析方法探讨颈总动脉交感神经网剥脱术对单侧痉挛型脑瘫患儿脑功能的影响。材料与方法对21例单侧痉挛型脑瘫患儿手术前1周及手术后14d分别进行常规序列及rs-fMRI检查。利用静息态脑功能数据辅助处理(data processing assistant for resting-state fMRI,DPARSF)软件对图像进行预处理并获取ALFF及ReHo值。采用配对样本t检验比较21例单侧例痉挛型患儿手术前和手术后ALFF及ReHo值差异。结果术后14 d脑瘫患儿患侧大脑半球多个脑区ALFF值和(或)ReHo升高,健侧小脑前叶ALFF值升高(P<0.05);术后14 d脑瘫患儿健侧多个脑区的ALFF值和(或)ReHo降低,患侧额上回ALFF及ReHo值降低(P<0.05)。结论rs-fMRI结果表明,颈总动脉交感神经网剥脱术主要提高单侧痉挛型脑瘫患儿患侧与运动以及认知功能相关脑区区域神经元自发低频振荡活动强度,加强脑区的功能联系。