碳青霉烯类耐药的不动杆菌分子流行病学及其泛耐药的分子机制

目的调查不动杆菌属对碳青霉烯类的耐药性，研究碳青霉烯类耐药的不动杆菌（CRAB）分子流行病学及耐药机制。方法收集2003-2004年我国10家教学医院187株鲍曼不动杆菌，采用琼脂稀释法确定抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）；采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和随机引物多态性DNA（RAPD）分型对128株CRAB进行分子流行病学研究；对多种β内酰胺酶基因进行聚合酶链反应（PCR）及序列分析；对整合子可变基因进行PCR及序列分析。12％十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析CRAB菌株的外膜孔通道蛋白（OMP）。体外筛选亚胺培南的耐药突变子。结果多中心的数据显示，碳青霉烯类耐药率从2003年的4．5％升至2004年的18，2％，多重耐药菌株从2003年的33％升至2004年的48％。北京、广州、福州、杭州、济南的7家医院均发现CRAB耐药克隆的暴发流行。2004年北京协和医院发生泛耐药株的暴发，波及18个病房的74例患者，59，4％的患者（44例）为感染，主要引起肺部感染和菌血症，其中菌血症的病死率40．2％。耐药克隆株均产多种β内酰胺酶：OXA-23型碳青霉烯酶或IMP-8型金属酶、PER-1型酶、高产AmpC酶和TEM-1酶。整合子含有携带氨基糖苷类、利福平、氯霉素的修饰酶及金属酶（blaIMP-8）。不同克隆株OMP差异很大。利血平试验未发现外排机制的高表达。体外成功选择出亚胺培南的耐药突变子，OMP20000的缺失、OMP29000和OMP21000的表达降低是突变子耐药的主要原因。头孢哌酮／舒巴坦、黏菌素、米诺环素可以联合用于CRAB的治疗。结论CRAB克隆株的传播是造成中国多家医院碳青霉烯类耐药率增加的重要原因。不动杆菌通过产生碳青霉烯酶、不同基因盒的整合子、外膜孔蛋白多个通道的缺失，共同介导多重耐药性或泛耐药性。CRAB株引起的感染预后差，必须采取有效的感染控制措施和抗菌药物的干预政策以控制耐药株的传播。     

2003-2004年中国十家教学医院革兰阴性杆菌的耐药分析

目的连续监测2003-2004年中国不同地区十家教学医院临床分离的革兰阴性杆菌的耐药性。方法非重复的1760株革兰阴性杆菌中，2003年871株，2004年889株。菌株经中心实验室复核后，采用琼脂稀释法测定美罗培南等数十种广谱抗菌药物的最低抑菌浓度（MICs），数据分析采用WHONET－5．3软件。结果10种抗菌药物对于1115株肠杆菌科细菌的抗菌活性，敏感率依次为：美罗培南、亚胺培南（敏感率99％）〉哌拉西彬三唑巴坦（86．3％）〉阿米卡星（81．8％）〉头孢吡肟（76．5％）、头孢哌酮／舒巴坦（75．1％）〉头孢他啶（74．8％）〉头孢噻肟（54．8％）、头孢曲松（51．8％）〉环丙沙星（48．6％）；美罗培南、亚胺培南的MIC。分别为0．125μg/ml、1μg/ml。超广谱B内酰胺酶（ESBL）的发生率，大肠埃希菌（56．8％）高于肺炎克雷伯菌（42．3％）和奇异变形杆菌（12．1％）。对于大肠埃希菌，抗菌活性在80％以上的药物除碳青霉烯类之外，还有哌拉西林／三唑巴坦（93．4％）、头孢他啶（86％）和阿米卡星（83．3％）；肺炎克雷伯菌对哌拉西林／三唑巴坦的敏感性为84．6％，头孢他啶的敏感性从82．3％降至69．9％，低于头孢吡肟（77．2％）。50％以上的阴沟肠杆菌对头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松耐药。阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地枸橼酸菌和黏质沙雷菌对哌拉西林／三唑巴坦的敏感率（67．7％-96．4％）略高于头孢吡肟（68．8％-77．5％）及头孢哌酮／舒巴坦（59．7％-87．5％）。这4种菌对阿米卡星的敏感率（70％-83．7％）高于环丙沙星（48．1％-79．5％）。所有摩根摩根菌和普通变形杆菌对美罗培南、亚胺培南敏感，头孢吡肟、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／三唑巴坦的敏感性在90％以上。绿脓假单胞菌对美罗培南的敏感性最高（84％），其次是阿米卡星、哌拉西林／三唑巴坦、头孢他啶和亚胺培南（72．5％-76．6％）。多重耐药的鲍曼不动杆菌从2003年的33％升至2004年的48％，2004年此菌对碳青霉烯类的耐药率增至18％。对于洋葱伯克霍尔德菌，敏感性最高的药物是美罗培南（64．9％）、头孢哌酮／舒巴坦（63．2％）、头孢他啶（59．6％）、哌拉西林／三唑巴坦（56．1％）和头孢毗肟（52．6％）。结论碳青霉烯类对肠杆菌科仍保持高活性，但非发酵糖菌，特别是鲍曼不动杆菌的耐药性明显增加，值得关注。对于常见的革兰阴性杆菌，美罗培南比亚胺培南的抗菌活性强4—16倍。     

全自动微生物鉴定药敏分析仪对临床相关细菌和酵母菌鉴定能力的评估

目的评估Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定药敏分析仪对临床相关细菌和酵母菌的鉴定能力。方法选取本院185株临床菌株（革兰阳性菌69株，革兰阴性菌66株，酵母菌50株）和50株本实验室保存的参考菌株（革兰阳性菌和革兰阴性菌各25株）为评估菌株，采用Vitek 2 Compact GP卡、GN卡和YST卡进行鉴定，其结果与参考方法API鉴定结果进行对照，所有低分辨及属对种错鉴定菌株均进行重复鉴定。结果在93株革兰阳性菌中有85株（91．加％）得到正确鉴定，其中5株（5．38％）为低分辨鉴定，另有8株（8．60％）为属对种错鉴定，90％的革兰阳性菌的鉴定在7h以内完成。在91株革兰阴性菌中90株（98．90％）为正确鉴定，其中5株（4．4％）为低分辨鉴定，仅1株（1．1％）为属对种错鉴定，90％以上肠杆菌科菌的鉴定在5h以内完成，90％以上非发酵糖菌的鉴定则在10h内完成。在50株酵母菌中46株（92％）为正确鉴定，其中8株（16％）为低分辨鉴定，另有4株（8％）为属对种错鉴定，45株（90％）在18．25h完成鉴定，5株（10％）在18．50h完成鉴定。结论Vitek 2 Compact能够对临床相关细菌和酵母菌进行可信的鉴定，并能大幅缩短常规鉴定时间，是临床微生物实验室病原菌诊断的有力工具。     

16层螺旋CT冠状动脉造影技术的探讨

目的:探讨16层螺旋CT冠状动脉造影技术。方法:244例受检者行MSCT冠状动脉造影检查,采用多种方法进行图像后处理,显示冠状动脉各主要分支。结果:心率≤70次/min,三支冠状动脉显示较好,图像质量基本满足诊断要求。结论:心率≤70次/min且心律平稳,使用合适的扫描参数及重建相位窗,MSCT可满意显示冠状动脉及分支。     

2012年北京协和医院细菌耐药性监测

目的了解北京协和医院2012年临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法共收集6662侏非重复的细菌,采用纸片扩散法或自动化仪器法进行药敏试验,结果按cLSI2012年版标准判读,采用WHONET5．6软件进行数据分析。结果6662株非重复的细菌中革兰阴性菌4446株,占66．7％,革兰阳性菌2216株,占33．3％。耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为39．9％和73．4％。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌属。发现少数对万古霉素和替考拉宁耐药的粪肠球菌和屎肠球菌,未发现对利奈唑胺耐药的肠球菌属。产ESBI．S的大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌的检出率分别为53．0％、25．7％和27．0％。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,总耐药率为1．1％～2．6％。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为20．3％和13．6％。鲍曼不动杆菌对上述2种抗菌药物的耐药率分别为72．8％和75．2％。泛耐药鲍曼不动杆菌的检出率为43．5％（330／759）。结论细菌对抗菌药物的耐药性呈增高趋势,特别是泛耐药的鲍曼不动杆菌,应采取有效的医院感染防控措施和合理使用抗菌药物。     

第320例--发热、左下肢皮肤温度低、二尖瓣赘生物

病历摘要 患者男,39岁.因"发热4个月余"于2004年7月21日入院.患者于2004年3月17日劳累后出现发热,最初为间歇性午后发热,体温最高40.5℃,伴有畏寒、寒战.给予静脉点滴青霉素、清开灵,口服阿莫西林、牛黄解毒胶囊等治疗,体温正常1～5 d后,发热反复.2004年4月查WBC(7.5～12)×109/L,中性0.724～0.902,Hb 121～154 g/L,ALT 80 U/L,总胆红素(TBil) 84 μmol/L,直接胆红素(DBil) 6.3 μmol/L.腹部B超检查结果:"肝硬化,右肝胆管多发结石,脾增大";超声心动图(UCG)发现"二尖瓣、主动脉瓣狭窄伴关闭不全,三尖瓣、肺动脉瓣轻度关闭不全,右室、左房稍大".     

医院获得性菌血症85例危险因素和预后分析

目的　研究产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)大肠杆菌和肺炎克雷伯菌所致院内菌血症的危险因素及其对病人预后的影响。方法　回顾性分析北京协和医院 85例由大肠杆菌或肺炎克雷伯菌所致院内菌血症病人。评价预后的主要指标为住院病死率。结果　 85例病人中 2 3例为ESBL阳性。近期应用第 3代头孢菌素是产ESBL菌菌血症的独立危险因素。抗生素治疗失败是影响住院病死率的独立危险因素。不适当抗生素治疗可能导致病死率明显升高。结论　谨慎使用头孢菌素 ,特别是第 3代头孢菌素能够降低产ESBL大肠杆菌或肺炎克雷伯菌菌血症的发生率 ,并且能够改善病人预后     

氟康唑体外抗菌活性及五种体外敏感试验方法的比较

目的 对比研究五种酵母菌体外药敏试验方法在测定氟康唑对酵母菌的体外活性检测上的可靠性及实用性。方法 分别应用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）M27-A常量肉汤稀释法、微量肉汤稀释法，NCCLS及ROSCO纸片扩散法、浓度梯度法测定氟康唑对155株临床分离的酵母菌及4株质控菌株的体外活性。采用WHONET-5软件及SPSS软件对结果进行分析，比较各种药敏试验方法与M27-A常量肉汤稀释法的相关性。结果 4种体外药敏试验方法所得结果分别同M27-A常量肉汤稀释法进行比较，浓度梯度法一致率为83．9％，NCCLSM44-P纸片扩散法一致率83．1％，ROSCO纸片扩散法一致率为78．1％，微量肉汤稀释法一致率为93．5％。结论 5种酵母菌体外药敏试验方法在检测氟康唑对临床常见酵母菌的体外活性检测上存在一定的差异，本次试验结果表明，微量肉汤稀释法与NCCLSM27-A常量肉汤稀释法的一致性最佳，其方法结果准确可靠、重复件好．活用于常规下作。