幽门螺杆菌对胃癌细胞中钙调蛋白基因启动子区去甲基化的诱导作用

目的:探讨钙调蛋白(CaM)基因在胃癌组织中的表达及其启动子区甲基化水平与幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)感染的关系.方法:用实时荧光定量PCR法分别检测30例胃癌组织、癌周组织及转移淋巴结组织中CaM基因的表达量,并分析其表达量与H.pylori感染的关系.体外建立H.pylori感染胃癌细胞的实验模型和H.pylori细胞毒素相关蛋白A(cagA)基因稳定转染胃癌细胞的实验模型,以未处理的胃癌细胞为对照,用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测实验模型细胞中CaM基因启动子区甲基化水平.结果:胃癌组织中CaM基因的表达量是癌周组织的2.08倍(P<0.05);H.pylori感染组中CaM基因的表达量是无H.pylori感染组的6.11倍(P<0.01),H.pylori及其毒素蛋白CagA可引起CaM基因启动子区-276位点发生去甲基化修饰.结论:H.pylori感染通过所分泌的毒力因子CagA诱导胃癌细胞中CaM基因启动子区去甲基化修饰,从而上调胃癌组织中CaM基因的表达.     

贵州三都水族β-地中海贫血筛查及基因分析

目的 了解贵州省三都水族β-地中海贫血的发病率、基因突变类型及分布特点，进一步从分子水平揭示β-地中海贫血多态性。方法 采用“红细胞休克一管定量法”测定红细胞脆性，乙酸纤维素薄膜电泳分离测定HbA2，一分钟碱变性法测定HbF。对贵州省三都水族自治县1090例当地水族居民，进行β-地中海贫血血液学筛查。用常规酚一氯仿抽提法提取β-地中海贫血携带者DNA，经PCR-反向点杂交法对B珠蛋白基因进行突变分析。结果 在受检的1090人中，共检出β-地中海贫血携带者49例，检出率为4．50％，男性26例，女性23例，男女比值为1．1：1。经基因分析该地人群的β-地中海贫血基因突变类型主要为CD41-42(TCTT)移码突变(20例，40．82％)和CD17(A→T)无义突变(20例，40．82％)，尚有9例(18．36％)不在中国人常见的16种β-地中海贫血突变范围内，待测序。结论 贵州省三都地区水族人群中β-地中海贫血有较高的发生率，且其基因突变类型有明显的地区差异和显著的民族特点，是我国一个较为特殊的β-地中海贫血分布区域。     

DSA应用于头颈部血管疾病中的诊断价值分析

目的:探讨分析在诊断头颈部血管疾病中使用数字减影血管造影(DSA)的临床效果。方法:选取就诊并确诊的头颈部血管疾病患者89例,对89例患者分别进行DSA与磁共振血管造影(MRA)的检查,并对检查的结果进行比较。结果:在血管狭窄闭塞性疾病中,MRA检出25例,检出率为89.29%,DSA检出26例,检出率为92.86%;在血管畸形患者中,MRA检出11例,检出率为68.75%,DSA检出14例,检出率为87.50%;在动脉瘤患者中,MRA检出38例,检出率为84.44%,DSA检出41例,检出率为91.11%。结论:在头颈部血管疾病的诊断中使用DSA的栓出率较MRA的检出率要稍高,两者在头颈部血管疾病诊断中各有各的优势,在临床上要根据患者的具体情况采取相应的检查方法。     

贵州省黔西县彝族健康人群HBV感染血清流行病学调查

目的 :了解贵州省黔西县彝族乙型肝炎病毒 (HBV)感染状况。方法 :采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)进行HBV标志物的检测和分析。结果 :10 6例彝族人标本中 ,检出HBV感染 6 2人 ,感染率高达 5 8 5 % ,其中男性感染率为 70 2 % ,女性感染率为 4 9 15 % ,男性显著高于女性 (P <0 0 5 ) ,HBV各项阳性率男性均稍高于女性 ,但经 χ2 检验 (P >0 .0 5 )无统计学意义。结论 :彝族人群中HBV感染率高于全国 5省平均水平 (42 2 6 % ) ,亦高于我省罗甸县农村健康人群HBV感染率 (5 4 4 4 % )。     

贵州省荔波县三个民族八项血液学指标分析

目的 对贵州省荔波瑶族、布依族及汉族进行血液学指标抽样调查分析,了解该地区少数民族健康状况。方法 抽取受检者静脉血,采用自动血细胞分析仪进行WBC、RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW等8项血液学指标检查。结果 在当地的三个民族中共有941人受检,其8项血液学指标均值基本在正常范围内,但感染人数有很高比例,各民族WBC增高所占比例均大于10％。RBC、HGB及HCT降低者比例不高,但增高者占相当比例,RBC为33．16％～56．06％,HGB为9．39～25．35％,HCT为33．7％～41．51％。但MCH及MCHC值降低者比例较高,MCH为5．47％～49．22％,MCHC为38．67％～86．46％。结论 通过此次血液学指标抽样检查,可初步反映当地瑶族、布依族、汉族的身体健康状况。感染和贫血情况在少数民族人群中较多见。     

适用于天麻AFLP分析用的DNA提取及纯化方法

扩增片段多态性(amplified fragment length polymorphisms,AFLP)是上世纪90年代发展起来的一种检测DNA多态性的新方法,其基本原理是选择性扩增基因组DNA的酶切片段,由于不同材料的DNA酶切片段存在差异,因而便产生了扩增产物的多态性.     

天麻ITS序列的聚合酶链反应扩增

目的:为天麻核糖体DNA中的内转录间隔区(internal transcribed spacer ,ITS)序列分析提供可靠、特异的聚合酶链反应(PCR)条件.方法:选择ITS序列通用引物对天麻ITS序列进行PCR扩增,对一系列PCR条件参数进行摸索,同时对PCR产物进行纯化后直接测序.结果:天麻ITS序列PCR扩增产物约为750 bp,不同来源样本存在有一定的差异.经测序后与Genebank中相关序列比对,天麻ITS序列总长度为598 bp,其中ITS1为235 bp,ITS2为209 bp,5.8S为154 bp,G C(%)为52%.结论:扩增天麻ITS序列的PCR反应条件可以得到可靠、特异的结果.     

贵州省部分少数民族线粒体DNA 9bp序列缺失频率研究

目的: 研究中国贵州省部分少数民族线粒体DNA 9 bp 序列缺失情况.方法: 采用PCR法扩增线粒体基因组细胞色素氧化酶II和tRNAlys基因间非编码序列中含9bp序列缺失的片段,3%琼脂糖凝胶电泳检测缺失情况.结果: 各少数民族线粒体DNA 9 bp序列缺失频率为7.4%～23.4%,最低为银屏壮族,最高为沙井苗族.结论: 贵州省部分少数民族线粒体DNA 9bp 序列缺失频率较高,各民族DNA 9 bp序列缺失频率有一定差异.     

β—地中海盆血患者血脂及载脂蛋白分析

目的：观察β－地中海贫血患者血脂（TC、TG、HDL－C、LP（a)）及载脂蛋白（APOAI、APOB100）与健康人之间的变化情况。方法：采用酶法和免疫化学法对20例β－地中海贫血的患者和20例性别相同,年龄一致的健康人的血脂及载脂蛋白进行了测定。结果：除了APOAI值增高,差异具有显著意义（P＜0．05）外,其他各项指标（TC、TG、HDL－C、LP（a）、APOB100）与健康人比较均差异无显著意义（P＞0．05）。结论：提示可能β－地中海贫血患者APOAI增高具有抗动脉粥样硬化的血脂优势。     

β-地中海贫血患者血脂及载脂蛋白分析

目的观察 β 地中海贫血患者血脂 (TC、TG、HDL C、LP(a) )及载脂蛋白 (APOAI、APOB10 0 )与健康人之间的变化情况。方法采用酶法和免疫化学法对 2 0例 β 地中海贫血的患者和 2 0例性别相同 ,年龄一致的健康人的血脂及载脂蛋白进行了测定。结果除了APOAI值增高 ,差异具有显著意义 (P <0 0 5 )外 ,其他各项指标 (TC、TG、HDL C、LP(a)、APOB10 0 )与健康人比较均差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论提示可能 β 地中海贫血患者APOAI增高具有抗动脉粥样硬化的血脂优势。