应用细菌人工染色体技术体外繁殖人巨细胞病毒

目的体外快速繁殖人巨细胞病毒（ HCMV）。方法用试剂盒抽提、纯化重组HCMV细菌人工染色体（BAC）,以重组HCMV细菌人工染色体（BAC-HCMV）为模板扩增UL82基因,酶切后连接至pcDNA载体,构建pcDNA-pp71重组质粒,转化感受态宿主菌,抽提及鉴定重组质粒。通过电穿孔技术将BAC-HCMV与鉴定成功的pcDNA-pp71重组质粒共转染人包皮成纤维细胞,通过多重PCR法及观察细胞病变效应、绿色荧光蛋白等方法鉴定培养后获得的HCMV。结果（1）获得pcDNA-pp71重组质粒,经PCR及双酶切后,片段大小与预期相符,进一步测序鉴定成功。（2） BAC-HCMV与pcDNA-pp71共转染人包皮成纤维细胞,出现细胞病变效应,经荧光显微镜观察可见绿色荧光。（3）以培养出的病毒DNA为模板进行多重PCR扩增,获得两条与预期大小相符的条带,鉴定HCMV体外繁殖成功。结论应用BAC技术成功在体外快速繁殖HC-MV,为HCMV研究提供实验材料,也为进一步研究HCMV分子机制奠定基础。     

正常人静态平衡姿势图影响因素的研究

目的　探讨正常人静态平衡姿势图的影响因素。方法　用平衡仪对 588例正常人进行静态平衡功能测试 ,用t检验对各年龄组性别之间的平衡参数值进行分析。用典则相关分析方法按性别分组对年龄、身高和体重与平衡姿势图的参数值进行相关分析。结果　性别之间的平衡参数值差异有统计学意义(P <0 .0 1～ 0 .0 5) ;年龄与男、女两组的平衡参数值均呈正相关 ;女性组身高与平衡参数值呈正相关 ,男性组身高与平衡参数值相关性低 ;男女两组的体重与平衡参数值均呈正相关。结论　性别和年龄影响平衡功能 ,随着年龄的增加平衡功能下降 ,36～ 50岁和 51～ 65岁的男性平衡功能较女性差 ,2 0～ 35岁和 66～ 79岁的女性平衡功能较男性差 ;随着体重增加 ,平衡功能下降 ;随着身高的增加 ,女性平衡功能下降 ,而身高对男性平衡功能影响不显著。     

中药注射液治疗冠心病心绞痛概述

临床上常用参麦注射液、刺五加注射液、灯盏花素注射液、灯盏细辛注射液、红花注射液、黄芪注射液、疏血通注射液、杏丁注射液、血塞通注射液等治疗冠心病心绞痛,本文概述了其应用及疗效.     

社区精神分裂症患者暴力行为综合风险预测模型的建立

目的:构建精神分裂症患者社区综合风险预测模型。方法:以疾病监测系统中完成随访的7944例精神分裂症患者为建模队列,并随机抽取其中20%(1603例)作为验证队列,在2018年4月收集基线资料,7月、10月收集随访数据。基于建模队列数据,用logistic回归模型分析暴力行为的影响因素。用纳入模型的危险因素系数β建立风险评分表,以AUC评价其预测能力,用验证队列验证外部预测准确性,用所建模型对建模队列患者进行风险等级划分。结果:纳入精神分裂症社区管理风险的因素有11个。建模队列AUC=0.78(95%CI:0.74-0.81),风险评分>14分提示患者处于暴力行为高风险,模型敏感度62%,特异度88%,准确度87%。经所建模型划分风险等级,其中高风险占3.2%,较高风险占11.0%,一般风险占69.2%,较低风险占16.6%。结论:基于社区监测的精神分裂症患者暴力行为综合风险模型预测能力较好,简单易行,在精神障碍防治中有一定应用价值。     

骨胶原在骨质疏松大鼠中的变化及其与骨生物力学相关性实验研究

[目的]探讨骨质疏松症骨胶原的变化及其与骨生物力学相关性。[方法]7个月龄未交配雌性SD大鼠30只,随机平分为:OVX组(卵巢切除组)和Sham组(假手术组,未切除卵巢)。术后12周处死大鼠,行第L5压缩力学实验,并测定L5羟脯氨酸(HYP)含量,同时应用m asson三色法行L5切片染色,光镜下观察胶原纤维形态学的改变。[结果]卵巢切除12周后,Sham组HYP含量(0.197±0.035)mg/g,镜下见胶原纤维排列规则,走向清晰连续性好,胶原纤维粗壮,呈致密板层样。OVX组大鼠L5HYP含量为(0.182±0.022)mg/g,镜下见胶原纤维排列稀疏紊乱,变细甚至断裂溶解,连续性差。两组HYP含量相比P<0.05。OVX组HYP变化与L5弹性模量、抗压强度及最大压缩力变化有直线相关性。[结论]卵巢切除致骨质疏松,骨胶原含量减少和质量下降。骨胶原含量下降与骨生物力学强度降低有直线相关性。骨质疏松骨折与骨胶原含量下降有关。     

乙型肝炎病毒X基因对c-met基因启动子区的调控作用

目的 明确乙型肝炎X基因(HBx)对c-met基因启动子区的调控及其在肝细胞癌侵袭和转移中的机制.方法 将HBx表达质粒转染HepG2细胞,采用Western blot方法比较转染前后HBx对原癌蛋白质c-met(c-met)表达的影响,进一步将c-met基因启动子区分成5个(包括全部序列)不同长度的片段,然后与PGL3-Basic荧光素酶报告基因系统连接构建成重组质粒,将上述质粒与HBx表达质粒共转染于HepG2细胞中,通过荧光素酶测定、启动子区突变分析及侵袭试验比较转染前后HBx对c-met表达调控的影响.荧光素酶活性值采用ANOVA单因素方差分析,侵袭细胞数统计采用t检验.结果 HBx能够增强c-met的表达;通过对c-met基因启动子区缺失分析,确定了c-met基因启动子区(-183 bp～-100 bp)是HBx作用的调控区域,进一步对该区域可能的转录因子结合位点(SP1-1、SP1-2、AP-2)进行突变分析,发现这3个结合位点均参与了HBx对c-met基因启动子区的调控.测定全部缺失构建体荧光素酶活性结果显示,-184上游部分序列缺失后对HBx的反应有轻微的降低,当-183 bp/-122 bp、-121 bp/-100 bp两个片段缺失后,启动子对HBx的反应均有明显降低,F=40.37,P<0.01;c-met启动子突变分析显示,HBx诱导的荧光素酶活性在SP-1-1、SP-1-2,AP-2突变体组中明显下降,F=235.3,P<0.01.Matrigel侵袭试验检测结果显示,转染pCEP4-X-FLAG表达质粒的HepG2细胞侵袭性增加,穿膜细胞数为(74.33±6.24)个,而未转染组穿膜细胞数为(28.24±3.05)个,t=9.68,P<0.01.结论 HBx引起肝细胞癌的侵袭转移可能是通过对c-met基因启动子区(-183 bp～-100 bp)转录因子SP-1、AP-2结合位点的调控来实现的,但是该过程中所涉及的信号通路仍有待进一步研究.     

湖州市白雀乡2005～2007年4～7岁儿童视力低常调查分析

目的:调查2005~2007年湖州市白雀乡学龄前儿童视力低常情况,为科学制定湖州市白雀乡学龄前儿童视力保健宣教措施提供理论依据。方法:2005~2007年连续3年用SLD-型标准灯箱对数视力表检测湖州市白雀乡4~7岁儿童双眼视力。结果:2005年4岁组视力低常的筛出率为5.91%,5岁组视力低常的筛出率为9.93%,6岁组视力低常的筛出率为13.27%,7岁组视力低常的筛出率为13.71%,4~7岁各组视力低常的筛出率比较差异有统计学意义(2χ=6.12,P<0.05);2006年4岁组视力低常的筛出率为5.62%,5岁组视力低常的筛出率为8.60%,6岁组视力低常的筛出率为11.26%,7岁组视力低常的筛出率为12.39%,4~7岁各组视力低常的筛出率比较差异有统计学意义(2χ=4.51,P<0.05);2007年4岁组视力低常的筛出率为4.84%,5岁组视力低常的筛出率为8.07%,6岁组视力低常的筛出率为9.68%,7岁组视力低常的筛出率10.60%,4~7岁各组视力低常的筛出率比较差异有统计学意义(2χ=4.51,P<0.05)。连续3年4~7岁男童视力低常的总筛出率为7.58%,女童为10.98%,男女视力低常筛出率比较差异有统计学意义(2χ=6.22,P<0.05)。结论:湖州市白雀乡4~7岁儿童视力低常的筛出率随着年龄的增长呈明显上升的趋势,且女童的筛出率明显高于男童。社区医生应根据不同年龄和性别制定学龄前儿童眼保健方面的宣教措施。     

恒古骨伤愈合剂联合特定电磁波治疗气滞血瘀型膝骨关节炎的多维度疗效分析

目的 多维度评估恒古骨伤愈合剂联合特定电磁波（TDP）治疗气滞血瘀型膝骨关节炎的临床疗效。方法 选取2019年7月至2021年12月于新疆维吾尔自治区第三人民医院诊治的接受保守治疗的104例气滞血瘀型膝骨关节炎患者，按照随机数表法随机分为对照组和观察组，各52例。对照组患者给予TDP治疗，观察组在对照组的基础上给予恒古骨伤愈合剂，两组患者均治疗1周，随访1月，多维度评估两组患者临床疗效。分别于治疗前和治疗后，从主观指标视觉模拟量表（VAS）评分、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎调查量表（WOMAC）评分，客观指标可视化压痛指数、可视化膝关节活动度分别对患者的疼痛和功能进行评估，并测定中医证候积分、测定血清红细胞沉降率（ESR）及高敏C反应蛋白（hs-CRP），综合评定临床总有效率。结果 两组患者基线特征及治疗前各项评分差异均无统计学意义。与本组治疗前比较，两组患者治疗后VAS评分、WOMAC评分、压痛指数、关节活动度、中医证候积分均有显著改善（P<0.01）。与对照组治疗后比较，观察组VAS评分、WOMAC评分显著降低（P<0.01）；观察组压痛指数改善程度优于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），观察组关节活动度优于对照组，但差异无统计学意义；观察组中医证候积分显著降低（P<0.01）。治疗后两组患者ESR及hs-CRP水平均显著降低，且观察组低于对照组（P<0.01）。临床疗效方面，观察组总有效率为90.4%（47/52），明显高于对照组的53.8%（28/52），差异有统计学意义（P<0.05）。两组治疗期间均未见明显不良反应。结论 恒古骨伤愈合剂联合TDP治疗气滞血瘀型膝骨关节炎的临床疗效显著，从主客观两方面均可改善膝关节疼痛和功能，并可改善中医证候量化指标，降低炎症反应，安全性高。     

消糖灵颗粒中格列苯脲的人体生物等效性

目的:建立测定人血浆中格列本脲的高效液相色谱(HPLC)法,研究中成药消糖灵颗粒中格列本脲在男性健康志愿者体内的药动学行为,评价其生物利用度和生物等效性.方法:20名健康成年男性志愿者采用随机分组自身交叉对照试验设计,单剂量口服参比制剂消糖灵胶囊(6粒,含格列苯脲4.2 mg)或试验制剂消糖灵颗粒(2袋,合格列本脲4.2 mg),用HPLC法测定血浆中药物浓度.结果:试验制剂和参比制剂的主要药动学参数tmax分别为(2.0±0.8)h和(1.8±0.6)h,Cmax分别为(100.6±26.8)μg·L-1和(114.5±28.6)μg·L-1,AUC(0-36)分别为(567.2±270.9)μg·L-1·h和(537.6±255.5)μg·L-1·h;t1/2分别为(5.3±4.8)h和(4.1±4.0)h;以AUC(0-36)计算的试验制剂的相对生物利用度为(115.7±54.9)%.结论:建立的分析方法准确灵敏,测得的数据可靠,统计学分析表明两种制剂生物等效.     

毒理学的研究进展

近年来,毒理学发展迅速,在很多领域的研究中发挥越来越重要的作用.简要介绍和讨论毒理学试验研究的新方法,包括急性毒性分级法、固定剂量试验法、固定浓度试验法等,同时对毒理学发展趋势进行了预测.此外,对外源化学物的毒作用机制、毒物低水平接触的生物效应、生物标志物等主要研究热点进行分析,探讨毒理学在食品、化妆品、药品等方面的应用.