重组人内皮抑素基因克隆及其质粒抑瘤活性的鉴定

目的：利用大肠杆菌表达系统表达重组人内皮抑素，并将其作用于小鼠宫颈癌动物模型，检测其效果。方法：采用RT－PCR方法从人胚肝中提取人内皮抑素cDNA，将其克隆入pGEM-T Easy克隆载体中；经全自动序列分析仪测序确证后，将人内皮抑素cDNA亚克隆入原真核表达载体PQE－30，构建含人内皮抑素cDNA的重组质粒；将该重组质粒注射入小鼠宫颈癌模型。结果：成功获得551bp人内皮抑素基因，测序证实序列正确。构建含人内皮抑素cDNA的重组质粒，此质粒能有效抑制肿瘤生长。结论：人内皮抑素具有抗肿瘤生长作用，为采用抗血管生成方法治疗恶性实体肿瘤的研究奠定了基础。     

重组人内皮抑素真核表达质粒抑制人宫颈癌小鼠肾包膜下移植瘤生长

目的观察人内皮抑素(Endostatin)真核表达载体pQE-30-Endo对人宫颈癌小鼠肾包膜下移植瘤生长和新生血管形成的影响。方法用PCR法从pGEM-TEasy-Endo克隆载体中扩增Endostatin全编码区cDNA，将EndostatincDNA亚克隆入真核表达载体，构建重组质粒pQE-30-Endo，转化入大肠杆菌TG。中。应用人宫颈癌小鼠肾包膜下移植瘤模型观察pQE-30-Endo对人宫颈癌小鼠肾包膜下移植瘤生长和新生血管形成抑制作用。结果成功地构建了Endostafin真核表达载体pQE-30-Endo，EndostatincDNA基因编码序列与Genbank中报道的序列-致。pQE-30-Enao(10mg，20mg／kg)显著抑制人宫颈癌小鼠肾包膜下移植瘤生长并降低其微血管密度；同时提高人宫颈癌小鼠肾包膜下移植瘤块Endostafin的表达率。结论人内皮抑素真核表达载体pQE-30-Endo显著抑制人宫颈癌小鼠肾包膜下移植瘤生长和新生血管形戍。     

紫花牡荆素对宫颈癌HeLa细胞系干细胞样细胞自我更新的影响

目的 :观察紫花牡荆素(CAS)是否能抑制HeLa细胞系宫颈癌球形成细胞即宫颈癌干细胞样细胞(CCSLCs)自我更新能力。方法:体外培养HeLa细胞系细胞。干细胞条件培养基悬浮培养得到和扩增CCSLCs。MTT法测定细胞活性,肿瘤球形成法检测自我更新能力,Western blot分析磷酸化Akt蛋白表达。结果:CAS优先抑制CCSLCs细胞活性,同时,显著抑制CCSLCs自我更新能力,呈浓度依赖性(P<0.05)。与亲本HeLa细胞系细胞比较,CCSLCs细胞磷酸化Akt表达水平增高。CAS有效地降低CCSLCs细胞磷酸化Akt蛋白表达水平。结论:CAS抑制源自HeLa细胞系CCSLCs自我更新作用与其下调细胞磷酸化Akt蛋白表达有关。     

2种人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型制备方法的比较

目的比较直接接种人卵巢癌COCl细胞和COCl细胞经体内传代后接种Balb／c—nu裸鼠皮下移植瘤模型制备方法的成瘤率。方法雌性突变系Banb／c—nu小鼠40只，分为对照组及实验组，每组20只。COCl细胞注射于裸鼠一侧背部皮下，对照组细胞培养后即接种，观察统计数据后处死，取瘤体制成单细胞悬液再接种于实验组裸鼠，比较两种不同方法接种的成瘤率，并观察成瘤时间、瘤重及肿瘤生长速度。结果实验组成瘤率为70％，对照组仅为30％。结论经过裸鼠体内传代后的COCl细胞用于制备人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型具有较高的成瘤率。     

四维彩超诊断胎儿发育异常120例分析

近几年，四维彩超应用于临床，大大提高了先天性发育异常胎儿的产前诊断率及准确性，特别降低了某些细小畸形的漏诊率。四维超声不仅可以获得胎儿立体图像，还可以跟踪胎儿运动，实时显示胎儿运动，图像质量不受胎儿运动影响；四维超声提供了6种可能的重建方向，而不同于实时处理三维超声只有一种重建方向，从而使图像采集和处理变得简化，各种重建模式相互组合可以获得更为优质的图像质量。     

腹腔镜辅助改良阴式大子宫切除术60例分析

①目的撂讨腹腔镜辅助改良阴式大子宫切除术的手术要点及其效果。②方法时60例子言增大如孕12-16周的子言肌瘤、子宫腺肌瘤、子宫肥大症患者行腹腔镜辅助改良阴式子宫切除术，并与同期54例大子宫开腹行子宫切除术进行比较。③结果58例手术成劝，2例中转开腹，成功率96．7％。与开腹组比较，手术时间、术中出血无显著性差异。术后疼痛轻，术后肛门排气快，术后病率低，住院时间短。④结论腹腔镜辅助改良阴式大子宫切除术创伤小，干扰少，恢复快，手术成功的关键在于术者的经验和技术。     

金粉蕨素体外抗人卵巢癌作用研究

目的探讨金粉蕨素抗人卵巢癌（COCI）细胞系细胞作用及机制。方法MTT比色法测定金粉蕨素对COC1、顺铂耐药亚株COC1／DDP及中国仓鼠卵巢（CHO—K1）细胞系细胞增殖的影响；PI染色流式细胞术（FCM）分析金粉蕨素时COC1、顿铂耐药亚株COC1／DDP及中国他鼠卵巢（CHO—KI）细胞系细胞凋亡和细胞周期的影响。结果金粉蕨素对COC1、COC1／DDP细胞生长具有抑制作用呈剂量-效应和时间-效应关系，PI染色FCM分析发现金粉蕨素明显使COC1细胞周期停滞于G1期（G1期细胞百分数由50．3％上升到70．6％，P〈0．05）。结论金粉蕨素具有体外抗人卵巢癌（COC1）细胞系知胞作用。其机制可能与细胞周期G1期阻滞有关。