复方黄芪颗粒治疗HIV感染者24周的疗效和安全性评价

目的在中国中医药研究院的新药开发研究工作基础上,对未经抗病毒治疗的人免疫缺陷病毒（HIV）感染者进行24周口服中药复方黄芪颗粒治疗,初步评价其有效性和安全性。 方法22例HIV感染者服用复方黄芪颗粒治疗24周,于0、24周检测HIV RNA病毒载量,0、8、24周检测CD4+、CD8+细胞及细胞因子,0、8、16、24周记录临床症状积分以及血常规、肝肾功能等实验室指标,同时记录治疗期间发生的不良事件。结果治疗24周,CD4+细胞数较基线值（0周）平均上升22/μL（t=2.08,P＝0.03）;细胞因子白细胞介素（IL） 2和干扰素（IFN） γ较基线值分别平均上升7.29 pg/mL和3.82 pg/mL（分别t＝3.46,P＝0.00;t＝5.94,P＝0.00）, IL 4下降3.71 pg/mL（t=8.18,P＝0.00）; HIV RNA较基线值平均下降0.40 lg 拷贝/mL（t=2.65,P＝0.02）;体重上升＞2 kg者6例,增减未超过2 kg者10例,患者体重评分有效率72.73%;血常规、肝肾功能等结果均在正常范围内;未观察到不良事件。结论中药复方黄芪颗粒可提高HIV感染者CD4+细胞数, 对HIV复制有一定抑制作用,具有一定免疫调节作用;可以显著改善HIV感染者的临床症状,使患者体重增加,无明显毒副作用。     

HIV/AIDS患者抗病毒治疗后γ链细胞因子的变化及其意义

目的观察γ链细胞因子在艾滋病病毒（HIV）感染者/艾滋病（AIDS）病人（HIV/AIDS病人）和正常人表达水平的区别,及其在24个月的高效抗反转录病毒治疗（HAART）治疗中的动态变化,分析其与抗病毒治疗的关系及其临床意义。方法 40名HIV/AIDS病人在初次HAART治疗的0、6、12、18和24个月进行回访,另35名正常人作为对照,均采集外周血,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测常见的γ链细胞因子[白细胞介素2、4、7、15、21（IL-2、IL-4、IL-7、IL-15、IL-21）和γ干扰素（IFN-γ）],同时使用流式细胞计数法测定CD4＋T和CD8＋T淋巴细胞数量,实时反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定血清中HIV核糖核酸（RNA）水平。结果未经抗病毒治疗的HIV/AIDS病人外周血IL-2、IL-15、IL-21和IFN-γ水平显著低于正常人,而IL-4和IL-7水平显著高于正常人。在启动HAART后的各次回访中,随着外周血HIV RNA病毒载量水平和CD8＋T淋巴细胞数量的逐渐下降和CD4＋T淋巴细胞数量的显著增加,IL-2、IL-15、IL-21和IFN-γ水平也逐步上升,而IL-4和IL-7水平逐步下降,显示出一定的相关关系。结论这些常见的γ链细胞因子可能和HIV感染的致病机制相关,并可能参与了抗病毒免疫重建和病毒控制过程     

禽流感病毒H5N1血凝素蛋白的细胞膜上提纯和结晶

目的从细胞膜上提纯禽流感病毒H5N1的血凝素蛋白H51151F和H51151F＋A134V＋E186D,并使蛋白结晶。方法细胞内大量增殖重组牛痘病毒,去垢剂提取细胞膜中的HA蛋白,连续蔗糖密度梯度超速离心,Western印迹检测,菠萝蛋白酶等裂解HA,离子交换层析,SDS—PAGE电泳并染色检测蛋白纯度,坐滴气象扩散法结晶。结果从细胞膜中提取了高纯度的血凝素蛋白H51151F和H51151F＋A134V＋E186D,并得到了H51151F蛋白晶体。结论首次获得了禽流感病毒H5N1的I-IS1151F蛋白晶体,为进一步研究禽流感病毒人传人的可能性打下基础。     

禽流感病毒H5N1血凝素蛋白的重组牛痘病毒表达

目的研究H5 I151F和H5 I151F＋A134V＋E186D两种氨基酸变异对血凝素蛋白（HA）亲人受体结合的影响,并获得该HA。方法构建载体pRB21’,共感染／转染vp37^-牛痘病毒vRB12和pRB21’,基因同源重组牛痘病毒表达HA,Western免疫印迹法鉴定。结果获得了克隆有H5HA全长基因片段的载体pRB21’,构建了2种重组牛痘病毒re-VV H5 I151F和re-VV H5 I151F＋A134V＋E186D,且能在被感染细胞膜表达这两种HA。结论首次通过构建重组牛痘病毒成功表达了禽流感病毒H5N1的H5HA,为进一步研究禽流感病毒人传人的可能性奠定了基础。     

中国HIV感染者IL-2和IL-7参与高效抗反转录病毒治疗的抗病毒免疫反应及其在病毒控制中的作用

目的观察中国HIV-1感染者在高效抗反转录病毒治疗（Highly active antiretroviral therapy,HAART）中,外周血HIV-1RNA、CD4＋T淋巴细胞数量和IL-2、IL-7的相关关系,探讨这些^y链细胞因子与抗HIV病毒免疫应答及其在病毒控制中的作用。方法2009年6月至2010年12月,35椤iI接受初次HAART的慢性HIV-1感染者被纳入本研究并随访48周,检测HAART治疗0、24、48周时的外周血HIV．1RNA定量、CD4＋T淋巴细胞数、IL-2以及IL-7水平,并分析其相关性。结果35例HIV．AIDS在HAART治疗前的IL-2水平[（9．67±2．6）pg／ml]明显低于正常对照值[（27．36±5．05）pg／ml],在经过48周治疗后显著升高[（19．8±3．3）pg／ml],而在HAART治疗前的IL-7水平[（81．74±20．47）pg／ml]明显高于正常对照值[（2．06±1．52）pg／ml],在48周治疗后则显著降低[（8．36±2．16）pg／ml]。IL-2水平在HAART的0、48周与CD4＋细胞计数呈相同变化趋势但相关性不明显（O周：R=0．21,P=0．063;48周：R=0．19,P=0．103）,24周呈正相关（R=0．24,P=0．033）,而IL-7水平在HAART的0周与CD4＋细胞计数呈负相关（R=-0．28,P=0．012）,在24、48周无相关。IL-2水平和HIVRNA病毒载量呈负相关（R=-0．17,P=0．032）,而IL-7水平和HIV RNA病毒载量关系不明显（P=0．76）。结论48周HAART治疗中IL-2和IL-7水平均有明显变化。与CD4＋T细胞计数变化密切相关,与外周血HIV RNA水平有一定关系。提示这些细胞因子在免疫重建和病毒控制中起重要作用。     

经长期HAART治疗的中国HIV—AIDS患者外周血细胞内HIV-1前病毒DNA的检测及其意义

目的探索NK细胞是否是HIV-1病毒的储存库细胞之一,并观察在长期HAART治疗后,T淋巴细胞及单核细胞内是否仍有HIV-1前病毒DNA存在。方法对15例规范接受HAART治疗4～7年的HIV—AIDS患者采集血标本进行横断面研究。使用磁珠分选法从外周血单个核细胞（PBMC）中分离出T淋巴细胞、单核细胞和NK细胞,通过HIV实时荧光定量检测外周血HIV-1RNA病毒载量和NK细胞、单核细胞、T淋巴细胞内的HIV-1 DNA水平,流式细胞术检测外周CD4＋T细胞数量,对数据进行统计学处理。结果15例接受4～7年[平均（62．45±13．53）个月]HAART治疗的HIV／AIDS患者外周血HIV-1RNA均低于检测下限（〈50拷贝／ml）;T淋巴细胞、NK细胞中和单核细胞中HIV-1前病毒DNA的平均含量分别为2．03±0．48、1．82±0．32和1．754-0．19（10g10拷贝／10。个细胞）;3种细胞中HIV-1DNA阳性（〉50拷贝／m1）者比例分别为6／15、4／15、2／15。结论中国HIV-1感染者外周血中除了T淋巴细胞和单核细胞外,NK细胞也可能是HIV-1的病毒储存库之一。在长期HAART治疗（4～7年）后,尽管表现出明显的抗病毒效果和免疫重建效果,仍然未能彻底清除NK细胞、T淋巴细胞和单核细胞中的HIV-1前病毒DNA。     

HAART治疗1年对HIV/AIDS患者免疫重建效果观察

目的研究高效抗反转录病毒治疗（HAART）1年,对HIV/AIDS患者免疫重建效果的影响。方法确认人免疫缺陷病毒(HIV)感染者35例,检测CD4+T淋巴细胞<350/μL,开始HAART治疗,并于治疗0、6、12个月时分别检测其病毒载量及CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4+童贞细胞、CD4+记忆细胞、CD8+激活细胞计数。结果治疗前,HIV RNA处于高复制水平,平均(4.62±1.09)×106copies/mL,HAART治疗6个月及12个月时均低于检测下限。患者的CD4+T淋巴细胞、CD4+童贞细胞和CD4+记忆细胞均明显增加,12个月时,各组细胞计数［分别为(312±109.22) /μL、（150±57.34）/μL、（212±48.06）/μL］与基线［分别为（183±83.73）/μL、（73±20.40）/μL、（119±30.42）/μL］比较,差异有统计学意义(P<0.01),但仍低于健康对照组 ［分别为（768±146.41）/μL、（424±87.06）/μL、（442±61.40）/μL］（P<0.05）;CD8+T淋巴细胞计数（427±99.79）/μL较基线（597±111.43）/μL明显下降（P<0.05）,但仍高于健康对照组（208±37.39）/μL（P<0.05）。结论HAART能快速抑制HIV复制,治疗1年能部分恢复HIV/AIDS患者免疫功能。     

湖南艾滋病患者Th17和Tr细胞及IL-17在抗病毒治疗过程中的变化

目的 观察HIV感染者和AIDS患者血IL-17、CD3+CD4+IL-17+细胞(Th17细胞)和CD4+CD25+Foxp3+T细胞(Tr细胞)的平衡状态及其在1年高效抗反转录病毒治疗(HAART)中的变化.方法 选取经HAART治疗的HIV/AIDS患者33例,同时选取33例健康志愿者为对照,分别于治疗0、6、12个月采集静脉血,检测血清IL-17水平、Th17细胞及Tr细胞百分比,并对比分析其相互关系.结果 HIV/AIDS在HAART治疗前、治疗6个月、12个月及健康对照外周血的Th17细胞在CD4+T细胞中的比例分别为(1.20±0.37)%、(2.50±1.03)%、(3.70±1.56)%和(4.70±1.43)%;Tr细胞在CD4+T细胞中的比例分别为(9.16±3.33)%、(7.19±2.91)%、(5.53±1.88)%和(4.43±0.97)%;血清IL-17水平分别为(5.3±2.5) pg/ml、(7.7±2.4) pg/ml、(10.4±3.1) pg/ml和(17.7±6.6) pg/ml.Th17细胞水平与CD4+T细胞计数正相关,与病毒载量负相关;Tr细胞水平与CD4+T细胞计数负相关,与病毒载量正相关.结论 HIV感染导致IL-17、Th17细胞和Tr细胞的失平衡,而HAART治疗可能逐渐恢复二者的免疫平衡状态.提示三者可能在艾滋病发病机制中起作用,并有可能成为观察艾滋病进展和HAART治疗效果的有效指标.

Abstract：

Objective To observe the Th17, IL-17 and Tr cells equilibrium state as well as their changes of HIV infected or AIDS suffered patients in one-year HAART treatment. Methods Select 33 HIV/AIDS patients received HAART treatment while 33 healthy volunteers as controls. Flow cytometry was used to analyze Th17 and Tr cells in venous blood at the time of pre-therapy, 6th, 12th month when IL-17 levels in serum are tested by ELISA. Results The ratio of Th17 cells in CD4 cells in HIV/AIDS patients and volunteers were (1.20±0.37)%, (2.50±1.03)%, (3.70±1.56)%, (4.70±1.43)%, respectively; The ratio of Tr cells were (9.16±3.33)%, (7.19±2.91)%, (5.53±1.88)%, (4.43±0.97)%, respectively; The levels of IL-17 in serum were (5.3±2.5) pg/ml, (7.7±2.4) pg/ml, (10.4±3.1) pg/ml, (17.7±6.6) pg/ml respectively. The Th17 cells' level was positively correlative with the amount of CD4 cells, negatively correlate with the count of viral load. However, the Tr cells level is positively correlative with the count of viral load, negatively relate to the quantity of CD4 cells. Conclusion HIV could make IL-17, Th17 cells and Tr cells lost their balance, but the immune equilibrium state may gradually recover after HAART treatment. Which indicates the IL-17, Th17 cells and Treg cells may play an important role in the pathogenesis of AIDS, and they are likely to be the effective indexes to observe the progress of AIDS and the treatment effect of highly active antiretroviral therapy(HAART).     

外周血炎症因子和T淋巴细胞激活在抗人类免疫缺陷病毒感染治疗中的变化

目的探索人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)感染/艾滋病患者外周血炎症因子和T淋巴细胞激活在抗HIV治疗中的变化。方法选取2017年1月至2019年12月在长沙中南大学湘雅二医院感染科门诊接受抗反转录病毒治疗(anti-retroviral therapy, ART)的HIV感染/艾滋病患者共206例, 为HIV感染组, 定期随访并收集治疗前, 治疗后6、12、24个月的血液标本;另选取同期进行体格检查者52名, 为健康对照组, 留取血液标本。采用酶联免疫吸附试验检测血浆白细胞介素(interleukin, IL)-6、超敏C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α。以流式细胞术检测外周血CD3+CD4+T淋巴细胞计数、外周血单个核细胞中CD4+CD38+和CD8+CD38+T淋巴细胞百分比。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血浆HIV RNA载量。统计学方法采用配对t检验和皮尔逊相关分析。结果 HIV感染组治疗前血浆IL-6、超敏CRP和TNF...