端粒酶反转录酶在体外培养的内皮祖细胞中的表达

目的 探讨体外培养的大鼠内皮祖细胞增殖活性与端粒酶反转录酶表达的关系。 方法 原代培养大鼠骨髓源性内皮祖细胞。在培养7、14、21和28 d时,用MTT法检测内皮祖细胞在不同时间点的增殖活性;流式细胞术检测内皮祖细胞早期凋亡率;免疫细胞化学方法、RT-PCR和Western印迹技术检测内皮祖细胞端粒酶反转录酶mRNA和蛋白表达的变化。 结果 大鼠骨髓单个核细胞可以被诱导成内皮祖细胞。内皮祖细胞增殖活性随着培养时间的延长呈现单峰曲线,在培养14 d时增殖活性最高（P < 0.01）。内皮祖细胞凋亡率随培养时间的延长而增加,在培养7 d、14 d、21 d和28 d时分别为0.28%、0.66%、1.38%、1.52%;衰老率分别为3.04%、20.28%、24.36%、16.52%,14 d 内皮祖细胞衰老率显著增加 （P < 0.01）,21 d衰老率最高,但二者之间差异无统计学意义。端粒酶反转录酶mRNA和蛋白表达呈单峰曲线,在培养14 d时表达最高,以后表达随培养时间的延长逐渐降低（P < 0.05）。 结论 大鼠骨髓内皮祖细胞增殖活性下降可能与端粒酶反转录酶活性下降有关。     

新生儿Wiskott-Aldrich综合征1例

Wiskott-Aldrich综合征(WAS)又称湿疹-血小板减少伴免疫缺陷病,自1937年和1954年Wiskott和Aldrich分别报道以来,全球各地均有发生,北欧发病率为1/100 000,日本为1/200 000[1].     

牛初乳短链胰岛素样生长因子1对肾病大鼠血脂、脂代谢酶及载脂蛋白的影响

高脂血症是原发性肾病综合征的主要临床表现,并可影响肾病综合征的发生、发展,促进肾小球硬化,最终导致慢性肾功能衰竭,降脂治疗有助于预防或逆转肾小球硬化的发生.     

儿茶素拮抗过氧化氢诱导的大鼠内皮祖细胞凋亡

目的：观察过氧化氢（H2O2）对大鼠骨髓来源内皮祖细胞（EPCs）增殖及凋亡的影响及儿茶素对H2O2诱导细胞凋亡的的拮抗作用。方法：免疫荧光法检测EPCs表面标志CD34,CD133和血管内皮生长因子受体-2（VEGFR-2）的表达;将第2代EPCs分为空白对照组、H2O2组和儿茶素-H2O2组,干预后常规提取DNA琼脂糖电泳观察细胞凋亡梯带的形成;MTT法检测细胞增殖率的变化。结果：①骨髓单个核细胞培养10 d后均表达CD34,VEGFR-2和CD133抗原;②干预1 d后,3组细胞均未出现明显的DNA凋亡梯带;2 d后,H2O2组出现明显细胞凋亡DNA梯带;3 d后,H2O2组和儿茶素- H2O2组均出现明显的细胞凋亡DNA梯带,H2O2组凋亡DNA梯带数量、灰度强于儿茶素-H2O2干预组;③与对照组相比,H2O2组、H2O2-儿茶素组EPCs增殖活性明显下降（P<0.01）;在H2O2组和H2O2-儿茶素组组内EPCs增殖活性第1天和第3天细胞增殖活性明显高于第2天细胞增殖活性（均P<0.05）;H2O2组-儿茶素组细胞增殖活性在3个不同时间点显著高于同一时间点H2O2组细胞增殖活性。结论：H2O2可以降低EPCs增殖活性,诱导其凋亡;儿茶素可以增强EPCs对H2O2 的抵抗力,减少细胞凋亡。［中国当代儿科杂志,2009,11（1）：61-64］     

pRb的磷酸化状态在肾小球系膜细胞增生和凋亡中的作用

目的：探讨视网膜母细胞瘤敏感基因蛋白（Rb蛋白）的磷酸化状态对大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增生和凋亡的影响。方法：将大鼠GMCs分为脂多糖（LPS）组、对照组、维生素（VitE）组、激素组与激素＋VitE组共5组分瓶培养,后3组加LPS诱导。实验末,收集培养细胞,涂片,应用免疫组化法检测GMCs的增生细胞核抗原（PCNA）、去磷酸化Rb蛋白（Rb）、磷酸化Rb蛋白（pRb）阳性表达率,TUNEL法检测GMCs凋亡指数（AI）。结果：VitE组、激素组、VitE＋激素组培养细胞PCNA阳性率均低于LPS组,VitE＋激素组培养细胞PCNA阳性率明显低于激素组。VitE组、激素组、VitE＋激素组培养细胞凋亡指数均高于LPS组,VitE＋激素组培养细胞凋亡指数明显高于激素组。VitE组、激素组、VitE＋激素组培养细胞Rb阳性率均低于LPS组,VitE＋激素组培养细胞Rb阳性率明显低于激素组。VitE组、激素组、VitE＋激素组培养细胞pRb阳性率均低于LPS组,VitE＋激素组培养细胞pRb阳性率均低于激素组。PCNA细胞阳性率与pRb阳性细胞率、Rb阳性细胞率均成正相关;AI与pRb阳性细胞率、Rb阳性细胞率均成负相关。结论：去磷酸化和磷酸化Rb蛋白表达水平增加均促进了肾脏系膜细胞的异常增生,抑制异常增生的系膜细胞凋亡,促进肾脏病的慢性进展。     

儿童紫癜性肾炎肾组织Th1/Th2比值与肾脏微血管损伤的关系

目的：探讨儿童紫癜性肾炎（HSPN）肾组织Th1/Th2比值与肾脏微血管损伤的关系。方法：选取32名HSPN患儿为病例组,根据肾脏病理结果分为4个亚组：HSPN Ⅱ级（n=8）,Ⅲa级（n=7）,Ⅲb级（n=10）及Ⅵ/Ⅴ级（n=7）。5例因肾外伤切除肾组织患者为对照组。免疫组化法检测肾组织INFγ（标记Th1细胞）、IL-4（标记Th2细胞）及CD34（标记微血管）的表达,并进行微血管评分,计算微血管密度（MVD）,分析肾脏INFγ、IL-4表达与肾脏病理分级、肾脏微血管评分和MVD之间的关系。结果：与对照组相比,病例组肾组织INFγ表达降低,IL-4表达升高,Th1/Th2比值随着HSPN病理损伤的加重而减小,各级间差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较,HSPNⅡ级和Ⅲa 级组MVD显著增加,但Ⅳ/Ⅴ级组MVD显著减少（P<0.05）。与对照组和HSPNⅡ级组比较,HSPNⅢa级、Ⅲb级以及Ⅳ/Ⅴ级组肾脏微血管评分明显增加,且随病理分级的增加,肾脏微血管评分逐渐增加,各级间差异有统计学意义（P<0.05）。肾组织Th1/Th2比值与微血管密度变化呈负相关（r=-0.921,P<0.01）。结论：Th1/Th2比值降低可能参与了HSPN肾脏微血管损伤。     

乙型肝炎病毒相关性肾炎患儿的肝脏病变

目的：乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBVGN)是我国常见的继发性肾小球疾病之一,以往人们只关心HBVGN时肾脏病变的问题,对无明显肝脏临床症状的“病毒携带者”或轻微的临床患者的肝脏的情况没有引起注意。该文探讨HBVGN时肝脏的病理变化。方法：选择13例HBVGN患儿同时进行肝肾病理活检。结果：13例患儿均有肝组织不同程度的受累,主要以轻度肝脏病理改变为主(9/13,占69.2%),HBV抗原在肝组织中主要以HBsAg检出率为高(10/13例,占76.9%);肾病理改变以膜性肾病为主(9/13,占69.2%),其次为系膜增生性肾炎(4/13例,占30.8%),HBV抗原在肾组织HBsAg和HBcAg的检出率均达100%,几乎所有的肾小管间质中有HBV抗原成分的分布。肝组织与肾组织中同时出现HBcAg的有4例。结论：HBVGN患儿均有不同程度的肝损害,而肾及肝组织病理改变不一定呈平行关系,肝组织与肾组织中同时出现HBcAg时肝肾同时损害均较重。提示对于HBVGN患者要重视肝肾同治。