宫内慢性缺氧对子代大鼠Cx26表达及内耳发育改变的研究

目的探讨SD大鼠孕期宫内慢性缺氧(CIH)后,其子代大鼠(简称为子鼠)内耳Cx26表达水平及内耳发育改变。 方法选择12只健康SD孕大鼠为研究对象,并随机分为CIH组及正常组,每组各6只。对CIH组建立CIH孕鼠模型。统计学比较两组子鼠生后不同日龄的体质量差异,并在两组子鼠日龄为56 d时获取其内耳标本,分别采用光镜(HE染色)及电镜观察子鼠内耳毛细胞发育改变,采用原位细胞凋亡检测(TUNEL)法检测内耳考蒂器毛细胞凋亡情况。蛋白质印迹法比较子鼠内耳Cx26表达水平改变。 结果① CIH组新生子鼠生后12 h内,体质量显著低于正常组子鼠,且差异有统计学意义[(4.8±0.6) g vs (6.0±0.4) g,t＝4.076,P＝0.002]。②光镜及电镜检查结果显示,CIH组考蒂器毛细胞缺失,电镜下可见毛细胞凋亡现象;CIH组子鼠耳蜗考蒂器毛细胞、血管纹细胞及螺旋神经节平均相对光密度值,均较正常组显著增高,且差异均有统计学意义[(0.42±0.11) vs (0.26±0.09),t＝2.758,P＝0.020 0;(0.40±0.14) vs (0.19±0.05),t＝3.460,P＝0.006 0;(0.45±0.12) vs (0.19±0.03),t＝5.149,P＝0.000 4]。③ CIH组子鼠内耳Cx26蛋白表达水平较正常组显著降低,且差异有统计学意义[(0.72±0.36) mg/(kg·d) vs (1.07±0.19) mg/(kg·d),t＝0.785,P＝0.042]。 结论SD大鼠产前发生CIH,可导致胎鼠宫内生长受限、子鼠低出生体质量及听力损伤。     

子宫内慢性缺氧对子代大鼠胰腺<i>Pdx-1</i>基因表观遗传机制改变的研究

目的探讨SD大鼠妊娠期子宫内慢性缺氧(CIH)后,其子代大鼠胰腺Pdx-1基因表达水平。 方法选择处于妊娠期的16只健康SD大鼠为研究对象,按照随机数字表法,将其随机分为CIH组及对照组,每组各8只。对CIH组孕鼠建立CIH模型,对照组孕鼠不进行CIH处理。CIH组孕鼠第1天缺氧1 h后,对2组孕鼠均进行动脉血气分析。2组SD大鼠各分娩子代大鼠192与208只。于日龄为56 d时,采用随机数字表法随机选取CIH组及对照组子代大鼠各24只,然后处死,摘取胰腺,制作胰腺组织标本,分别纳入CIH亚组与对照亚组。对CIH亚组与对照亚组的各6例子代大鼠胰腺标本,采用苏木精-伊红染色法(HE)染色及光镜观察子代大鼠胰岛细胞改变情况,并采用Image Pro Plus 6.0图像分析软件对胰岛β细胞面积进行定量分析。采用免疫组化、Western blotting法分别检测CIH亚组与对照亚组的各6例子代大鼠胰腺Pdx-1蛋白表达水平。采用亚硫酸氢盐测序法,检测CIH亚组与对照亚组的各6例子代大鼠胰腺Pdx-1基因启动子甲基化水平。采用统计学分析方法比较2组孕鼠动脉血气分析结果,以及子代大鼠胰岛β细胞面积,胰腺Pdx-1蛋白相对积分光密度(IOD)值及其表达水平,胰腺Pdx-1基因启动子甲基化水平。 结果①2组孕鼠动脉血气分析结果显示,CIH组孕鼠动脉血氧饱和度(SaO₂)、动脉血氧分压(PaO₂)水平,均较对照组显著下降,差异均有统计学意义(t＝9.345,P<0.001;t＝2.537,P＝0.028)。2组孕鼠动脉血二氧化碳分压(PaCO₂)及动脉血pH值分别比较,差异均无统计学意义(t＝0.228,P＝0.822;t＝0.100,P＝0.920)。②光镜下观察2组子代大鼠胰腺组织切片(HE染色)结果显示,CIH亚组子代大鼠胰岛细胞大小不一,多数胰岛细胞增生肥大;对照亚组子代大鼠胰岛细胞呈圆形或椭圆形的细胞团,胰岛细胞分布均匀。CIH亚组子代大鼠胰岛β细胞面积为(254 216±6 211)μm²,较对照亚组的(208 253±2 714) μm²明显增大,二者比较,差异有统计学意义(t＝10.313,P<0.001)。③免疫组化结果显示,CIH亚组子代大鼠胰腺Pdx-1蛋白的相对IOD值为(1.84±0.51)×10⁴,显著低于对照亚组的(3.61±0.71)×10⁴,二者比较,差异有统计学意义(t＝14.177,P<0.001)。Western blotting法检测结果显示,CIH亚组子代大鼠胰腺Pdx-1蛋白表达水平为(1.08±0.22)mg/(kg·d),较对照亚组的(2.09±0.36) mg/(kg·d)低,二者比较,差异有统计学意义(t＝0.787,P＝0.040)。④2个亚组子代大鼠胰腺CpG岛1、2甲基化水平分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CIH亚组子代大鼠胰腺CpG岛3甲基化水平显著高于对照亚组,并且差异有统计学意义(t＝17.626,P<0.001)。 结论SD大鼠产前发生CIH,可导致子代大鼠胰Pdx-1基因启动子甲基化表达上调,Pdx-1基因表达下降,Pdx-1蛋白表达减少。     

肠道黏膜M细胞与微生物相互作用机制研究进展

M细胞是黏膜免疫系统中一种特化的抗原转运细胞,能将抗原由肠腔转运到上皮下的淋巴组织,从而诱导免疫黏膜免疫应答或免疫耐受。因此M细胞被认为是启动黏膜免疫应答的＂门户＂,同时也为许多病原微生物的入侵提供突破口。研究M细胞摄取抗原的机制能为口服疫苗的设计开发提供更有效的途径。本文主要对M细胞的结构功能、M细胞摄取微生物抗原机制等方面作一简要综述。     

慢性宫内缺氧对新生仔鼠胰腺NDUFB6基因启动子区域甲基化的影响

目的 研究慢性宫内缺氧(CIH)新生仔鼠胰腺NDUFB6基因表达及其表观遗传的改变,并探讨其机制。方法 12只妊娠SD大鼠分为健康组和缺氧组,建立CIH模型,2组分娩后2周仔鼠做空腹血糖(FBG)、空腹血胰岛素(FINS)检测;仔鼠麻醉处死,取胰腺,采用免疫组织化学、蛋白免疫印迹(Western blot)检测胰腺组织NDUFB6蛋白的表达情况;实时荧光定量PCR(qPCR)检测2组仔鼠胰腺组织上NDUFB6 mRNA表达情况;亚硫酸氢盐修饰后测序(BSP)实验检测2组仔鼠胰腺组织NDUFB6基因启动子区域位点甲基化修饰情况。结果 与健康组仔鼠比较,缺氧组仔鼠表现糖耐量异常与胰岛素抵抗现象,仔鼠胰腺组织NDUFB6 mRNA、NDUFB6蛋白表达水平降低(P<0.05),仔鼠胰腺组织NDUFB6基因启动子CpG岛甲基化水平增高(P<0.01)。结论 CIH可致缺氧孕鼠仔鼠胰腺NDUFB6基因发生表观遗传改变,参与CIH后仔鼠胰岛素抵抗的发生、发展过程。     

多媒体试题库在组织胚胎学考试中的建设与评价

多媒体试题库是将组织胚胎学与计算机多媒体技术融合在一起,按照一定的教学测量理论,在计算机系统中实现学科题目的集合,为考核、考试命题提供科学、合理、系统的服务,有助于学生自学,并随时进行自我测验,了解对专业知识的掌握情况,加深对知识的理解和记忆,对促进医学教育的发展,改革考试方法具有重要意义。     

CIH对仔鼠胰腺基因芯片测序及相关生物信息学的影响研究

目的 利用基因芯片测序技术筛选宫内慢性间断性缺氧(CI H)雄性仔鼠胰腺的差异表达基因(DEGs),分析相关生物信息.方法 12只怀孕SD大鼠分为正常组和缺氧组,缺氧组制作CIH模型,提取两组分娩后第12周的雄性仔鼠胰腺组织总RNA,纯度验证合格后,进行基因芯片测序:包括基因芯片DEGs筛选、GO功能分类、pathway富集分析等,并验证结果的可靠性.结果 缺氧组雄性仔鼠空腹血清胰岛素、空腹血糖、以稳态模式评估胰岛素抵抗(HOMA-IR)均高于正常组雄性仔鼠(P<0.05),差异有统计学意义.CIH后缺氧组雄性仔鼠胰腺较正常组雄性仔鼠胰腺的分子功能、细胞组分、生物学过程的分析均有改变.共检测23088个基因,表达明显上调的基因2628个、明显下调的2321个(Fold Change≥2且P≤0.05).结论 妊娠期CIH可致成年雄性仔鼠胰腺表达基因、GO功能分类、胰岛素分泌等pathway富集转录通路等的失调,成年雄性仔鼠呈现胰岛素抵抗.     

实施TBL模式于组胚教学后的对比与体会

目的探讨TBL模式在组织学与胚胎学中的应用效果。方法采用对照法,从2011级高职高专临床专业学生中,随机抽取两个班作为实验组和对照组进行研究。实验组40人,采用TBL模式教学;对照组41人,采用传统模式教学。通过TBL阶段评估、考试及考查对效果进行综合评价。结果期末理论分数实验组为81.26±11.52分,对照组为77.39±10.98分(P0.05);实验考试成绩分数实验组为82.31±13.49分,对照组为79.25±12.87分(P0.05);总评考试成绩分数实验组为82.36±11.68分,对照组为78.19±10.41分(P0.05);课后提问题人数实验组239人次,对照组118人次;实验室开放学生到场率实验组81.58%,对照组28.87%;问卷调查中,评组胚为最感兴趣科目实验组29人,对照组12人;以各种方式查询组胚资料3-5次实验组33人,对照组9人。结论与传统教学模式相比,TBL教学模式在培养临床思维、发挥学生主动性,激发学生学习兴趣,培养学生解决实际临床问题能力等方面均具有突出的优势,对培养高素质医学人才具有重要意义。