含心脏阿霉素反应蛋白基因的重组慢病毒过表达和RNA干扰载体的构建及鉴定

目的：构建心脏阿霉素反应蛋白（CARP）基因重组慢病毒过表达和RNA干扰载体并进一步包装慢病毒,为研究CARP在阿霉素（ADR）心肌病中的作用及机制奠定基础。方法：将PCR扩增的大鼠CARP基因序列和设计合成的短发夹RNA（shRNA）序列分别插入GV-358和GV-248表达载体,行DNA测序鉴定。采用重组CARP过表达和shRNA表达穿梭载体与Helper 1.0和Helper 2.0辅助包装质粒共转染人胚肾细胞HEK293T,进行病毒包装和扩增,采用终点稀释法测定病毒滴度。采用重组慢病毒感染HEK293T细胞,荧光显微镜观察绿色荧光强度。采用重组慢病毒感染H9C2细胞,分为对照组、Scramble RNA组、CARP过表达组和shRNA CARP组,Western blotting法检测各组细胞中CARP蛋白表达水平。结果：基因测序,CARP过表达及shRNA载体序列与原设计序列完全相符。载体转染HEK293T细胞后,在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达。包装的CARP过表达及shRNA病毒感染H9C2细胞后,与对照组比较,CARP过表达组细胞中CARP蛋白表达水平升高5.3倍（P=0.01）,shRNA CARP组细胞中CARP蛋白表达水平降低53%（P=0.02）。结论：成功构建了CARP过表达和特异性shRNA慢病毒表达载体并获得高感染效率的过表达和RNA干扰慢病毒,后者在H9C2细胞中能够干预CARP表达。     

鄂产竹节参高效液相特征图谱的建立和分析

目的建立鄂产竹节参药材的高效液相色谱法指纹图谱。方法采用Apollo C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,乙腈 0.05%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1 mL•min－1,检测波长203 nm,柱温：30 ℃。结果测试样品10批,以竹节参皂苷Ⅴ色谱峰为参照峰,确立4个共有峰作为竹节参药材特征峰,测得其含量分别为12.616,3.976,5.625,4.429 mg•g－1。结论竹节参药材特征图谱专属性强,可用于鄂产竹节参药材的鉴定及质量控制。     

胃液中色氨酸的高效液相色谱分析及其与胃癌的相关性

目的 通过胃液高效液相紫外光吸收光谱验证并确认胃液中色氨酸与胃癌的关系.方法 收集15例胃癌患者与15例非胃癌患者的胃液,以高效液相方法分析并以紫外光检测器检测.结果 胃癌患者与非胃癌患者胃液的高效液相紫外光吸收光谱明显不同.紫外光检测胃癌患者胃液中色氨酸含量较非胃癌患者胃液中色氨酸高(t检验,P＜0.01).结论 色氨酸是胃癌患者胃液中特异性荧光物质的主要组分.     

小檗碱与大黄酸沉淀作用的毛细管电泳法

目的研究大黄酸和小檗碱沉淀反应的热力学和动力学性质，为深入研究中药复方泻心汤和芍药汤提供依据。方法用毛细管电泳法测定在不同条件下沉淀反应溶液中两组分的平衡浓度，研究沉淀反应的热力学和动力学。结果沉淀中两组分摩尔比1∶1，20 ℃时溶度积常数k_sp=［B］［R］=(3.29±0.19)×10^-9mol²·L^-2。沉淀反应为吸热过程，k_sp受温度的影响不大。沉淀反应在混合时很快发生，然后是沉淀的陈化过程。结论中药复方泻心汤和芍药汤在煎煮过程中产生的来自于大黄蒽醌和生物碱的沉淀有一定的溶解度。毛细管电泳采用加大进样量后用峰高定量的方法有助于提高简单样品测定结果的重现性。     

脐动脉血流S/D值联合孕妇血清CX3CL1 HIF-1α对胎儿窘迫的诊断价值

目的 探讨脐动脉血流收缩期末最大血流速度/舒张期末最大血流速度(S/D)、血清趋化因子C-X3-C配体1(CX3CL1)、血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对胎儿窘迫(FD)的诊断价值。方法 选取2020年5月至2022年5月在青岛市妇女儿童医院妇产科分娩且出现FD的128例孕妇为研究对象(FD组),根据新生儿Apgar评分将FD孕妇分为轻度窘迫组74例和重度窘迫组54例,另取同期在本院定期产检并分娩的健康且未出现FD的孕妇78例为正常组;超声检测FD孕妇脐动脉血流S/D值;ELISA法检测FD孕妇血清CX3CL1、HIF-1α水平;Pearson法分析FD孕妇血清CX3CL1、HIF-1α水平与脐动脉血流S/D值的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CX3CL1、HIF-1α水平及脐动脉血流S/D值对胎儿重度窘迫的诊断价值。结果 FD组孕妇脐动脉血流阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、S/D值、血清CX3CL1及HIF-1α水平均显著高于正常组(P<0.05),重度窘迫组孕妇RI值、PI值、S/D值、血清CX3CL1及HIF-1α水平均高于轻度窘迫组(P<0.05)。FD组血清CX3CL1、HIF-1α与脐动脉血流S/D值均呈正相关(r=0.531、0.489,P<0.05)。脐动脉血流S/D值、血清CX3CL1、HIF-1α以及3项联合诊断胎儿重度窘迫的AUC分别为0.870、0.802、0.731、0.941,联合诊断的灵敏度为87.04%,特异度为90.54%,3项联合优于脐动脉血流S/D值、血清CX3CL1、HIF-1α各自单独诊断(Z_{3项联合-S/D}=2.775、Z_{3项联合-CX3CL1}=3.998、Z_{3项联合-HIF-1α}=4.925,P均<0.05)。结论 FD孕妇脐动脉血流S/D值、血清CX3CL1、HIF-1α水平均上升,且血清CX3CL1、HIF-1α水平与脐动脉血流S/D值均呈正相关,3项联合对诊断胎儿重度窘迫有更高的价值。     

南京地区汉族人群VDR基因多态性与前列腺癌易感性的关系研究

<正>前列腺癌(prostate cancer,PCa)是危害中老年男性健康的常见恶性肿瘤之一。欧美及非洲国家的PCa发病率较高[1],中国的PCa发病呈上升趋势。PCa的发病与遗传、激素、环境等因素密切相关[2]。维生素D可以抑制前列腺细胞的生长和分化,干扰前列腺肿瘤的生长和转移[3]。维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)蛋白在前列腺组织细胞中广泛表达,VDR基因的多态性是PCa发病的潜在危险     

克氏针喙突间加压螺钉内固定治疗肩锁关节脱位

<正> 我科从1997年起,采用了切开复位克氏针内固定肩锁关节加松质骨螺钉喙锁间加压固定及修补喙补锁韧带的方法治疗Tossi-Ⅲ肩锁关节脱位,取得了较好的疗效。1 临床资料1.1 一般资料 本组男12例,女5例。年龄17～65岁。病程最长者5周,均有明显外伤史符合Tossi-Ⅲ诊断。术后随访时间8～22个月。参照黄公怡的术后疗效评价,优11例,良6例。1.2 手术方法 沿肩峰前缘和锁骨外侧端前缘做一切口,显露肩锁关节、喙突和肩锁韧带。检查损伤情况,在喙突上方锁骨相应部分切开骨膜。自锁     

腹腔镜治疗输卵管妊娠25例分析

异位妊娠是威胁育龄妇女生命的重要原因之一，最常发生的部位是输卵管，以往确诊后大多数患者需要开腹手术治疗。随着腹腔镜手术器械的发展，临床医师腹腔镜手术经验的积累。腹腔镜手术也成为治疗输卵管妊娠的一种理想术式之一。     

促性腺激素释放激素激动剂联合反向添加疗法治疗子宫内膜异位症的临床疗效研究

目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-α)联合戊酸雌二醇(estradiol valerate)和安宫黄体酮(MPA)反向添加疗法用于中重度子宫内膜异位症术后巩固治疗的临床疗效及安全性.方法 将32例中重度子宫内膜异位症腹腔镜手术后患者随机分为两组:单药组(A组,16例)患者于月经周期的第2天或于术后月经来潮第2天予曲普瑞林3.75 mg皮下注射,隔28 d注射1次,共3次;反加组(B组,16例)患者于月经周期的第2天或于术后月经来潮第2天予曲普瑞林3.75 mg皮下注射,隔28 d注射1次,共3次,于注射第1支曲普瑞林的同时口服戊酸雌二醇1 mg及安宫黄体酮6 mg至治疗结束.比较两组患者治疗前、后血清激素及癌胚抗原125(CA125)水平、疼痛症状视觉模拟评分(VAS)、绝经症状严重程度(以Kupperman评分表示)等.结果 (1)A、B两组患者治疗后的血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH) 、雌激素(E2 )水平分别为 (2.2±2.1)U/L、(1.70±0.61) U/L、(27.6± 6.05)pg/ml和 (1.9±1.4) U/L 、(1.59±0.74) U/L、(39.5±9.01)pg/ml,均明显低于治疗前水平,差异均有统计学意义( P ＜0.05);CA125水平较治疗前明显降低,差异亦有统计学意义( P ＜0.01).(2)A、B两组患者治疗前VAS评分为(5.41±2.92)分和(5.64± 3.17)分,明显高于治疗后的(2.03± 1.92)分和(2.45± 2.06)分,差异有统计学意义( P ＜0.01).但两组间治疗后评分比较,差异无统计学意义( P ＞0.05).(3)A、B两组患者治疗后的改良Kupperman评分分别为(14.71± 7.63)分和(11.13± 6.54)分,两组间比较差异无统计学意义( P ＞0.05).但两组患者中潮热出汗的发生率分别为93.8%和56.3%,差异有统计学意义( P ＜0.01).结论 GnRH-α联合戊酸雌二醇、安宫黄体酮反向添加疗法在缓解低雌激素症状方面是安全有效的.反向添加疗法能减轻GnRH-α的副作用而不影响其疗效.