肝毒净护肝作用药理实验研究

实验结果表明，肝毒净能对抗Ｄ－Ｇａｌｎ所致的大鼠急性肝损伤及ＣＣｌ４所致的小鼠慢性肝损伤，主要表现在能降低急性肝损伤大鼠的死亡率，降低大鼠、小鼠血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＡＬＰ、Ｔ－Ｂｉｌｉ的含量，减少肝细胞变性和坏死，促进肝细胞再生，具有明显的护肝作用。     

三拗汤类方宣肺功效的共性论析

三拗汤及其后世历代衍化而成的类方系列,是中医治疗以咳嗽、哮喘为主证的呼吸病常用方剂,配伍宣肺祛风、宣泄化痰、宣肺化饮是其主要衍化形式。方中物质基础主要来源于其组方药材,但配伍后有效物质溶出量有变化,且有新成分产生。笔者通过多层次的效应评价发现,类方间既具有宣肺效应的共性特点,又存在据证衍化的优效性。其共性的效应途径涉及了保护结构细胞、抗炎、抗氧化和免疫调节等多个环节。     

肾系膜细胞与糖尿病肾病变的相关性研究

糖尿病肾病(DN)是糖尿病最常见而又最难治的微血管并发症,其基本病理改变为细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)积聚和基底膜的增厚。肾小球系膜细胞病变是糖尿病肾病最突出的病理改变之一,它是糖尿病肾病(DN)致病因子作用的主要靶细胞。在糖尿病状态下,对肾小球系膜细胞功能的研究对阐明DN发病机理具有重要意义。     

山茱萸最佳配伍组分对高糖致ECV304细胞氧化损伤的保护作用

目的研究山茱萸最佳配伍组分(环烯醚萜苷、三萜酸和多糖以2∶1∶2配伍)对高糖培养的内皮细胞(human um-bilical vein endothelium cells,ECV304)氧化应激的影响。方法体外培养细胞,在细胞板内加入含30 mmol.L-1高糖的10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)RPMI 1640培养液,加入空白、山茱萸最佳配伍组分大剂量、小剂量含药血清。同时设10%FBS RPMI 1640培养液作正常对照,川芎嗪作阳性对照。在37℃、5%CO2饱和湿度培养48 h后,取细胞上清液测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。应用激光共聚焦显微镜检测进入细胞内2',7'-二氯荧光黄双乙酸酯(DCFH-DA)荧光强度来反映细胞内ROS含量。结果高糖组细胞上清液中SOD、GSH-Px活性降低,MDA、ROS含量增加(P<0.01),提示血管内皮细胞受损,抗氧化能力降低。而山茱萸最佳配伍组分能提高SOD、GSH-Px活力,降低ROS、MDA含量,与高糖组比较差异有显著性(P<0.05,0.01)。结论山茱萸最佳配伍组分能够保护血管内皮细胞,具有防治糖尿病血管病变的作用,其作用机制与抑制氧化应激有关。     

功血颗粒对药物不完全流产大鼠性激素水平及子宫ER mRNA表达的影响

目的 探讨功血颗粒对药物不完全流产大鼠血清性激素水平及子宫内膜雌激素受体(ER)的影响.方法 运用米索前列醇和米非司酮造成大鼠不完全流产模型,给予药物后,采用放免法测定血清雌二醇(E2),孕酮(P)水平;采用RTPCR测定子宫内膜ER的表达.结果 功血颗粒5.5 g/kg、11 g/kg、22g/kg组能明显降低大鼠子宫内膜ER表达量(P＜0.01),功血颗粒22 g/kg能明显升高E2水平(P＜0.05).但是对孕酮的影响不大.结论 功血颗粒有调节性激素和子宫内膜ER的作用.     

清火解毒法对实验小鼠的镇痛抗炎作用研究

目的：从药理角度探讨清火解毒法的镇痛抗炎作用。方法：乙酸刺激至小鼠疼痛扭体实验、小鼠热板实验,观察中药对小鼠疼痛的抑制作用;二甲苯致小鼠耳肿胀法,比较各组用药后小鼠耳壳肿胀度;醋酸诱发小鼠毛细血管通透性增加,观察中药对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响。结果：可明显减少乙酸所致小鼠的扭体反应次数（P＜0．01）。明显提高小鼠的痛阈值（P＜0．01）。能减轻小鼠耳壳肿胀度及肿胀率（P＜0．05,P＜0．01）;降低由醋酸引起的小鼠毛细血管通透性的增加（P＜0．05）。结论：清热解毒法具有一定的镇痛抗炎作用。     

生地黄-山茱萸对AGEs致HUVEC细胞损伤的保护作用

目的 观察生地黄、山莱萸对晚期糖基化终产物(AGEs)作用下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用.方法 体外培养HUVEC,将细胞分为正常对照组、AGEs组、生地黄组、山茱萸组、生地黄-山茱萸分煎及合煎组,加入终浓度为0.125、0.062 5、0.031 25 g/L的药物预孵lh后,加入200 mg/L的AGEs作为刺激物,继续培养24h后,用CCK-8测定并计算药物对AGEs致HUVEC损伤的保护率;取各组细胞上清液,试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、乳酸脱氲酶(LDH),ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β.结果 生地黄、山茱萸、生地黄-山茱萸(0.125、0.062 5、0.031 25 g/L)对AGEs致HUVEC损伤均有保护作用.AGEs组细胞上清液中SOD活性、NO含量降低(P＜0.05～0.01),MDA、LDH含量增加(P＜0.05～0.01),TNF-α、IL-1β分泌增加(P＜0.05～0.01).而各给药组能提高SOD活性、NO含量,降低LDH、MDA,减少TNF-α和IL-lβ分泌,与AGEs组比较有显著性差异(P＜0.05～0.01).结论 生地黄、山茱萸、生地黄-山茱萸通过增加内皮细胞NO生成量、抑制氧化应激、调节细胞分泌功能来保护血管肉皮细胞的,尤以生地黄-山茱萸保护HUNEC最为明显.     

大柴胡颗粒对胆色素结石豚鼠保护作用机制研究

目的 观察大柴胡颗粒对胆色素结石豚鼠胆囊黏膜表皮生长因子（EGF）表达水平,肝、胆超微结构,肝组织胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）mRNA水平以及胆盐转运子BSEP、MRP2表达水平的影响,明确其对胆色素结石豚鼠的保护作用机制。方法 采用饲料法复制胆色素结石豚鼠模型,免疫组化法观察大柴胡颗粒（1.1、2.2、4.4 g/kg）对胆色素结石豚鼠的胆囊EGF水平的影响,透射电镜观察肝胆组织超微结构的改变,RT-PCR法检测肝组织CYP7A1 基因表达水平,Western blotting法检测肝脏中BSEP、MRP2表达水平,以熊去氧胆酸作为阳性对照。结果 大柴胡颗粒对胆结石豚鼠胆囊黏膜EGF表达影响不明显,但较好地改善其肝胆超微结构,其2.2、4.4 g/kg剂量组还能增加肝脏组织CYP7A1的基因转录（P＜0.05、0.01）和BSEP、MRP2蛋白表达水平（P＜0.05）。结论 大柴胡颗粒抑制豚鼠胆色素结石形成可能与其影响豚鼠胆汁酸代谢、促进胆盐转运子功能、保护肝胆细胞器结构有关,而与胆囊黏膜EGF功能无明显关系。     

高糖对人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质的影响

目的 观察不同浓度的葡萄糖对人肾小球系膜细胞增殖的影响及对细胞外基质纤维连接蛋白(Fn),Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响.方法 体外培养人肾小球系膜细胞株,分别加入葡萄糖终浓度为5.5、10、20、30、40 mmol/L进行处理,于不同时间段(12、24、48、72 h)用MTT法检测肾小球系膜细胞的增殖情况,ELISA法检测培养48 h后条件培养基中Fn及ColⅣ的含量.结果 高糖作用12、24、48、72 h均能促进细胞的增殖,且随着葡萄糖浓度升高作用时间的延长促进作用增强.检测细胞上清液的Fn和ColⅣ.与对照组相比,30 mmol/L D-葡萄糖作用48 h后,Fn和ColⅣ表达增高.结论 高浓度葡萄糖对系膜细胞增殖作用具有量效及时效关系,我们选择30 mmol/L浓度的葡萄糖作用48 h为最合适的细胞刺激条件.高浓度葡萄糖可促进系膜细胞细胞外基质的产生,而系膜细胞细胞外基质过度表达,可以直接导致细胞外基质的积聚,从而导致肾小球硬化的发生.