5-杂氮脱氧胞苷对人膀胱癌细胞株T24增殖作用的影响

目的:探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-dc)对人膀胱癌细胞株T24增殖、凋亡的影响.方法:应用不同浓度(0.1、0.5、2.5、12.5μmol/L)的特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-dc,于不同作用时间(6、12、24、48 h)处理人膀胱癌细胞株T24,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度的5-aza-dc在不同时间作用下T24细胞株的生长抑制率:采用流式细胞仪检测不同浓度的5-aza-dc在处理T24细胞24 h后的凋亡率变化情况.结果:MTT提示各浓度的5-aza-dc对细胞生长均有抑制作用.流式细胞分析结果示,不同浓度5-aza-dc处理24 h后T24细胞凋亡率均明显增加.不同药物浓度组在同一作用时间下,T24细胞生长抑制率及凋亡率的差异有统计学意义(P<0.01);同一药物浓度在不同作用时间组之间的细胞生长抑制率差异也有统计学意义(P<0.01),且浓度为12.5 μmol/L的5-aza-dc作用24 h时对T24细胞的生长抑制及凋亡作用最明显.结论:5-aza-dc有抑制人膀胱癌细胞株T24生长及促进其凋亡的作用,其抑制作用呈时间依赖性及浓度依赖性.     

新型胃肠双动力药物-伊托必利

目的:探讨新型胃肠双动力药物伊托必利的临床有效性及安全性.方法:查阅中外相关文献,并进行综合、分析和归纳.结果:伊托必利是新型的具有阻断多巴胺D2受体活性和抑制乙酰胆碱酯酶活性的双重机制的第三代促胃肠动力药物,具有选择性高;中枢神经系统分布少;不经过肝脏细胞色素P450代谢,药物相互作用少;无西沙必利的致室性心律失常及其他严重的药物不良反应和实验室异常等特点,安全性更高.结论:伊托必利是治疗功能性消化不良和慢性胃炎及肠易激综合症因胃肠动力障碍引起的消化不良症状的安全、有效的新型药物.     

聚乙二醇400分子量测定方法比较研究

目的：建立高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定聚乙二醇400（PEG400）分子量及其分布,并与《中国药典》所用的端基分析滴定法比较。方法：采用Shodex OHpak SB-802.5HQ与Shodex OHpakSB-803HQ色谱柱串联分离,以0.1 mol·L^-1硝酸钠（0.02%叠氮钠）为流动相,流速0.5 mL·min^-1,柱温30℃,样品浓度2 mg·mL^-1,采用示差折光检测器进行测定。结果：HPGPC测定的聚乙二醇400的分子量结果与《中国药典》2015年版所用的端基分析法测得的平均分子量结果接近,采用不同厂家色谱柱、对照品可影响PEG400的分子量测定结果,选用Shodex OHpak SB色谱柱串联测定聚乙二醇400重均分子量的范围为407~440,分子量分布宽度1.0~1.1,该方法的精密性RSD为0.2%,重复性为2.89%,24 h内样品稳定性RSD为0.66%。结论：经方法学验证,HPGPC法准确、重复性好,可用于聚乙二醇400分子量及其分布测定。     

后腹腔镜非离断成形术治疗肾盂输尿管连接处梗阻

目的:评价3种后腹腔镜非离断成形术治疗肾盂输尿管连接处梗阻(UPJO)的临床疗效及其可行性。方法:对36例UPJO均有不同程度肾盂积水患者,分别使用FoleyY-V成形术、Fenger成形术及Hellstrm术行非离断成形术。结果:无一例改开放手术。在平均28个月的随访中,17例接受FoleyY-V成形术的患者中有2例复发,行开放离断成形术后解除梗阻;11例接受Fenger成形术的患者中1例复发,使用球囊扩张后治愈;8例接受Hellstrm术的患者均达到手术成功标准。结论:非离断成形术中保留异常狭窄段可能是导致术后有较高复发率的重要因素,因此在条件允许情况下应尽量选择离断成形术。对于Hellstrm术,在严格控制适应证的前提下,不失为一种治疗单纯因异位血管压迫而导致UPJO的较好手术方式。     

丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对纤维化人肾间质成纤维细胞体外增殖及cyclin E蛋白表达的影响

目的 研究丹参酮Ⅱ-A磺酸钠(sodium tanshinone Ⅱ-A sulfonate,DS-201)对人肾间质纤维化来源的成纤维细胞(human renal interstitial fibroblasts,hRIFs)体外增殖及细胞周期素E(cyclin E)基因表达的影响,探讨该药治疗肾间质纤维化的作用机制.方法 体外培养并鉴定hRIFs;用四甲基偶氮唑(MTT)法检测对照组与不同DS-201浓度组hRIFs的增殖活性;用免疫细胞化学S-P法和图像分析技术检测对照组与不同DS-201浓度组hRIFs cyclin E基因的表达.结果 随药物浓度的升高和作用时间的延长,抑制率逐渐升高,抑制作用逐渐增强,呈剂量依赖性和时间依赖性.用药组阳性细胞的平均光密度值在第3、5、7、9天显著低于对照组(P＜0.05,P＜0.01),第1天用药各组与对照组之间无统计学差异(P＞0.05).结论 ①DS-201对hRIFs体外增殖有显著抑制作用,可能是其治疗肾间质纤维化的机制之一.②DS-201抑制hRIFs体外增殖可能是通过抑制细胞中cyclin E基因的表达,阻滞细胞通过G1/S关卡,延长细胞周期实现的.     

乳腺癌前哨淋巴结与腋窝淋巴结清扫术的相关性研究

目的：探讨早期乳腺癌前哨淋巴结活检(sentinel lymph node biopsy, SLNB)对患者腋窝淋巴结转移状况预测的相关性。方法：对2012年1月至2014年12月在我院接受右乳癌改良根治术的66例早期乳腺癌患者,采取亚甲蓝作为示踪剂,定位腋窝前哨淋巴结并对其进行活检,同时行腋窝淋巴结清扫（anxillary lymph node dissection,ALND）。术后病石腊切片检查前哨淋巴结及腋窝淋巴结,观察前哨淋巴结活组织检查对乳腺癌的预测情况。结果：66例乳腺癌患者共发现64例前哨淋巴结,检出率为97.0%,共检出前哨淋巴结141枚,平均2.14枚,腋窝淋巴结798枚,平均12.1枚,准确率为97.0%(62/64)。结论：SLNB能准确地预测早期乳腺癌患者腋窝淋巴结的转移状况,是一种简便、安全的检测技术,可以预测早期乳腺癌患者腋窝淋巴结的状态。     

点穴配合捏脊治疗婴幼儿腹泻80例

目的：探索手法治疗婴幼儿腹泻的有效途径。方法：选穴合谷、内关、曲池、足三里、阴 陵泉、三阴交等６个穴位,采用点揉、压放、摩腹等手法,并配合推搓腰骶至大椎穴等手法,治疗婴幼儿腹泻８０例。结果：总有效率为９７．５％。提示：本方法协同起效,有消食导滞、健脾温肾、止泻之功。     

生长分化因子5诱导大鼠软骨前体细胞向成软骨方向分化

背景:生长分化因子5和软骨前体细胞都在肢体纵向发育中发挥重要作用.目前尚无生长分化因子5对软骨前体细胞影响的文献报道.目的:实验创新性构思重组生长分化因子5干预软骨前体细胞,希望得到生长分化因子5诱导软骨前体细胞向软骨细胞分化的证据.设计、时间及地点:细胞形态学体外实验,于2007-11/2008-03在华中科技大学同济医学院附属同济医院矫形外科研究室完成.材料:纯系清洁级新生24 h内的SD大鼠12只,用于制备软骨前体细胞.生长分化因子5为PeproTech公司产品.方法:免疫磁珠分离纯化软骨前体细胞.取第3代细胞,分别用含0,10,50和100 μg/L的完全软骨形成培养基干预,诱导14 d.对照组采用低糖DMEM培养基.主要观察指标:光镜观察细胞形态和生长增殖,四甲基偶氮唑盐检测细胞增殖活性,阿利新蓝染色蛋白聚糖,应用免疫组织化学和反转录-聚合酶链反应检测Ⅱ型胶原的表达.结果:分离纯化的软骨前体细胞贴壁牢固,生长旺盛,折光度好,光镜下呈多角形或梭形. 软骨前体细胞的增殖在48 h内呈剂量依赖性增高,100 μg/L生长分化因子5组细胞的增殖率显著高于其他组(P<0.05).诱导14 d后阿利新蓝染色阳性,细胞外基质中有明显的蛋白聚糖形成.在生长分化因子5干预软骨前体细胞第7天,Ⅱ型胶原mRNA和Ⅱ型胶原蛋白出现表达,并且14 d持续表达.结论:生长分化因子5能够促进软骨前体细胞的增殖分化.     

Gli2在原发性肝细胞癌中的表达及与Cyclin D1、p21的关系

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中 Gli2、Cyclin D1 和 p21 的表达及其意义.方法 采用组织芯片和免疫组织化学方法以及 RT-PCR 检测了 44 对 HCC 和相应癌旁肝组织中 Gli2 蛋白和 mRNA 的表达情况,应用 Western blot检测了 Cyclin D1、p21 蛋白在两种组织中的表达差异.结果 免疫组化染色与 RT-PCR 示 Gli2 在 HCC 组织中的阳性表达率为 68.2%,而癌旁肝组织为38.6%,两者差异具有极显著性意义(P<0.01),且 Gli2 与 HCC 的组织分化和门静脉转移相关.Cyclin D1 蛋白在 HCC 中的表达显著高于癌旁肝组织(P<0.05).且与 Gli2 的表达呈正相关;而 p21 蛋白在癌旁肝组织中的表达显著高于 HCC,但与 Gli2 无明显相关性.结论 Gli2 过度激活可能通过上调 Cyelin D1 的表达而使肝癌细胞异常增殖,参与 HCC 的发生和发展.     

5-杂氮脱氧胞苷逆转膀胱癌T24细胞死亡相关蛋白激酶的转录表达

目的 研究膀胱癌细胞T24中死亡相关蛋白激酶(DAPK)启动子区的甲基化状态,探讨使用5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-dc)处理T24细胞后对DAPK转录表达的影响及其细胞生物学效应.方法 使用不同浓度去甲基化药物5-aza-dc处理膀胱癌细胞株T24后,使用MTT法、流式细胞仪分别检测5-aza-dc对T24细胞的增殖抑制作用及凋亡率.应用甲基化特异性PCR(MSP)方法分别检测5-aza-dc(12.5 μmol/L)处理前后T24细胞中DAPK启动子区甲基化状态的变化情况.应用RT-PCR、Western-blotting分别检测5-aza-dc(12.5 μmol/L)处理前后T24细胞中DAPK转录、表达的变化情况.结果 MTT法显示不同浓度5-aza-dc对T24细胞有明显的增殖抑制作用,流式细胞仪检测T24细胞的最大凋亡率为(24.12±1.4)%.正常培养条件下T24细胞中DAPK启动子区出现高甲基化且DAPK mRNA无表达,在5-aza-dc(12.5μmol/L)作用24 h后,T24细胞中DAPK启动子区恢复为未甲基化状念且DAPK mRNA及蛋白重新恢复表达.结论 膀胱癌细胞株T24中DAPK启动子区高甲基化可能是抑制其转录表达的重要原因;5-aza-dc可以通过去甲基化作用使DAPK恢复表达,从而抑制T24细胞的增殖并诱导细胞凋亡.5-aza-dc有望成为膀胱癌化疗的有效药物.