穿孔素及颗粒酶B在肝移植排斥反应中的表达及意义

目的检测穿孔素和颗粒酶B在肝移植术后排斥反应中的表达情况，以评价其作为肝移植术后排斥反应的早期诊断指标价值。方法收集35个肝移植术后肝穿刺标本，应用免疫组织化学方法检测穿孔素和颗粒酶B表达，并与病理组织学结果相比较，研究其表达与急性排斥反应的关系。结果在35个标本中，19个经病理组织学诊断为排斥反应，其中急性排斥17例次，慢性排斥2例次。其中穿孔素和颗粒酶B在排斥反应者中的表达阳性率分别为100％(19／19)和94．7％(18／19)。而在未发生排斥反应者中，其表达阳性率分别为25．0％(4／16)和12．5％(2／16)。穿孔素及颗粒酶B多呈同步表达，仅3个标本为仅有穿孔素表达而无颗粒酶B表达，未观察到仅有颗粒酶B表达而无穿孔素表达。穿孔素和颗粒酶B的阳性表达与移植肝急性排斥反应的发生密切相关。结论穿孔素和颗粒酶B参与了肝移植后排斥反应的发生，其表达可作为术后急性排斥反应的辅助诊断指标。     

解聚素-金属蛋白酶17在结肠直肠癌中的表达及其意义

目的:研究解聚素-金属蛋白酶17(a disintegrin and metalloprotease17,ADAM17)在结肠直肠癌中的表达及其临床意义.方法:收集80例手术切除的结肠直肠癌及60例正常结肠直肠黏膜组织,采用RT-PCR和免疫组化SP法检测ADAM17在结肠直肠癌及正常结肠直肠黏膜组织中的表达情况:分析ADAM17在结肠直肠癌组织中的表达和病人临床病理特征之间的关系.结果:结肠直肠癌组织的ADAM17基因表达高于正常结肠直肠黏膜组织(0.66±O.14比0.26±0.12,P<0.01),ADAM17蛋白在结肠直肠癌组织中之表达阳性率为79%,在正常结肠直肠黏膜组织中之表达阳性率为25%,差异具有统计学意义(P<0.01).ADAM17高表达与结肠直肠癌浸润深度及远处转移相关(P<0.05);与病人的年龄、性别、肿瘤部位、大小、分化程度及淋巴结转移无关.结论:ADAM17在结肠直肠癌组织中呈高表达,此情况与结肠直肠癌浸润深度及远处转移相关,可能成为一种新的判断结肠直肠癌病人预后的标志物.     

贝伐单抗对裸鼠胃癌移植瘤血管内皮细胞生长因子和核转录因子Sp1表达的影响

目的 观察贝伐单抗对裸鼠胃癌移植瘤生长以及对肿瘤血管内皮细胞生长因子（VEGF）和核转录因子Sp1表达的影响.方法 建立SGC-7901胃癌细胞株裸鼠移植瘤模型,成瘤后分别使用贝伐单抗（BVZ组）和磷酸盐缓冲液（PBS组）治疗4周.绘制肿瘤生长曲线,免疫组织化学染色技术（IHC）检测移植瘤Ki-67、CD34、VEGF及Sp1表达情况,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡.结果 相比PBS组,BVZ组肿瘤生长速度明显减缓（P〈0.05）,肿瘤细胞增殖能力下降,凋亡指数明显增加[（5.3±1.8）％比（16.7±6.7）％,P＜0.01],肿瘤组织内微血管密度下降（4.0±1.0比16.3±1.5,P＜0.001）.贝伐单抗能减少肿瘤内VEGF表达,但对核转录因子Sp1表达水平没有明显影响.结论 贝伐单抗可有效抑制裸鼠胃癌移植瘤生长,减少肿瘤内微血管密度和VEGF表达,但不引起Sp1表达的明显改变.     

GLUTATHIONE S TRANSFERASE-π EXPRESSION IN HU- MAN GASTRIC CANCER AND ITS RELATIONSHIP TO CHEMOSENSITIVITY

R啨ｓｕｍ啨　　 Objectif　 tudierl expressiondeglutathionStransf啨ｒａｓｅ πsurlescoupesdutissucanc啨ｒｅｕｘｄ estomac ,etsarelationaveclesparam埁ｔｒｅｓｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｑｕｅｓｅｔｌｅｓｒ啨ｓｕｌｔａｔｓｄｅｓｔｅｓｔｓｄｅｃｈｉｍｉ     

抗体偶联药物维迪西妥单抗对HER-2不同表达水平胃癌细胞抑制效应的体外研究

目的 评估抗体偶联药物维迪西妥单抗(RC48)对不同HER-2蛋白表达水平胃癌细胞的体外抑制效应。方法 使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting技术结合细胞免疫荧光共聚焦显微镜，检测胃癌细胞系(NCI-N87、MKN45、MKN7、HGC27、MGC803)HER-2表达情况及细胞定位。随后对上述不同HER-2表达程度的细胞系分别经不同浓度RC48处理，CCK-8技术检测杀伤效应并计算半数抑制浓度(IC₅₀),采用qRT-PCR和Western blotting技术检测胃癌细胞经RC48处理后，不同胃癌细胞株的HER-2 mRNA及蛋白质表达情况。结果 所检测的胃癌细胞系中，NCI-N87细胞的HER-2表达量最高，其余细胞系均呈HER-2低表达，荧光共聚焦显示HER-2蛋白主要为细胞膜定位。RC48在体外可明显抑制HER-2强阳性胃癌细胞(NCI-N87)增殖，48 h及72 h的IC₅₀分别为0.32μg/ml及2.359e^-010μg/ml,该效应呈现明显的剂量依赖性和时间依赖性；...     

急性坏死性胰腺炎大鼠脑髓鞘损伤的初步观察

目的:研究急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠24 h内脑脊液和血清髓鞘碱性蛋白(MBP)水平的动态变化.方法:分别诱导SD大鼠ANP和急性水肿性胰腺炎(AEP)模型,同时设立假手术组.分别于模型诱导后3、6、9、12、24 h抽取小脑延髓池脑脊液和腹腔动脉血液.以ELISA法测定脑脊液、血清中MBP的含量.透射电镜观察髓鞘超微结构变化.结果:ANP组大鼠诱导后3 h,脑脊液MBP水平明显高于AEP组和假手术组(P<0.01),6、9 h时仍维持在较高水平(P<0.05),12、24 h时则降至较低水平.ANP组、AEP组和假手术组血清MBP水平无显著差异(p>0.05),在24 h内维持于较低水平.电镜检查,3-9 hANP组脑髓鞘主要呈轻度的损伤性改变,如空泡化、板层结构散乱等改变.结论:大鼠ANP早期存在脑组织髓鞘结构损害,表现为脑脊液MBP水平明显升高.     

达沙替尼联合奥沙利铂协同抑制胃癌细胞增殖和迁移

目的:评价Src酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼联合奥沙利铂抑制胃癌细胞体外增殖、迁移等恶性生物学行为的效应。方法:实时定量-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测Src及其活性形式p-Src在胃癌细胞株中的基础表达;蛋白质印迹技术观察不同剂量奥沙利铂作用于胃癌细胞或作用不同时间后,细胞内Src及p-Src的变化规律;细胞计数试剂盒(CCK-8)方法评价胃癌细胞暴露于不同浓度奥沙利铂和达沙替尼后的生长抑制率,分别计算2种药物的半数抑制浓度(IC50),并使用Calcusyn 2.0软件计算联合作用指数(CI);细胞集落形成实验、流式细胞术和划痕实验观察上述药物对胃癌细胞体外增殖、细胞周期、凋亡和迁移能力的影响。结果:胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823、MKN-28的p-Src/Src基础表达比值较高;奥沙利铂可明显上调胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、MKN-28的p-Src,并呈时间依赖性(r2=0.96、0.85、0.94);达沙替尼和奥沙利铂在胃癌细胞中的CI均     

胆囊结石病人成纤维细胞生长因子-19的血浆含量及胆囊黏膜表达特点

目的:检测胆囊结石病人成纤维生长因子-19(fibroblast growth factor-19,FGF-19)的血浆含量及其在胆囊黏膜的表达量,探讨FGF-19与胆囊舒张收缩功能的关系。方法:对27例胆囊结石病人(男9例,女18例,平均年龄48.5岁),采用实时定量PCR法检测胆囊黏膜FGF-19 mRNA的表达量。采用酶联免疫吸附法测定空腹及脂餐后1.5 h、3.0 h血浆FGF-19的含量。B超检查胆囊收缩功能。结果:按脂餐后1.5 h胆囊排空率(ejection fraction,EF)将胆石病人分为胆囊收缩正常组(EF>60%,n=5),收缩减弱组[EF(30~60)%,n=15]和未收缩组(EF<0.05。结论:部分胆石病人存在胆囊收缩和舒张功能障碍。血浆FGF-19含量变化可反映胆囊收缩和舒张功能异常。     

IRX1真核表达载体的构建及在胃癌细胞SGC-7901中的定位

目的 构建pEGFP-IRX1真核表达载体,体外转导至SGC-7901胃癌细胞株,观察IRX1基因转染后蛋白表达与细胞内定位.方法 PCR扩增IRX1全长1443 bp编码序列,将PCR扩增产物连接人pGEM-Teasy载体,经测序确认序列无误后,亚克隆入pEGFP-N1载体,构建pEG-FP-IRX1真核表达载体.采用Lipofectamine 2000转染SGC-7901胃癌细胞株,在荧光显微镜下观察外源性IRX1基因导入后在胃癌细胞内的表达与亚细胞定位.结果 成功构建有绿色荧光蛋白融合的IRX1真核表达载体,外源性IRX1基因在胃癌SGC-7901细胞中表达成功,在荧光显微镜下IRX1表达蛋白定位于细胞核内.结论 pEGFP-IRX1真核表达载体构建成功,并可在细胞内表达,这将为IRX1在胃癌内的功能研究奠定基础.     

NES1基因在乳腺癌中的表达意义

目的探讨NES1mRNA与蛋白的表达在乳腺癌发生、发展中的意义。方法采用逆转录鄄聚合酶链反应(RT鄄PCR)和免疫组化方法检测43例乳腺良、恶性肿瘤及其相应的正常乳腺组织中NES1mRNA及蛋白表达情况。结果14例乳腺良性肿瘤及1例正常乳腺组织中NES1基因mRNA和蛋白的表达明显高于30例乳腺恶性肿瘤组织中的表达(P<0.05),6例(75%)行术前化疗的病人肿瘤组织中NES1的表达明显增高。结论NES1可作为一种肿瘤抑制基因和分子标志物,其表达失活可能与乳腺癌的发生、发展有关。术前化疗可能是影响其表达因素之一。但是否能将NES1基因的表达情况作为乳腺癌诊断和(或)预后指标,还有待于更进一步的研究结果来证实。