慢病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染大鼠骨髓内皮祖细胞

背景：基因治疗已成为疾病治疗的新趋势,为某些难治性疾病带来了曙光,合适的细胞、基因及载体的选择是治疗的关键。目的：探讨慢病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染大鼠骨髓内皮祖细胞应用于基因治疗的有效性和可行性。方法：从SD大鼠骨髓分离、培养、鉴定内皮祖细胞,采用构建的慢病毒载体（LV）将空载体（LV-eGFP）或骨形态发生蛋白2基因（LV-eGFP-BMP2）转染至内皮祖细胞,通过eGFP荧光检测转染效率。ELISA法检测上清液中骨形态发生蛋白2蛋白的分泌,Western blot法检测细胞骨形态发生蛋白2蛋白的表达,比较转染后细胞的迁移、增殖和抗凋亡能力。结果与结论：慢病毒介导骨形态发生蛋白2载体的转染效率可达90%。与正常内皮祖细胞、转染空载体内皮祖细胞比较,转染骨形态发生蛋白2基因的内皮祖细胞分泌和表达骨形态发生蛋白2蛋白增加（P〈0.01）,迁移和增殖能力无明显改变（P〉0.05）,肿瘤坏死因子α损伤后的细胞凋亡率明显降低（P〈0.05）。结果表明慢病毒介导骨形态发生蛋白2载体可成功转染内皮祖细胞,转染后可增加内皮祖细胞分泌和表达骨形态发生蛋白2蛋白,增强对炎性损伤的抗凋亡能力,对迁移能力和增殖活性无明显影响。     

臭氧预处理对内毒素血症大鼠急性肺损伤的影响及其机制探讨

目的：观察臭氧预处理对脂多糖（ LPS）诱导的内毒素血症大鼠急性肺损伤（ ALI）的影响,并探讨其机制。方法将40只Wistar大鼠随机分成NS、LPS、OZ、OL组各10只。 OZ、OL组给予臭氧1 mg/kg（50μg/mL）,1次/d,连续10 d;LPS、OL组于第11天腹腔注射LPS 12．5 mg/kg;NS组仅腹腔注射等量生理盐水。给药8 h后处死所有大鼠,留取肺组织标本。测定肺组织湿/干重比值（ W/D）,电镜下观察肺组织病理变化,免疫组化SP法检测肺组织水通道蛋白1（AQP-1）表达。结果 NS、OZ、LPS、OL组肺组织W/D分别为3．87±0．14、3．92±0．21、5．78±0．15、4．32±0．25;LPS组高于NS组,OL组高于NS组但低于LPS组,P均＜0．01;NS组与OZ组比较,P＞0．05。电镜下,LPS组肺泡Ⅱ型上皮细胞出现明显病理改变, OL组病理损伤有所减轻。 NS、OZ、LPS、OL组肺组织AQP1蛋白表达量分别为0．215±0．032、0．207±0．041、0．165±0．013、0．194±0．011;LPS、OL组较NS组表达降低,OL组较LPS组表达增加,P均＜0．01。结论臭氧预处理可以减轻LPS血症大鼠ALI程度,增加肺组织AQP1表达可能是其作用机制之一。     

七氟醚对老年冠心病患者非心脏手术血流动力学及心肌缺血事件的影响

 目的 探讨七氟醚对老年冠心病患者非心脏手术心肌保护作用。方法 选取4家医院择期行非心脏手术的老年冠心病患者165例,随机分两组：七氟醚持续吸入维持全身麻醉（S组,）和丙泊酚持续静脉输注维持全身麻醉（P组）。记录术中不同时点血压、心率,检测术前、术后即刻、术后第1天、第2天12导联心电图ST段和T波改变。术后随访30d,记录术后不稳定心绞痛、心梗、心衰及心源性死亡发生情况。结果 心电图提示的心肌缺血发生率：S组患者在术后各时点均低于P组,其中术后第1天(16.9% VS 30.5%)和第2天(16.9% VS 30.5%)的差异显著（p<0.05）。结论 七氟醚对老年冠心病患者接受非心脏手术具有一定的心肌保护作用,但并不改变患者心脏事件发生率。     

异丙酚和氯胺酮减轻大鼠肾缺血再灌注损伤

目的:观察异丙酚(propofol)或氯胺酮(ketamine)对缺血再灌注肾损伤(IR)大鼠肾组织病理变化的影响。方法:48只成年Wistar大鼠随机均分成6组,每组8只,分别为假手术组(S组)、缺血再灌注模型组(R组)、小剂量异丙酚(5mg/kg)组(P1组)、大剂量异丙酚(10mg/kg)组(P2组)、小剂量氯胺酮(10mg/kg)组(K1组)、大剂量氯胺酮(20mg/kg)组(K2组)。输液后72h处死所有大鼠,在实验开始及处死大鼠前取4mL静脉血放入低温冰箱中保存待测。处死大鼠后取部分肾脏组织置于甲醛及戊二醛溶液,用于石蜡切片,光镜及电镜观察肾脏组织结构的变化。另取一部分肾组织制作成肾组织匀浆待测。待测指标包括血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。结果:与缺血再灌注模型组相比,异丙酚和氯胺酮能显著降低缺血再灌注肾损伤大鼠肾组织中MDA含量(P0.05),增强SOD活性(P0.05),使缺血再灌注肾损伤大鼠肾功能及组织学改变得到明显改善。结论:异丙酚或氯胺酮对肾缺血再灌注损伤有明显拮抗作用,其作用机制可能与药物抗氧化及抗炎作用有关。     

不同配比丙泊酚与瑞芬太尼全凭静脉麻醉对苏醒时间的影响

目的探讨不同剂量丙泊酚与瑞芬太尼配伍应用对全身麻醉苏醒时间的影响。方法60例ASAⅠ～Ⅱ级择期行中耳鼓室成型术病人,随机分为4组,A组(丙泊酚与瑞芬太尼配比剂量600mg∶1mg);B组(配比剂量500mg∶1mg);C组(配比剂量400mg∶1mg);D组(配比剂量300mg∶1mg)。术中丙泊酚与瑞芬太尼持续泵入维持麻醉,按照每组要求给予不同配比剂量,根据双频谱指数(BIS)值调节输注速度,维持BIS值在46～50范围内。并维持血压在(基础值±20)%范围内。观察患者苏醒时间、拔管时间及警觉/镇静评分(OAA/S)。结果苏醒时间、拔管时间A、C、D与B组比较均有显著性差异(P<0.05)。C组的苏醒时间、拔管时间最短,且术后苏醒质量评分最佳。B组次之,A组与D组较差。结论丙泊酚与瑞芬太尼400mg∶1mg剂量配比时,持续输注维持全凭静脉麻醉,苏醒最快、质量最佳。     

热应反应对感染性休克大鼠肺损伤的影响

目的 研究热应激反应对感染性休克大鼠肺损伤的影响。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只随机分为三组。分别经肺动脉注射ＮＳ０．５ｍｌ（１组）或内毒素（ＬＰＳ）１５ｍｇ．ｋｇ＾－１（Ⅱ组）或热应激处理１５分钟恢复２４小时后注射ＬＰＳ１５ｍｇ．ｋｇ＾－１（Ⅲ组）,然后取注射ＮＳ或ＬＰＳ前和后１、１．５、２、２．５、３．４小时末的动脉血分离血浆测定ＴＮＦ－α,同时用四导生理仪记录其平均肺动脉压（ｍＰＡＰ）,平均动     

2种升压药对剖宫产新生儿血气影响的Meta分析

目的:利用Meta分析方法评价苯肾上腺素和麻黄素对剖宫产新生儿血气的影响。方法:查阅中国期刊全文数据库(CNKI)、PubMed、万方数据库、维普中文科技期刊全文数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)2000-2011年3月公开发表的随机对照临床试验文献,按照纳入与排除标准选择文献、评价质量和提取数据,采用RevMan4.2软件进行Meta分析。结果:纳入10篇文献,2组新生儿脐动脉血的pH值[WMD=0.05,95%CI(0.04,0.06),P<0.00001]和氧分压(PO2)[WMD=0.52,95%CI(0.08,0.96),P=0.02]以及二氧化碳分压(PCO2)[WMD=-4.35,95%CI(-5.00,-3.69),P<0.00001]差异均有统计学意义;2组新生儿脐动脉血的剩余碱(BE)[WMD=1.38,95%C(I-0.15,2.92),P=0.08]差异无统计学意义。结论:苯肾上腺素有利于增加胎儿氧供,降低缺氧性酸中毒,值得临床推广应用。     

鼻内镜手术围术期血浆褪黑素浓度的变化及与苏醒期谵妄的相关性分析

目的探讨鼻内镜手术患者围术期血浆褪黑素浓度的变化及与苏醒期谵妄的相关性。方法择期鼻内镜手术患者43例,在麻醉诱导前及手术结束即刻分别两次抽取患者静脉血,对其苏醒期的情况进行评分并记录手术时间及拔管时间。术后用ELISA法检测血浆褪黑素浓度。结果手术结束时血浆褪黑素浓度高于诱导前（P〈0.05）;苏醒期谵妄（躁动）评分与术前褪黑素浓度（P〈0.05）有关,而与褪黑素浓度变化无关。结论鼻内镜手术后患者血浆褪黑素浓度升高,苏醒期的谵妄评分与患者术前血浆褪黑素浓度之间存在负相关,而与褪黑素浓度变化无关。     

丙泊酚对内毒素血症大鼠肾脏细胞凋亡的影响

目的 探讨丙泊酚对内毒素血症大鼠肾脏细胞凋亡的影响及机制.方法 Wistar大鼠48只,随机分为6组,每组8只:对照1(C1)组、对照2(C2)组、内毒素(L)组、丙泊酚预处理(P1)组、丙泊酚同时给药(P2)组、丙泊酚后处理组(P3)组,模型制备成功12 h 后,处死取材.应用TUNEL标记法对肾小管上皮细胞进行检测,采用免疫组化检测Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 L组肾小管上皮细胞凋亡数、Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达较C1、C2组增多,不同时间使用丙泊酚后,P1、P2、P3组较L组细胞凋亡程度减轻,Caspase-3和Bax蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增多.结论 丙泊酚可减轻内毒素血症肾组织损伤过程中细胞凋亡程度,并减少Caspase-3和Bax蛋白表达,增多Bcl-2蛋白表达.