EB病毒相关性疾病研究进展

<正>EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染为人类最常见病毒感染之一,发展中国家4岁以下儿童感染率高达90%以上,绝大部分为无症状亚临床感染,仅部分感染者临床上表现为传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM),而发达国家IM主要见于青少年,EBV原发感染后IM发生率一般约26%～74%[1-2]。EBV即人类疱疹病毒Ⅳ型     

羟基磷灰石纳米粒子体外抗白血病作用的研究

目的探讨羟基磷灰石(HAP)纳米粒子体外抗白血病作用。方法采用MTT法检测单用HAP和联合化疗药物对K562细胞的增殖抑制及化疗增敏作用,并用倒置显微镜观察药物对K562细胞形态学的影响。结果①HAP和抗癌药物对K562细胞增殖均可产生影响,在倒置显微镜下,可见全部测定孔细胞增殖均较对照孔低下。②K562细胞生长抑制率与HAP的浓度和作用时间呈明显正相关。③HAP与化疗药物合用具有更良好的抑癌效果。结论HAP纳米粒子明显抑制K562细胞生长,具有体外抗白血病作用和化疗增敏作用;HAP纳米粒子对白血病及肿瘤的治疗将具有良好的开发应用前景。     

196例传染性单核细胞增多症的并发症和实验室检查

目的 总结传染性单核细胞增多症(传单)患儿的并发症与实验室检查特点，利剩于减少临床漏诊与误诊。方法 回顾性分析1999年1月～2000年12日我院收治196例传单患儿并发症的发生情况和实验室检查特点。结果 本组83％病例发生于7岁以下儿童，并发症发生率踟％，尤以肝脏损坏最常见。眼睑水肿发生率19．8％，是传单常见的一种临床表现。并发症累及2个或2个以上系统占21％，而发生中枢系统并发症或多器官系统损坏者预后不良。变异淋巴细胞比例增高见于90％以上病例，其是诊断传单简便有效的筛查手段，但其增高程度与疾病的病情和预后无关。EBV—VCA—IgM的阳性率与病程、年龄等因素有关。结论 尽管大多教传单呈良性临床经过，且多具有较典型的临床表现，但本病并发症常见且多样，可累及多种器官、系统，影响疾病的转归和预后。对EBV-VCA-IgM阴性而临床高度怀疑该病病例可采用EBV抗原原位杂交或PCR扩增技术协助诊断。因此，提高时本病鼻废症和实验室检查特点的认识有助于减少临床误诊和漏诊。     

全反式维甲酸诱导K562细胞分化过程中线粒体铁蛋白表达的研究

目的 研究K562白血病细胞在全反式维甲酸(ATRA)诱导分化过程中线粒体铁蛋白(MtF)、运铁蛋白受体1(TfR1)和铁蛋白(Fn)mRNA表达水平的变化情况,探讨MtF在白血病细胞增殖和铁代谢方面的作用.方法 K562细胞加入ATRA(终浓度1 μmol/L)中诱导培养,分别于第1、3、5 d收集细胞,分别进行:①瑞士染色观察各时间点的细胞形态;流式细胞学检测细胞表面分化抗原CD13的表达;②Trizol法提取各时间点细胞的RNA,通过半定量RT-PCR方法 检测各时点MtF、TfR1和Fn基因的表达水平.同时设未用ATRA诱导培养的K562细胞为对照组.结果 1 μmol/L的ATRA可诱导K562细胞向粒系细胞分化,诱导培养第5 d,细胞表面CD13的表达水平增加,诱导分化率为21.2%,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).诱导分化前K562细胞即有MtF mRNA表达,但随细胞诱导时间的延长,MtF和TfR1 mRNA表达呈下降趋势,诱导分化第5 d的表达水平分别为诱导分化前的86.5%和79.2%;而Fn mRNA的表达呈上调趋势,诱导分化第5 d表达水平为诱导分化前的1.21倍.结论 ATRA诱导K562细胞向粒系细胞分化过程中,MtF和TfR1 mRNA表达下调,而Fn mRNA表达上调,这种协调变化有助于降低细胞通过TfR1介导的铁摄取,从而抑制或影响细胞增殖潜能.     

儿童急性B前体淋巴细胞白血病铁转出蛋白表达水平与其临床特征和预后相关性研究

目的探讨儿童急性B前体淋巴细胞白血病(BCP-ALL)铁转出蛋白(Fpn)表达水平与其临床特征和预后的关系。 方法选择2011年2月至2014年6月四川大学华西第二医院收治的64例BCP-ALL患儿为研究对象,纳入研究组。对其统一按照中国儿童白血病协作组(CCLG)-急性淋巴细胞白血病(ALL) 2008方案进行分型诊断和治疗。采用随机数字表法随机选择同期于本院健康体检的21例健康儿童,纳入对照组。采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别检测研究组BCP-ALL患儿初诊时及对照组受试者体检时骨髓和外周血单个核细胞的Fpn表达水平。以Fpn相对表达量(0.18)为界值进行划分,研究组Fpn相对表达量>0.18为Fpn高表达患儿,纳入Fpn高表达亚组(n＝32),Fpn相对表达量≤0.18为Fpn低表达患儿,纳入Fpn低表达亚组(n＝32)。采用Kaplan-Meier法计算研究组患儿无复发生存(RFS)率、无事件生存(EFS)率和总生存(OS)率。统计学分析Fpn表达水平与研究组BCP-ALL患儿的临床特征、免疫表型、ALL相关融合基因、早期治疗反应、临床危险度及其预后的关系。本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准。 结果①研究组与对照组受试者,以及Fpn高、低表达亚组患儿的性别构成比和年龄分布分别比较,差异均无统计学差异(P>0.05)。②研究组Fpn中位相对表达量(0.18)显著低于对照组(2.19),差异有统计学意义(U＝1 415.0,P<0.001)。③研究组患儿初诊时白细胞计数<50×10⁹/L(47例)和白细胞计数≥50×10⁹/L(17例)患儿的Fpn中位相对表达量分别为0.23和0.04,二者比较,差异亦有统计学意义(U＝399.0,P＝0.02)。分别按照初诊时中位白细胞计数(21.1×10⁹/L)和中位初诊幼稚细胞绝对计数(14.1×10⁹/L)进行划分,研究组初诊时高、低中位白细胞计数和高、低中位幼稚细胞绝对计数患儿的Fpn中位相对表达量均分别为0.09和0.28,差异均有统计学意义(U＝870.0、878.0,P＝0.02、0.03)。研究组患儿中,Fpn高、低表达亚组患儿初诊时中位白细胞计数及中位幼稚细胞绝对计数分别为15.4×10⁹/L和29.3×10⁹/L,8.2×10⁹/L和21.3×10⁹/L,差异亦均有统计学意义(U＝863.5、866.0,P＝0.018、0.019)。Fpn相对表达量与初诊时白细胞计数及幼稚细胞绝对计数均呈显著负相关关系(r_s＝－0.357、－0.366,P＝0.004、0.003)。④Fpn相对表达量与BCP-ALL患儿初诊年龄、性别,以及ALL免疫表型、融合基因类型、糖皮质激素耐药、危险度分组和早期治疗反应均无明确相关关系(P>0.05)。Fpn高、低表达亚组患儿不同临床特征的构成比比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。⑤研究组患儿的中位随访时间为13个月(2～50个月)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,Fpn高、低表达亚组患儿的3年RFS率、EFS率、OS率分别为74.4%与61.7%、68.0%与62.4%、85.0%与74.4%,组间比较,差异均无统计学意义(χ²＝0.975、0.102、0.576,P＝0.323、0.749、0.448)。 结论BCP-ALL细胞Fpn表达水平显著低于正常外周血单个核细胞,并与初诊时白细胞计数和幼稚细胞绝对计数呈显著负相关关系。这高度提示Fpn表达下调有助于细胞内铁的阻滞,满足淋巴白血病细胞旺盛代谢对铁的需求。与乳腺癌等恶性实体肿瘤一样,这可能也是淋巴白血病细胞增殖异常的重要铁代谢调控机制。     

CD1小鼠动脉导管Kca mRNA表达情况研究

目的 研究高电导钙离子激活的钾通道（Kca)mRNA在妊娠晚期胎鼠和新生CD1小鼠动脉导管（DA）上的表达情况。以期阐明Kca在小鼠DA关闭调控方面的作用。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Southern杂交方法。检测了经剖宫产分娩的妊娠d17,d18和d19CD1胎鼠，以及自然产d1新生小鼠DAKcamRNA的表达情况。结果 KcamRNA表达于胎鼠DA，以d19表达水平最高，但新生小鼠DA无KcamR-NA表达。结论 KcamRNA在胎鼠DA有表达，但出生后无表达，提示在宫内低氧环境中Kca可能是维持DA开放状态的一个重要因素。而生后无表达则可能与DA的关闭有关。     

铁剥夺对白血病细胞凋亡相关基因表达的影响

目的　探讨去铁胺 (DFO)对白血病细胞K562凋亡相关基因表达的影响及其可能分子机制。方法　采用RT PCR法分析Rb及c myc基因在RNA水平变化。结果　DFO 50 μmol/L及 1 0 0 μmol/L作用于K562细胞 2 4h及 48h ,Rb及c mycmRNA水平较空白对照组增加 (P <0 .0 5) ,且以 1 0 0 μmol/L组增加明显。 结论　铁剥夺剂使K562细胞Rb及c mycmRNA表达增加可能是其诱导白血病细胞凋亡的机制之一。     

羟基磷灰石纳米粒子对人白血病细胞K562毒性作用的研究

目的:探讨羟基磷灰石(HAP)纳米粒子体外抑制人白血病细胞K562的生长增殖作用.方法:采用MTT法检测HAP和联合应用化疗药物对K562细胞的增殖抑制及化疗增敏作用.结果:(1)HAP和抗癌药物对K562细胞增殖均有抑制作用;(2)K562细胞生长抑制率与HAP的浓度和作用时间呈明显正相关性;(3)HAP与化疗药物合用具有更良好的抑癌效果.结论:HAP纳米粒子明显抑制K562细胞生长,具有体外抗白血病作用和化疗增敏作用.     

儿童急性早幼粒细胞性白血病临床特点和预后分析

目的分析儿童急性早幼粒细胞性白血病（acute promyelocytic leukemia,APL）的临床特点及患儿的生存情况。方法回顾性总结分析了四川大学华西第二医院血液科2000年10月至2007年1月收治的31例APL患儿的临床特点和生存情况。结果本组患儿平均年龄为7.8岁,男女患儿性别比为1.38∶1.00。其主要临床表现包括出血（96.8%）、肝大（61.3%）、发热（58.0%）、贫血（55.0%）、脾大（41.9%）和感染（35.0%）等。26例患儿接受正规化疗,随访时间为4-62个月,中位随访时间为36个月。本组患儿完全缓解率（CR）为88.5%。完全缓解率高低与初诊时外周血WBC计数和年龄相关。Kaplan-Meier曲线生存率分析表明,本组患儿预期1年、3年和5年无事件生存率（event-free survival,EFS）分别为84.6%,72.4%和54.8%。结论出血是儿童APL最常见和显著的临床表现,发生率高达97%。经全反式维甲酸结合蒽环类药物为主的化疗方案正规治疗,本组患儿完全缓解率与国内外文献报道结果相当,但生存率（尤其是长期生存率）低于国外文献的报道结果。根据患儿年龄、初诊时外周血WBC计数和幼稚细胞比例等临床预后因素,采用个体化治疗方案,对于提高生存率具有重要指导意义。     

结缔组织生长因子与LPS致肝纤维化的关系

目的：研究结缔组织生长因子(CTGF)表达水平与LPS致大鼠肝纤维化的关系。方法：体外培养条件下,LPS处理大鼠肝星状细胞(HSC),半定量RT-PCR方法检测不同时点不同LPS浓度处理的HSC FN mRNA和CTGF mRNA的表达水平。结果：LPS不仅短时间内即能上调HSC FN mRNA和CTGF mRNA表达,而且LPS与CTGF mRNA的表达量呈一定的剂量效应关系。恒定LPS作用浓度(1μg／ml)下,CTGF mRNA的表达水平随LPS作用时间的增加而增加,LPS作用24h-48h后CTGF mRNA的表达水平最高。结论：LPS是一个重要的致纤维化因素,可同时上调HSC的FN mRNA和CTGF mRNA表达。CTGF在LPS介导的肝纤维化的病理生理过程中可能发挥着重要的作用。