大蒜素体外抗疟作用的研究(摘要)

目的研究大蒜素对恶性疟原虫体外生长活性的影响.方法用新鲜配制或储存的疟疾完全培养基大蒜素稀释液在不同浓度(100μg/mL～5μg/mL)处理恶性疟原虫,实验过程中在12h,24h换液或者不换液.分别作用12h,24h和48h后,检测虫体感染率的变化分析药物的作用效果.同时以大蒜素处理正常红细胞观察对虫体宿主细胞的影响.结果以新鲜配制的大蒜素处理疟原虫时,作用12h后50μg/mL的浓度即可清除虫体,当作用48h后在低至10μg/mL的浓度也可杀灭原虫.而使用储存大蒜素换液或者新鲜配制的大蒜素不换液则需要较高的浓度.大蒜素处理正常红细胞时,在高于50μg/mL的浓度对宿主红细胞有破坏作用,而该浓度下虫体生长可被有效抑制.结论大蒜素在体外具有强烈的抗疟作用.30μg/mL是可以有效抑制疟原虫生长但对宿主红细胞没有损伤的适宜浓度.     

适于标记的HFRS病毒组特异性McAb的建立及其应用

用陕西81-14A株HFRSV,免疫BALB/c小鼠,取该鼠脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得分泌抗HFRSV抗体的C_4株杂交瘤细胞系。C_4株McAb与我国各地的28株及朝鲜的76-118株、Seoul株HFRSV均产生免疫反应,表明是HFRSV组特异性扩体,并适用于荧光素及辣根过氧化物酶标记。经初步应用,效果满意。     

用单克隆抗独特型抗体检测肾综合征出血热（HFRS）病人外周血淋巴细胞表面特异抗原受体的临床意义

用抗独特型抗体(Ab2)检测细胞表面抗原受体是将Ab2作为探针用于免疫学检测而出现的新的研究方法。本文在制备了HFRS病毒抗独特型抗体的基础上应用单克隆抗独特型抗体(1B1)作间接免疫荧光试验，检测了HFRS病人外周血淋巴细胞表面特异抗原受体。首先，采取病人外周肝素抗凝血用淋巴细胞分离液按常规方法分离淋巴细胞，将淋巴细胞用RPMI 1640不完全培养液离心洗一次后弃上清，将沉降细胞重新悬浮后调至0．1ml并加入5％小牛血清．混匀，取约10—30μl加在预置于离心细胞沉淀器的玻片上，800rpm离心5分钟，取下玻片待干燥后加丙酮-福尔马林固定液固定30秒，水洗，吹干。     

HBV-TRL重组腺病毒载体的抗病毒活性

目的:观察有linker插入的乙肝病毒靶向核糖核酸酶(HBV-TRL)重组腺病毒载体(RAd)对HBV复制的抑制作用.方法:以第四军医大学病原生物学教研室已构建的pc DNA3.1(-)/TRL,TR,TRmut,HBVc和hEDN为基础,分别将目的片段TRL,TR,TRmut,HBVc和hEDN插入腺病毒穿梭质粒pDC316,与辅助质粒共转染HEK293细胞,重组产生含各目的片段的复制缺陷型腺病毒,即RAd/TRL,TR,HBVc和hEDN,经鉴定、扩增及滴度测定.其中RAd/TRL,TR为实验组,其余重组腺病毒为对照组.将获得的重组腺病毒感染HepG2.2.15细胞后通过间接免疫荧光检测重组腺病毒在细胞中的表达,并应用荧光定量PCR法检测细胞上清中HBVDNA含量.同时,应用MTT比色法检测细胞的代谢活性.结果:成功获得了含TRL,TR,HBVc和hEDN等不同目的片段的复制缺陷型腺病毒载体.RAd/TRL在HepG2.2.15细胞中得到有效表达,并且明显降低了细胞上清HBV-DNA含量,与RAd/TR相比(P=0.0266,P＜0.05),与其他对照组相比(P＜0.01).MTT比色分析表明细胞代谢活性未受到影响(P＞0.05).结论:成功地构建了RAd/TRL,其有效表达成功地抑制了HBV的复制.     

DG-Ⅰ型ELISA检测仪推广学习班在我校召开

根据总后(81)卫科通知,1983年5月23日至25日在我校举办由403—3室与华东电子管厂共同研制的ELISA检测仪推广学习班。军队及地方有32个单位的代表参加,共同鉴定了仪器的各种性能。一致认为该仪器具有快速、灵敏度高、重复性好、性能稳定、携带轻     

酶标单克隆抗体检测肾综合征出血热病毒抗原ELISA法的初步研究

本文用辣根过氧物酶标记了肾综合征出血热(HFRS)病毒单克隆抗体,建立了ELISA双单克隆抗体夹心法,对该法在HFRS病毒抗原检测及单克隆抗体特异性分析中的应用作了探讨。结果表明,本法具有良好的特异性和重复性。用本法对Vero—E_6细胞培养上清中的HFRS病毒抗原进行了检测。在正常Vero—E_6细胞感染HFRS病毒后,第8天即出现HFRS病毒3H_4抗原可疑阳性;至第14天可测出抗3H_4的HFRS病毒抗原,阳性率达5/9;第16—18天,阳性率达9/9。抗体特异性分析表明,在所用的8种单克隆抗体中,3H_4、3H_7、3D_(10)三种单克隆抗体具有相同或极为相近的抗体特异性。     

κ阿片受体在抗缺血/再灌注大鼠心律失常中的作用机制

目的研究κ阿片受体在抗缺血/再灌注性心律失常中的作用机制,并初步探讨κ阿片受体选择性激动剂U50488H(U50)对大鼠血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)和一氧化氮(NO)的调控作用。方法实验大鼠随机分为7组,即对照组(Control),缺血再灌注组(I/R),U50+I/R组,PTX组(pertussis toxin,百日咳毒素,G i/o蛋白抑制剂),G lib组(glibenc lam ide,KATP通道阻断剂),Che组(chel-erythrine,PKC选择性抑制剂)和Gen组(gen iste in,酪氨酸激酶TK抑制剂),观察心律失常发生情况并计算心律失常评分;检测血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)和一氧化氮(NO)水平。结果①与I/R组相比,U50488H+I/R组大鼠心律失常评分明显下降,该作用可被选择性κ阿片受体阻断剂nor-BNI阻断。②分别提前给予PTX,glibenc lam ide和chelerythrine后,U50488H的抗心律失常作用可被明显减弱或阻断;③提前给予gen iste in对U50488H的抗心律失常作用无明显影响。④与正常大鼠血浆AngⅡ、ET和NO含量比较,I/R组血浆AngⅡ和ET含量明显增加,NO含量明显降低;给予U50488H处理后,U50+I/R组大鼠血浆AngⅡ和ET含量比I/R组降低,而NO含量则明显升高。结论①κ阿片受体介导了抗缺血/再灌注性心律失常的作用,该作用的信号转导途径可能涉及G i/o、PKC和KATP等通道。②激活κ阿片受体还可能通过下调大鼠血浆AngⅡ和ET或上调NO等因子的水平来发挥抗心律失常作用。     

陕西及其周边地区肺吸虫感染情况调查分析

目的:为了解陕西及其周边地区肺吸虫病的流行特征,做好肺吸虫病的防治工作。方法:采用皮内试验及酶联免疫试验对365例疑似肺吸虫病人进行流行病学分析。结果:365例疑似病人中有92例为皮试阳性,77例为酶联免疫吸附试验阳性,其中男61例,占总确诊病例数的79.22%,是女性患者的4倍(P<0.05),各年龄组阳性率以儿童组最高为25.66%,农村人口为89.60%,约为城镇人口的9倍。结论:陕西及其周边地区男性及儿童肺吸虫病发病率高,建议有关部门应加强对农村地区肺吸虫病的防治。     

以恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1的17区片段基因为基础构建的复合核酸疫苗候选质粒

目的 :构建以恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1的 17区基因为基础的复合核酸疫苗。方法 :将恶性疟原虫 FUP株 MSP1的 17区基因片段与包含若干个内源性和外源性 T细胞位点相应的基因片段相连 ,构成复合基因 ( hybrid gene,HG) ,将其分别克隆入非分泌性真核表达载体 [VR10 12和 p CDNA3.1( - ) ]和经改建后的分泌型载体 VR10 12 /TPA中 ,通过 PCR和酶切鉴定重组克隆。结果和结论 :经鉴定复合基因正确地克隆入真核表达载体 ,成功地构建了 VR10 12 /HG,p CD-NA3.1/HG和 VR10 12 /TPA/HG。结论 :为探讨疟疾核酸疫苗的效果及 T细胞位点的作用打下了基础。