肾综合征出血热病毒(HFRSV)抗独特型抗体免疫调节初探

本文应用一株HFRSV抗独特型抗体(Ab_2)观察其对HFRSV感染BALB/c小鼠脾细胞体外增殖的影响,以及部分淋巴因子在其中的作用,旨在探讨抗独特型抗体对免疫应答的调节机理。从感染HFRSV小鼠脾细胞中分离制备单个核细胞悬液体外培养,加入不同剂量Ab_2,用~3H-TdR掺入法测定脾细胞增殖水平。结果Ab_2可明显抑制感染小鼠脾细胞在体外的增殖,并呈剂量依赖关系及具有独特型特异性。早期加入EL-4细胞上清或rHuIL-2可完全逆转此抑制作用,且具有剂量依赖和时间相关性。EL-4细胞上清含有IL-2和IL-6。对抗独特型抗体产生抑制作用的机制进行了讨论。     

HBV靶向核糖核酸酶真核表达载体的构建及其在2.2.15细胞内的表达

目的 构建人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素（hEDN)与乙肝病毒核心蛋白（HBVc)的融合真核表达载体（该融合蛋白即为构建的靶向核糖核酸酶），抑制乙肝病毒在细胞内的复制。方法 分别从HL－60GGG细胞和2．2．15细胞中提取总RNA，用RT－PCR特异性扩增hEDN及HBVc编码基因，将hEDN和HBVc克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),hEND克隆入原核表达载体pGEX4T-1，并以纯化的原核表达产物免疫Balb/c小鼠，制备特异性抗体。用免疫荧光法检测pcDNA3.1(-)/HBVc-hEDN在转染2．2．15细胞内地表达。结果 成功地构建了hDNA和HBVc的真核融合表达载体。，并在2．2．15细胞中较高效地表达。结论 pcDNA3.1(-)/HBVc-hEDN的构建和在2．2．15细胞内的表达，为探索乙型肝炎的治疗开辟了新思路。     

约氏疟原虫保护性抗原对鼠疟红内期保护性免疫调节作用的研究──Ⅱ．53kD抗原细胞增殖反应及血清抗体与保护作用的关系

用约氏疟原虫（Ｐ．ｙ）裂殖子抗原免疫ＥＡＬＢ／ｃ小鼠，再用约氏疟原虫非致死株１０５ＰＲＢＣ／只攻击。免疫组小鼠血中原虫推迟出现，提早消失，原虫率明显低于未免疫小鼠和佐剂对照小鼠；佐剂对照组仅原虫高峰推迟出现，与易感小鼠无明显差异。抗原免疫小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞对抗原特异性和非特异性增殖反应明显高于其它两组，原虫攻击后增殖反应普遍受到抑制，但免疫小鼠比其它两组恢复快，感染后１８天即恢复至正常水平。     

伯氏疟原虫类巨噬细胞移动抑制因子在红内期的表达

目的制备小鼠抗伯氏疟原虫类巨噬细胞移动抑制因子(PbMIF)的抗体,并检测PbMIF在伯氏疟原虫红内期的表达。方法用纯化的PbMIF蛋白免疫BABL/c小鼠,制备小鼠抗PbMIF的抗血清。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体的效价,用免疫印迹(Western blotting)-二氨基联苯胺(DAB)底物显色法检测抗体的特异性。采用免疫印迹增强化学发光(ECL)的方法,用上述制备的抗血清检测PbMIF在红内期伯氏疟原虫的表达情况。结果ELISA测得小鼠抗PbMIF抗体的效价>1∶106,Western blotting显示该抗体可与原核表达的PbMIF蛋白特异性结合。ECL结果表明感染的红细胞中存在PbMIF。结论成功制备了小鼠抗PbMIF的抗体。红内期伯氏疟原虫表达PbMIF。     

免疫—PCR检测HBsAg方法的建立及临床应用

目的：建立一种免疫聚合酶链反应技术,方法：与ELISA相比较,对其敏感性,特异性,重复性进行试验研究。结果：该法检测HBsAg最低限是1pg/ml,敏感性是ELISA法的800倍,且特异性强,重复性好,应用此方法对51例乙肝患血清中的HBsAG进行检测,阳性率为17．6％（9／51）,结论：此方法敏感性高,特异性强,重复性好,对乙肝的诊断,治疗及预后均有重要意义。     

浅谈在医学寄生虫学教学中的素质教育

为了激发学员学习医学寄生虫学的积极性,加强素质教育,提高教学质量,对医学寄生虫学的教学模式进行了改进与尝试。其内容包括增加讨论课、丰富课件内容、采用互动式教学模式等。通过期末座谈显示,学员增强了对医学寄生虫学的学习兴趣,同时综合分析能力也得到了提高,并在学习过程中逐步形成了理论联系实际,学以致用的好习惯,为日后的临床工作打好了基础。     

约氏疟原虫53kDa抗原对小鼠的保护性免疫作用

目的 :探讨白细胞介素 - 2 ( IL- 2 )与约氏疟原虫 ( P.y)纯化抗原 53k Da抗原的免疫作用。方法 :用 53k Da抗原加福氏完全佐剂 ( FCA)腹腔注射免疫 BALB/ c小鼠 3次 ,每鼠再用 P.y非致死株 10 ⁵感染红细胞攻击。观察免疫过程中和原虫攻击后第 6、12、18d脾细胞的刀豆球蛋白( Con A)或抗原体外诱生的IL - 2水平变化及其与血中原虫率的关系。结果 :用 53k Da抗原免疫鼠 ,免疫结束时的 IL- 2诱生水平明显高于未免疫对照组 ,原虫攻击感染后免疫组的原虫率峰值为1.9% ,明显低于佐剂对照组的 2 5.4 %和未免疫组的 2 6.1%。结论 :P.y 53k Da抗原可产生明显的保护性免疫。     

我国恶性疟原虫地理株SSUrDNA特定序列的变异分析

采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术，分别从我国安徽、海南及云南三省疟区来源的恶性疟原虫株基因组ＤＮＡ中，扩增出该虫小亚单位核糖体核糖核酸（ＳＳＵｒＲＮＡ）基因特定片段，长约５７０ｂｐ，将其插入Ｍ１３ｍｐ１８和Ｍ１３ｍｐ１９载体中，以双脱氧末端终止法测序。读序结果分析表明，恶性疟原虫地理株间及与巴西ＩＭＴＭ２２株７Ｇ８克隆间，ＳＳＵｒＤＮＡ特定片段序列具有高度同源性，差异仅表现为个别碱基置换、插入或缺失所致的点突变，且均发生在可变区中，其发生频率亦无明显差别。     

云南省间日疟原虫SSUrRNA基因片段的体外扩增、克隆及序列分析

根据已知间日疟原虫、其它相关原虫及人小亚单位核糖体核糖核酸(SSUrRNA)基因序列,借助计算机程序分析,设计一对寡聚核苷酸引物。采用聚合酶链式反应(PCR)技术,从云南省两例间日疟患者血样DNA抽提物中,均扩增出长约641个碱基对(bp)的SSUrRNA基因特定片段;双脱氧链末端终止法测序结果表明,两份样本扩增片段DNA序列完全相同,但与背景序列比较,在第269位出现碱基置换由G变为A,而在第630位则缺失一碱基C,从而导致该两处限制性内切酶位点的改变。