肿瘤坏死因子与疟性贫血

本文以化学发光法（ＣＬ）、诱化学发光法（ＩＣＬ）、红细胞变形性（ＥＤ）检测等方法研究了感染伯氏疟原虫ＡＮＫＡ株的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠在注射重组肿瘤坏死因子（ｒＴＮＦ）以后发生严重疟性贫血时，其血浆中活性氧（ＲＯＳ）、相关自由基与ＥＤ及ＥＤ与疟性贫血间的关系。结果发现在严重疟性贫血时动物血浆中ＲＯＳ及相关自由基水平明显增高，ＥＤ明显降低。使用抗氧化剂可以明显改善上述过程而使血红蛋白（Ｈｂ）指数回升。因此认为，疟原虫感染时宿主体内过量肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的产生可使吞噬细胞释放大量ＲＯＳ及相关自由基，血浆中这类物质的大量聚集使红细胞变形能力受到破坏，这样，红细胞很易于被机体的红细胞清除系统所清除，这可能是疟性贫血发生和加重的又一主要途径。     

带有蛋白转导域的靶向核糖核酸酶对乙型肝炎病毒复制的影响

研究表达并纯化了带有蛋白转导域HIV-TAT的靶向核糖核酸酶，将其加入到2．2．15细胞的培养上清液中，观察其对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响及对细胞有无毒性，以使为靶向核糖核酸酶用于临床治疗HBV感染奠定基础。     

靶向核糖核酸酶对乙型肝炎病毒复制的作用

通过定量检测上清液中的乙型肝炎e抗原(HBeAg)和乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)，进一步研究靶向核糖核酸酶对HBV复制的影响。     

重组腺病毒介导的HBV核心蛋白和hEDN融合蛋白基因在小鼠肝脏的表达

目的：使HBc-hEDN基因重组腺病毒载体(AdHBc-hEDN)及其对照载体AdhEDN在小鼠肝脏获得表达．方法：将体外扩增获得的高滴度AdHBc-hEDN和AdhEDN经尾静脉注射感染小鼠，并用免疫组化的方法检测AdHBc-hEDN和AdhEDN在小鼠肝脏中的表达．结果：重组腺病毒AdHBc-hEDN和AdhEDN在小鼠肝脏均获得了阳性表达．结论：HBc-hEDN基因重组腺病毒裁体在正常小鼠肝脏的成功表达为其在乙型肝炎小动物模型体内的抗病毒功能研究奠定了良好的基础．     

聚合酶链式反应扩增间日疟原虫核糖体核糖核酸基因片段

疟疾的大规模调查和监测手段已从镜检血中原虫,血清学试验检测抗体,免疫学试验检测抗原,发展到核酸分子杂交。核酸分子检测的特异性强,重演性好,可同时检测大量样本,但国外学者应用恶性疟原虫DNA探针现场研究表明其敏感度中等,低原虫血症者假阴性率高。间日疟原虫是我国最常     

测定HFRS患者血清中特异性抗体方法初探

作者建立了检测HFRS患者血清特异抗体的捕获ELISA和阻断ELISA,并与间接酶染色和间接免疫荧光抗体技术进行了比较。四种方法的阳性检出率相同。血清的几何平均滴度,捕获ELISA比IFAT高32倍;阻断ELISA、酶染色及IFAT无显著差异。但应用不同抗原,ELISA检测血清滴度亦有不同。     

人抗HBsAg单链抗体-Tat融合基因的构建、表达及表达产物的活性鉴定

目的: 构建人抗HBsAg单链抗体-Tat蛋白转导结构域(ScFv-Tat)融合基因,在大肠杆菌中进行表达,并分析ScFv-Tat融合蛋白的活性及内化情况. 方法: 设计引物扩增人抗HBsAg单链抗体基因,克隆入含有蛋白转导结构域Tat序列的原核表达载体pTAT-HA,在大肠杆菌BL2l(DE3)LysS内诱导融合蛋白表达. 表达产物用SDS-PAGE及Western blot鉴定,用亲和层析柱纯化. 间接ELISA和ELISA竞争抑制实验分析ScFv-Tat融合蛋白的亲和活性,将纯化蛋白与HBsAg阳性或阴性肝癌细胞共孵育后,免疫细胞化学染色分析ScFv-Tat融合蛋白的结合及内化情况. 结果: 成功地构建了人抗HBsAg单链抗体-Tat融合蛋白的原核表达载体,在IPTG诱导下获得了表达,表达的ScFv-Tat融合蛋白具有与HBsAg结合的活性,并且能够特异性内化入HBsAg阳性肝癌细胞. 结论: 单链抗体与Tat蛋白转导结构域融合后,实现了ScFv-Tat融合蛋白的特异性内化,为该单链抗体的进一步应用奠定了基础.     

提高免疫酶技术检测HFRS病毒抗原敏感性的初步研究

以磷苯二胺为辣根过氧化物酶底物显色剂的ELISA双抗体夹心法检测HFRSV抗原中,用四甲基联苯胺替代邻苯二胺,用生物素-抗生素蛋白的BA-ELISA和高效价抗HFRSV的McAb进行McAb-ELISA,使检测抗原的敏感性分别提高4倍以上。如果四甲基联苯胺与BA-ELISA或与McAb-ELISA联合应用,则比原ELISA敏感16倍以上。