结核分枝杆菌Rv2450基因的克隆、表达及纯化

目的:克隆结核分枝杆菌(Mtb)Rv2450基因,序列测定正确后进行融合表达、纯化.方法:采用聚合酶链反应(PCR)从Mtb H37Rv基因组中扩增出Rv2450编码基因,序列测定正确后,亚克隆到融合表达载体pPro-EX HT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达带6个组氨酸残基的Rv2450蛋白,在变性条件下对目的蛋白进行亲和层析纯化.结果:得到融合6个组氨酸残基的Rv2450蛋白纯度大于90%.结论:构建了Mtb Rv2450基因的重组表达载体,并获得了高纯度的融合表达蛋白.     

结核分枝杆菌furB基因的克隆、表达和纯化

目的: 从H37Rv基因组中扩增furB并高效表达和纯化. 方法: 用PCR技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增furB序列,将其与pGEM-T-Easy载体连接转化E.coli DH5α,构建重组克隆载体pGEM-T-Easy/furB,测序正确后将目的基因片断克隆入pQE-80L原核表达载体并转化E.coli DH5α,IPTG诱导目的蛋白表达. 经Western blot鉴定目的基因与(His)6融合表达,将已表达的蛋白质通过Ni2 -NTA亲和色谱柱进行纯化. 结果: PCR得到结核分枝杆菌furB,测序结果与Genbank中报道的完全一致. SDS-PAGE显示,在Mr为15.0×103处有相应的蛋白质表达条带,Western blot鉴定为(His)6融合表达蛋白. 经Ni2 -NTA亲和色谱柱进行纯化后可得到纯化的蛋白. 结论: 成功克隆了铁调节蛋白基因furB序列,并在E.coli DH5α高效表达,亲和层析后获得了纯化目的蛋白.     

上海市社区健康驿道评估与标准化建设方案探讨

目的通过对上海市七宝镇健康驿道的评估,探讨健康驿道建设的标准化方案。方法采用观察法对七宝镇的4条健康驿道和3条准健康驿道进行实地观察,并通过拦截式调查,对177名居民进行问卷调查。结果健康驿道整体情况优于准健康驿道。使用者以中、老年人为主,分别占58.8%和33.0%,男性比女性稍少;使用时间方面,工作日稍少于休息日,早上时段最多,占41.6%。使用人次与照明、可用性和清洁情况以及活动组织情况均呈正相关。根据观察法和问卷调查的结果,提出社区健康驿道标准化建设方案的初步设想。结论健康驿道作为群众性的社区健身设施具有一定的推广价值,结合社区实际情况,以标准化方案作为参考,有利于建设高质量的社区健康驿道。     

甲状腺功能亢进症合并Gitelman综合征一例

患者男,22岁,于1998年开始有怕热、多汗、心悸,查甲状腺激素水平增高,诊断为"甲状腺功能亢进症(甲亢)",一直口服"甲巯咪唑".2006年起常感下肢乏力,于2006年7月第一次就诊,查血钾为1.8 mmol/L,游离三碘甲腺原氨酸(FT3)9.43 pmol/L,游离甲状腺素(FT4)25.18 pmol/L,促甲状腺素(TSH)0.01 mU/L,TGAb 71%,TPOAb 60%,诊断为"甲亢、低钾血症",予以"甲巯咪唑"口服,静脉及口服补钾后症状改善,血钾升至3.7 mmol/L.病程中经常有下肢乏力感.2007年4月因低钾血症第二次就诊,查血钾为1.8～2.4 mmol/L,CO2CP 29.2～31.0 mmol/L,血钠140～141 mmol/L,血氯90.6～93.2 mmol/L,血镁0.49～0.53 mmol/L,血钙2.57～2.84mmol/L,血磷1.33 mmol/L,尿常规pH值7.0～8.0.     

师生共建课堂在医学遗传学实验教学中的应用

传统的基础医学实验课教学模式存在诸多局限.为了提高基础医学实验课的教学质量,文章构建了一种新型高效的共建课堂教学模式,并在医学遗传学实验教学实践中考查其教学效果.实践发现,基于网络平台的师生共建课堂新模式能够实现师生交互,提高学生参与度,全方位提升学生的综合能力,培养医学生对于基础研究的兴趣和自主实验能力,为健康中国战...     

高血压性心脏病患者血浆脂联素水平的变化

目的探讨高血压性心脏病患者血浆脂联素水平的变化,为早期预防高血压心脏靶器官损害提供理论依据。方法选择2007年10月至2008年5月在徐州市中心医院门诊或心内科住院的55例原发性高血压患者,分为两组：高血压组30例,高血压心脏病组25例。对照组为同期该院体检中心健康体健者40例。采用酶联免疫吸附法测定血浆脂联素含量。结果血浆脂联索：高血压组（1050±310）ng／ml显著低于正常组（2050±450）ng/ml（P〈0．01）,高血压心脏病组（650±136）ng／ml显著低于高血压组（P〈0．01）与正常组（P〈0．01）。结论血浆脂联素水平的变化与原发性高血压的病情程度密切相关。     

超声测量气道参数预测困难面罩通气的准确性

目的评价超声测量气道参数预测困难面罩通气(DMV)的准确性。方法择期行气管插管全麻手术患者96例, 年龄18～90岁, BMI 16～39 kg/m2, ASA分级Ⅰ或Ⅱ级。术前1 d时行临床气道评估, 记录改良Mallampati分级、甲颏间距和上唇咬合试验分级。麻醉诱导前30 min采用超声测量髁状突活动度、舌纵截面积及舌横径, 计算舌体积(舌纵截面积与舌横径的乘积)。麻醉诱导后行面罩通气, 面罩通气困难分级≥Ⅲ级为DMV, 根据是否发生DMV分为2组:非DMV组 (NDMV组)和DMV组。将组间差异有统计学意义的临床气道评估指标和超声测量气道参数与DMV行Spearman相关分析;采用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评价各指标预测DMV的准确性, 确定临界值, 计算准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果改良Mallampati分级、上唇咬合试验分级、舌纵截面积、舌横径、舌体积与DMV呈正相关, 甲颏间距和髁状突活动度呈负相关(P<0.05)。超声测量髁状突活动度和舌体积预测DMV的AUC分别为0.898、0.862, 界值分别为1.19 cm、99.94 c...     

肺泡灌洗液肝素结合蛋白在细菌性肺炎诊断与鉴别诊断中的临床价值

目的:探讨支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中肝素结合蛋白(Heparin binding protein, HBP)检测在细菌性肺炎诊断与鉴别诊断中的临床价值。方法:选取2019年1月至2021年1月安徽医科大学第四附属医院呼吸科收治的88例肺炎患者,其中细菌性肺...     

妊娠期母体胰岛的适应性变化

妊娠时随着胎儿对母体物质需求的增加,孕妇出现了糖代谢的改变以及生理性胰岛素抵抗。为了适应胰岛素需求的增加,妊娠期母体胰岛在结构和功能上都会发生相应的改变,包括葡萄糖刺激下胰岛素分泌能力的增强,以及伴随的葡萄糖刺激阈值的下降。此外,还出现母体胰岛素合成增多,胰岛细胞增殖以及胰岛容积的增加。这些变化与妊娠期激素特别是胎盘生乳素(HPL)、催乳素(PRL)及生长激素(GH)等密切相关。不仅如此,脂肪细胞因子、炎症因子、细胞因子信号传递抑制体(SOCS)、胰岛血管内皮细胞等因素对妊娠期母体胰岛的适应性变化也会产生影响。     

血液透析患者家庭照顾者生活质量量表汉化及信效度检验

目的 汉化血液透析患者家庭照顾者生活质量量表,检验其信效度。 方法 采用Brislin模式将英文版血液透析患者家庭照顾者生活质量量表翻译成中文,采用中文版量表对738名血液透析患者家庭照顾者进行调查,检验量表信效度。 结果 中文版量表各条目水平的内容效度指数为0.848～1.000,量表水平的内容效度指数为0.935,探索性因子分析提取5个公因子,共35个条目,累积方差贡献率为64.172%。验证性因子分析的模型适配度良好。总量表Cronbach′s α系数为0.831,5个公因子的Cronbach′s α系数为0.694～0.821,重测信度为0.886。中文版量表总分与ZBI照顾者负担量表总分相关系数为-0.821（P＜0.05）。 结论 中文版血液透析患者家庭照顾者生活质量量表具有较好的信效度,适用于我国血液透析患者家庭照顾者生活质量测量。