多种特殊状态下关节软骨缺损修复的组织工程技术

文题释义： 生长板：是位于儿童长骨末端的软骨组织结构,生长板中的软骨细胞可不断增生、成熟、肥大并发生骨化过程,使长骨增长。当长骨生长至一定程度,生长板软骨逐渐被成熟骨组织取代,长骨至此也停止生长。 特殊状态：文章提及的特殊状态即指关节软骨缺损的临床治疗中常见的阻碍因素,即全层软骨缺损及骨软骨缺损、生长板缺损、负重区软骨缺损、炎症状态下(骨性关节炎、风湿性关节炎)的软骨缺损。 背景：应用组织工程学技术可获得良好的关节软骨再生,但多为生理状态下小面积缺损的单纯修复。然而临床上的软骨缺损常伴随骨性关节炎、类风湿性关节炎等基础疾病,且缺损的位置、范围、深度均不确定,给软骨组织修复带来了很大挑战。 目的：总结不同位置和炎症状态下软骨缺损的修复方式。 方法：检索PubMed数据库和CNKI数据库,英文检索词为“cartilage defect regeneration,osteochondral,growth plate,weight-bearing area,inflammatory”,中文检索词为“关节软骨缺损,骨软骨,生长板,负重区,炎症”,检索建库至2019年3月发表的相关文献。共检索到相关文献209篇,按照纳入与排除标准,最终纳入86篇文献进行总结。 结果与结论：针对各种特殊状态下的关节软骨缺损,其修复目标和策略是不同的：全层软骨和骨软骨结构缺损多采用具有多层结构的支架,旨在修复软骨特有的分层结构及软骨下骨结构,同时避免新生软骨内异位骨化的问题;生长板缺损的修复关键在于避免长骨成熟后发生畸形,因此在修复支架内应添加胰岛素样生长因子、骨发生形态蛋白7等生长因子,以持续刺激生长板的修复并发挥骨生长的生理功能;负重区软骨修复则需要修复支架具有良好的力学性能,负重时不会发生严重形变及结构破坏,同时新生的软骨组织具有足够的力学强度以支撑持续的纵向压力和磨损;炎症状态下的软骨缺损则要同时治疗炎症与软骨缺损,间充质干细胞的引入可同时发挥免疫调节及组织再生功能,以使疾病达到彻底治疗的目标。ORCID: 0000-0001-9443-8158(陈劲松) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

改良原代培养方法提高人胎盘绒毛膜间充质干细胞的产量

目的 建立获得大量P0代人胎盘绒毛膜间充质于细胞(hpcMSCs)培养方法.方法 从胎盘绒毛膜分离出hpcMSCs,经初次培养和再次培养7d后,将原培养瓶中培养基、未贴壁组织和冲洗生理盐水离心后分别进行再次培养和第3次培养.用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8测定细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面标记,成脂、成骨诱导分化试剂盒鉴定细胞的分化潜能.结果 获得的hpcMSCs均为成纤维细胞样贴壁细胞,每例胎盘获得(25.54±3.38)×106个P0代细胞,初次培养、再次培养和第3次培养获得的细胞数分别为(11.73±2.09)×106、(11.12±1.42)×106和(2.69±0.71)×106,培养时间分别为(12.00±0.64)d、(8.87±0.63)d和(12.33±0.80)d.再次培养时间和获得细胞数同初次培养、第3次培养差异均有统计学意义(均P＜0.05),初次培养和第3次培养的时间差异无统计学意义(P＞0.05),但第3次培养有时间延迟的趋势.3次培养的每培养瓶获得细胞数分别为(1.12±0.15)×106、(2.10±0.16)×106和(1.04±0.16)×106,再次培养获得细胞数同初次培养、第3次培养差异均有统计学意义(均P＜0.05),初次培养和第3次培养获得细胞数差异无统计学意义(P＞0.05),但第3次培养有细胞数量减少的趋势.3次培养的细胞生长曲线和表面标记的表达率无差异,成骨、成脂诱导分化检测均呈阳性.结论 一份绒毛膜标本,通过3次培养,获得的P0代hpcMSCs细胞数量比初次培养翻倍,本方法可为再生医学提供足够的种子细胞.     

儿童重型β-地中海贫血同胞脐血移植后的免疫重建

目的分析儿童重型β-地中海贫血同胞脐血移植后的免疫重建情况,评价同胞脐血移植治疗重型β-地中海贫血的效果。方法11例患者移植后均为稳定骨髓植入,分别于移植后1、3、6、12、18～24、36～48个月检测患者外周血T淋巴细胞亚群（CD3^＋细胞、CD3^＋CD4^＋细胞、CD3^＋CD8^＋细胞）、B淋巴细胞（CD19^＋细胞）和自然杀伤细胞（CD3-CD56^＋NK细胞）数量,动态分析脐血移植后患者的免疫重建。结果14例患者脐血移植后11例获得植入,植入率为78．6％。11例患者移植后中性粒细胞绝对计数≥0．5×10^9／L、血小板计数≥20．0×10^9／L和≥50．0×10^9／L的中位时间分别为17、48、53d。总淋巴细胞和T淋巴细胞亚群在12个月内均恢复正常;B细胞和NK细胞分别在6个月和3个月内恢复正常。B细胞和NK细胞的恢复比T细胞快。11例患者发生急性移植物抗宿主病（GVHD）,其中I度急性GVHD9例（81．8％）,Ⅱ度急性GVHD2例（18．2％）。结论同胞脐血移植是根治重型β-地中海贫血的有效方法。     

复杂性髋臼骨折合并C型骨盆骨折的手术治疗探讨

目的探讨复杂性髋臼骨折合并C型骨盆骨折的手术治疗方法。方法通过对2002年3月~2007年11月间髋臼骨折合并骨盆骨折的病人进行分类总结,按照骨盆骨折Tile分类法和髋臼改良Judet-Letourol分类法,共有13例复杂性髋臼骨折合并C型骨盆骨折,都通过积极手术前处埋后,择期行联合切口进行切开复位钢板、螺钉内固定,平均随访治疗2.4年(0.5~4年)。结果 13例病人中除1例病人部分伤口延期至术后20天愈合外(脂肪液化),其余病人伤口均一期愈合,有2例髋臼骨折复位欠佳,术后随访0.5~4年,有1例病人创伤性髋关节炎疼痛较频繁、跛行外,另有2例只有疼痛症状,无跛行,镇痛治疗后症状缓解,有5例病人感患侧酸痛,能忍受,不影响工作及生活,有5例病人感觉与受伤前无明显差别。结论积极术前准备,尽早行骨折切开复位内固定是治疗复杂性髋臼骨折合并C型骨盆骨折的有效治疗手段,在手术入路及手术具体策略中应遵照个体化原则。     

恶性肿瘤病人凝血指标分析及临床意义

目的探讨恶性肿瘤患者凝血功能检测的变化及其临床意义。方法采用磁珠凝固法测定44例恶性肿瘤患者及33例健康体检者的血浆凝血酶原时间（PT）、部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）和纤维蛋白原（Fib）。结果恶性肿瘤组PT、TT、APTT与对照组比较无显著性差异;Fib结果较正常对照组增高,差异有显著性。结论监测Fib对预防恶性肿瘤的高凝状态、临床治疗效果及预后判断有一定的实用价值。     

清创性肝切除术治疗严重肝外伤

回顾分析21例严重肝外伤病例行肝切除术的临床资料,认为清创性肝切除术是治疗严重肝外伤的有效方法,及时准确处理并发症能提高疗效.     

慢性移植肾肾病患者将环孢素A转换为他克莫司的临床观察

目的 探讨慢性移植肾肾病（CAN）患者以他克莫司（FK506）替换环孢素A（CsA）的临床效果。方法 根据是否以FK506来替换CsA，将97例诊断为CAN的患者分成两组，CsA组39例，维持原免疫抑制方案（CsA、霉酚酸酯和泼尼松联用）不变，采用替换方案的FK506组58例，除将CsA切换为FK506外，其它用药同CsA组。两组均随访1年以上，监测血胆固醇总量（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、尿素氮、肌酐、白蛋白及24h尿蛋白定量等生化指标的变化情况，观察随访期间药物的不良反应。结果 CsA组的血脂水平无明显变化，而FK506组除HDI，外，TC、LDL及TG等均较CsA组有不同程度的下降（P〈0．05，P〈0．01）。CsA组血肌酐继续上升，而FK506组的血肌酐下降，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；CsA组有3例移植肾功能丧失。FK506组需用降压药维持血压的例数少于CsA组（P〈0．05）；FK506组血清白蛋白水平显著高于CsA组（P〈0．05），24h尿蛋白定量显著低于CsA组（P〈0．01）。FK506组震颤发生率较CsA组高（P＜0．01），而高血压、毛发增多及牙龈增生的发生率均显著低于CsA组（P＜0．05）。结论 CAN患者在以FK506替换CsA后，脂质代谢异常等到明显改善，肾功能减退得到延缓。     

血管紧张素转换酶基因多态性与糖尿病及其肾脏合并症发病的关系

目的探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因插入／缺失（Ｉ／Ｄ）多态性与Ⅱ型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）及其肾脏合并症发病的关系。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增技术检测了１０９例ＮＩＤＤＭ患者及１５５例健康对照者的ＡＣＥ基因Ｉ／Ｄ多态性。结果位于ＡＣＥ基因第１６内含子的Ｉ／Ｄ多态性经ＰＣＲ技术扩增后分为三种基因型：纯合子缺失型（ＤＤ）,纯合子插入型（Ｉ）及杂合子插入／缺失型（ＩＤ）。１０９例ＮＩＤＤＭ患者与１５５例正常对照组之间基因型及等位基因频率差异均无显著意义;ＮＩＤＤＭ合并肾病者（ＤＮ）的基因型与未合并肾病者无显著性差异,但等位基因则有显著性差异（Ｄ、Ｉ等位基因为０４５和０５５对０３０和０７０）（Ｐ＜００２）;ＮＩＤＤＭ病程≤１年即伴有肾病者与病程≥５年仍无肾病者比较,ＤＤ型及Ｄ等位基因均显著高于无肾病组（Ｐ均＜００５）,后者以Ｉ型及Ｉ等位基因占绝对优势。结论ＡＣＥ基因多态性与ＮＩＤＤＭ发病无关,而与其肾脏合并症则明显相关,ＤＤ型是ＤＮ的易感基因,而Ｉ型则为其保护基因。     

早期移植肾功能异常的相关因素及其预后

目的 探讨早期移植肾功能异常的相关因素及其对移植肾长期存活的影响。方法 根据术后６个月内有无发生急性排斥反应和６个月时的血肌酐水平（ＳＣｒ６月）,将２５１例肾移植患者分为４组：Ａ、Ｂ组未发生急性排斥反应,前者ＳＣｒ６月〈１３０μｍｏｌ／Ｌ,后者ＳＣｒ６月≥１３０μｍｏｌ／Ｌ;Ｃ、Ｄ组为４组：Ａ、Ｂ且未发生急性排斥反应,前者ＳＣｒ６月〈１３０μｍｏｌ／Ｌ,后者ＳＣｒ≥１３０μｍｏｌ／Ｌ。术后各组的免     

树突状细胞与肠源性感染

树突状细胞（DC）广泛分布于整个肠道，是体内功能较强的抗原呈递细胞，在肠黏膜屏障中扮演着重要的角色。肠源性感染一般认为是肠黏膜屏障失常后细菌移位所致。因此，DC可能参与了肠源性感染的发生，对DC进一步深入研究，有助于发现新的肠源性感染治疗方法。