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9.1C3/LAIR-1的真核表达、纯化及单克隆抗体的制备和鉴定 总被引：2，自引：1，他引：2
目的 表达并纯化9.1C3/LAIR-1胞膜外区与人IgCl Fc段的融合蛋白，轩针对9.1C3/LAIR-1胞膜外区的单克隆抗体（mAb)。方法 构建真核表达载体pIg/3C-9.1C3/LAIR-1,表达并纯化9.1C3/LAIR-1－Fe融合蛋白。以9.1C3/LAIR-1－Fc融合蛋白免疫BALB／c小鼠，制备。以间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性，以竞争结合实验鉴定mAb识别LAIR－1的表位。结果表达并经9.1C3/LAIR-1－hIgFc融合蛋白，以其免疫BALB／c小鼠，获得1株针对9.1C3/LAIR-1胞膜外区的mAb 4H7。4H7对HL－60细胞和经9.1C3/LAIR-1 cDNA转染的COS7 的表位识别，与已报道的抗9.1C3 mAb体不同。 结论 成功地构建了9.1C3/LAIR-1胞膜外区基因的真核表达载体，并表达纯化了9.1C3/LAIR-1－hIgFc融合蛋白。获得一株针对9.1C3/LAIR-12胞膜外区的mAb，为进一步研究9.1C3/LAIR-1分子的2结构和功能提供了新的手段。 相似文献
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血小板是血液系统重要的组成部分,机体通过巨核系造血维持血小板数量。血小板在止血、血栓形成、创伤修复、固有免疫应答以及肿瘤转移等过程中发挥重要作用。巨核系造血受造血微环境中的细胞因子、黏附分子和细胞外基质(ECM)等多种因素的复杂调控,这些调控机制的异常可导致多种巨核/血小板谱系相关疾病的发生。近年来巨核系造血研究进展迅速,对血小板发育成熟过程及其调控机制的深入研究具有重要的理论意义和临床价值。现就近年来巨核系造血调控机制研究的进展作一综述。 相似文献
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目的探讨解脲脲原体(Uu)、人型支原体(Mh)感染的性别差异、耐药情况,为药物的合理使用提供依据。方法对1366人份的泌尿生殖道标本进行Uu、Mh培养及药敏试验。结果支原体的感染率存在性别差异,女性高于男性。在Uu、Mh体外药物敏感试验中美满霉素、强力霉素和交沙霉素的抑制效果均较好且敏感率接近,而喹诺酮类和大环内酯类中的其他4种药物分别对Uu和Mh的敏感性较差。结论交沙霉素对支原体的抑制效果最好且副作用少,美满霉素、强力霉素次之。 相似文献
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目的:研究宫颈癌患者外周血T淋巴细胞亚群的变化,探讨肿瘤免疫逃逸与宫颈癌发病机制的关系。方法:采用免疫荧光法及流式细胞术分别检测30例子宫平滑肌瘤、32例CIN III级和35例宫颈癌患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞的分布变化。结果:(1)与子宫肌瘤组比较,宫颈癌组外周血CD4+T细胞百分比升高(P<0.05);CD4+T细胞百分比在宫颈癌组和CIN III组之间无明显差异(P>0.05)。(2)CD8+T细胞百分比在子宫肌瘤与宫颈癌组之间、宫颈癌组与CIN III组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:宫颈癌患者外周血T细胞各亚群比例重新分布,通过使CD4+T细胞百分比升高,影响了体内的抗肿瘤的免疫应答、参与了肿瘤免疫逃逸。而在宫颈原位癌进展至浸润癌的过程中,体内免疫功能的无显著变化,推测还有其他因素综合作用参与宫颈癌的发病机制。 相似文献
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目的 研究白细胞相关免疫球蛋白样受体(LAIR-1)在宫颈癌和子宫内膜癌患者外周血T细胞的表达情况,并与子宫肌瘤、子宫癌前病变患者相比较,探讨LAIR-1表达与肿瘤免疫的相关性.方法 密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测LAIR-1在196例肿瘤患者外周血T细胞的表达水平.结果 流式细胞术检测结果显示,宫颈癌和子宫内膜癌患者外周血CD3+CD4+T细胞LAIR-1阳性率均高于子宫肌瘤(P＜0.001;P＜0.05)和癌前病变患者(P ＜0.001;P ＜0.01).平均荧光强度分析结果显示,宫颈癌患者外周血CD3+CD4+T细胞LAIR-1表达水平显著高于癌前病变患者(P＜0.01),CD3+CD8+T细胞LAIR-1表达水平显著高于子宫肌瘤患者(P＜0.05)和癌前病变患者(P＜0.001).子宫内膜癌患者外周血CD3+CD4+T细胞LAIR-1表达水平明显高于子宫肌瘤患者(P＜0.05)和癌前病变患者(P＜0.01),CD3+CD8+T细胞LAIR-1表达水平高于癌前病变患者(P＜0.05).结论 LAIR-1在宫颈癌和子宫内膜癌患者外周血T细胞表达上调,提示LAIR-1可能与肿瘤免疫逃逸存在相关性. 相似文献
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目的：研究 LAIR-1和 TGF-β在口腔扁平苔藓（OLP）患者外周血中的表达情况,探讨 LAIR-1和 TGF-β对 OLP 患者免疫功能的影响。方法：采用流式细胞术检测 LAIR-1在 OLP 患者（n ＝22）和健康人（n ＝22）外周血 Treg 上的表达水平, ELISA 检测外周血 TGF-β的水平。结果：OLP 患者外周血 CD4＋Foxp3＋Treg 上 LAIR-1阳性率高于健康人,TGF-β的水平亦高于健康人,LAIR-1在 CD4＋Foxp3＋Treg 上的表达水平和 TGF-β的水平呈正相关（r ＝0．43,P ＜0．05）。结论：LAIR-1和TGF-β在 OLP 患者外周血中表达上调,提示 LAIR-1和 TGF-β可能参与了 OLP 的发病。 相似文献
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目的检测复发性口腔溃疡(ROU)患者体内外周血IL-12的表达及辅助性T细胞(Th)表面白细胞介素12受体(IL-12R)的表达情况,探讨IL-12及其受体对ROU患者的Th细胞的免疫失衡产生的影响。方法分离滨州医学院附属医院20例ROU患者和健康人的外周血单个核细胞,采用流式细胞术测定CD4+T细胞上IL-12R的表达量,ELISA检测外周血IL-12的表达水平。结果 ROU患者Th细胞表面的IL-12R表达水平高于正常对照组,ROU患者外周血IL-12的表达低于正常对照组,两结果均具有统计学意义(P<0.05)。结论 ROU患者体内免疫紊乱,IL-12及其受体的异常表达与疾病相关,为ROU患者的治疗寻找新的干预手段提供了理论依据。 相似文献
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沉默白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)在卵巢癌H08910细胞的表达,探讨其对卵巢癌细胞增殖功能的影响。构建LAIR-1的shRNA慢病毒表达载体,转染人浆液性卵巢癌细胞系H08910。RT-PCR和Western blot检测H08910细胞中LAIR-1分子的沉默效率;采用PI染色法和MTT法检测沉默LAIR-1表达对HO8910细胞周期及增殖功能的影响。成功建立沉默LAIR-1分子表达的稳定HO8910细胞株。与阴性对照组比较,转染LAIR-1-shRNA慢病毒载体的HO8910细胞中LAIR-1的mRNA及蛋白水平表达均明显降低(P<0.05)。LAIR-1-shRNA组G1期细胞数目明显低于CON组和NCshRNA组(P<0.05);沉默LAIR-1分子表达后,LAIR-1-shRNA HO8910细胞的增殖率明显高于NC-shRNA HO8910组和空白对照组(P<0.05)。沉默卵巢癌细胞HO8910LAIR-1分子表达可明显增强细胞增殖的能力,提示卵巢癌细胞表达的LAIR-1可能对癌细胞的生物学功能发挥抑制作用。 相似文献
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目的探讨慢性上颌窦炎患者上颌窦内细菌学分析及药敏实验情况。方法选择156例慢性上颌窦炎手术患者,在术中取上颌窦内分泌物行需氧菌、厌氧菌与真菌培养和药敏试验。结果慢性上颌窦炎患者156例中有112例患者培养出致病菌,细菌检出率为71.8%,主要为革兰氏阳性菌;同时也检出了厌氧菌和真菌,主要为表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等。术中检出的革兰氏阳性需氧菌对万古霉素、左氧氟沙星、呋喃妥因、环丙沙星、苯唑西林这些抗生素比较敏感。结论慢性上颌窦炎患者发病与致病菌有一定的关联,围手术期使用对致病菌比较敏感的抗生素能够起到较好的效果。 相似文献
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目的 研究抑制性受体LAIR-1在巨核谱系细胞的表达及其对巨核细胞分化的调节作用。方法 采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测LAIR-1在巨核谱系细胞的表达；免疫磁珠法纯化脐血CD34+细胞，体外无血清培养系统诱导CD34+细胞向巨核细胞分化，观察LAIR-1被抗体或配体交联激活后对巨核细胞分化的影响。结果 LAIR-1表达于人骨髓CD34+CD41a+和CD41a+CD42b+细胞以及脐血CD34+CD41a-和CD34+CD41a+细胞；脐血CD34+细胞向巨核细胞分化过程中，LAIR-1表达在倍性为2N和4N的不成熟CD41a+细胞上；交联激活LAIR-1分子能够抑制脐血CD34+细胞向巨核细胞的分化。结论 LAIR-1可能是参与巨核细胞早期分化发育的一种新的负调控分子。 相似文献