华南地区哮喘患者控制感知力及影响因素分析

目的调查华南地区哮喘患者哮喘控制感知力(PCA)水平,探讨影响PCA水平的主要因素。方法入选我院门诊2009年3月～2010年4月就诊150例哮喘患者,年龄19～65(38.6±11.7)岁,男86例,女64例;间歇和轻度持续患者46例、中度持续49例、重度持续55例,调查其人口学特征、完成哮喘控制感知力问卷(PCAQ-6)、哮喘控制问卷(ACT)、标准化哮喘患者生活质量问卷(AQLQ(S)),并收集患者填写问卷当日肺功能检查结果、外周血、诱导痰细胞分类计数。结果我院150例符合入组条件患者均完成PCAQ-6填写及上述指标采集,PCAQ-6评分范围在10～26(18.75±3.42)分。男性(18.6±3.28)分,女性(18.95±3.6)分,显著低于国外调查水平(P<0.001)。PCA与哮喘控制水平(rp=0.377,P=0.000)及哮喘相关生活质量(rp=0.675,P=0.000)显著相关。多元线性回归分析结果示:PCA与FEV1占预计值百分比(FEV1%)及与外周血嗜中性粒细胞百分比显著正相关,而与哮喘病程(年)显著负相关。结论我国华南地区哮喘患者PCA水平低下,PCA可影响哮喘控制水平及哮喘生活质量,哮喘病程(年)及肺功能水平及外周血中性粒细胞百分比是PCA主要影响因素。     

呼出气冷凝液中亚硝酸盐在判定哮喘严重程度中的作用

目的 探讨哮喘患者呼出气冷凝液(EBC)中亚硝酸盐(NO2-)浓度与疾病严重程度的关系.方法 实验共纳入60名哮喘急性发作期患者(其中轻、中、重度患者分别为23、21、16名)和23名健康非吸烟者,哮喘患者就诊或入院初检测并记录肺功能;用EBC收集仪器采集标本,一氧化氮检测试剂盒及分光光度法测定EBC中NO2-的浓度;采用瑞氏染色计诱导痰嗜酸粒细胞百分比(Eos%).对NO2-浓度与诱导痰中Eos%、呼出50%肺活量时流速(MEF50%)及FEV1占预计值百分比(FEV1%)做相关性分析.结果 哮喘患者EBC中N2-浓度和诱导痰中Eos%显著高于健康对照组(P<0.01),轻度、中度和重度患者之间比较差异均有统计学意义(P<0.01),且病情越重,两指标数值越高.哮喘患者EBC中NO2-浓度与诱导痰中Eos%呈显著正相关(r=0.706,P<0.01);与MEF50%及FEV1%呈显著负相关(r=0.806,P<0.01;r=0.724.P<0.01).结论 哮喘患者EBC中NO2-能作为评估急性哮喘严重程度的有效指标之一.     

二甲亚砜诱导人支气管上皮细胞炎症因子胸腺基质淋巴细胞生成素的表达

目的 探讨二甲亚砜(DMSO)对人支气管上皮细胞炎症关键分子--胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达的影响.方法 用不同浓度DMSO(0.1%、1%、2.5%)孵育人支气管上皮细胞,分为对照组和各浓度组,收集细胞及上清液后,采用实时定量PCR检测细胞TSLPmRNA表达水平,ELISA技术检测细胞培养上清中TSLP浓度.结果 DMSO显著诱导人支气管上皮细胞TSLPmRNA表达(P＜0.01),并呈浓度依赖性.分泌型TSLP水平也随之增高(P＜0.01).高浓度DMS0对细胞生长有抑制作用.结论 DMSO可能影响了支气管上皮细胞的免疫调节功能.     

鲍曼不动杆菌外膜蛋白CarO的原核表达、纯化和多克隆抗体的制备

目的 表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的鲍曼不动杆菌杆菌外膜蛋白Caro(-binding protein)融合蛋白并制备抗Caro多克隆抗体,为研究临床鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制奠定基础.方法 构建pET23d-CarO重组表达质粒,转入大肠埃希菌BL21(DE3),以IPTG诱导6×His-CarO融合蛋白表达,经镍离子金属螯合树脂纯化后,用纯化出的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,Western印迹检测多克隆抗体的特异性.结果 在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的His-CarO融合蛋白,经亲和树脂纯化后免疫新西兰大白兔,获得了高特异性的抗CarO抗血清.结论 成功构建pET23d-CarO原核表达质粒,表达并纯化出目标蛋白,制备出高特异性的多克隆抗体.     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌医院获得性肺炎的危险因素及预后分析

目的 探讨耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌(cRAB)医院获得性肺炎的危险因素及预后因素.方法 采用病例对照研究,收集广州南方医院2005年1月～2()07年12月CRAB引起的医院获得性肺炎44例,并随机选择同时期碳青霉烯敏感的鲍曼不动杆菌(cSAB)医院获得性肺炎66例作为对照,采用单因素分析(t检验和x2检验)及多因素Logistic回归进行分析.结果 单因素分析发现,APACHEⅡ评分≥16分、慢性肺部疾病(COPD/支气管扩张)、分离出致病菌前15 d用过亚胺培南/美罗培南、氟喹诺酮类抗生素以及早期联用抗生素与CRAB感染有关.多因素Logistic:回归分析发现,APAcHEⅡ评分≥16分(OR=6.41,95%CI2.20～18.67)以及分离出致病菌前15 d用过亚胺培南/美罗培南(OR=6.33,95%CI1.83～21.87)是独立危险因素.44例感染CRAB患者中,死亡14例,存活30例.单因素分析发现:脏器衰竭以及治疗3 d后临床肺部感染评分(CPIS)升高与CRAB感染死产有关.多因素Logistic回归分析发现,治疗3 d后CPIS升高(OR=7.01,95%CI1.23～40.03)是独立预后因素.结论 APACHEⅡ评分≥16分以及分离出CRAB前15 d用过亚胺培南/美罗培南是CRAB感染的危险因素.治疗3 d后CPIS升高是CRAB感染的预后因素.     

表皮生长因子受体参与屋尘螨诱导的气道上皮屏障破坏的机制

目的 探讨屋尘螨(HDM)对肌动蛋白应力纤维(F-actin)重新排布的影响及表皮生长因子受体(EGFR)相关信号通路在其中的作用.方法 选取正常人支气管上皮细胞系16HBE细胞为研究对象,以HDM刺激细胞,予EGFR抑制剂AG-1478进行预处理,实验分为4组:Control组,AG-1478组,HDM组,AG-1478+HDM组,应用Western blotting检测HDM对磷酸化(p-)EGFR、F-actin及粘附连接蛋白E-cadherin和β-catenin表达的影响,应用免疫荧光技术观察F-actin、E-cadherin及β-catenin的分布变化,并测量16HBE细胞层的跨上皮电阻(TER)值和右旋糖苷(FITC-DX)的透过率.结果 HDM刺激细胞10 min时,p-EGFR表达明显增多(P<0.05),E-cadherin(P>0.05)及β-catenin(P>0.05)蛋白表达无明显改变,免疫荧光示HDM刺激后E-cadherin及β-catenin均发生分布异常,由胞膜向胞浆弥散.HDM组TER值(70.00±4.33)%显著下降,FITC-DX透过率(115.98±4.34)%明显增加,加入EGFR抑制剂后E-cadherin和β-catenin的分布异常及TER值(90.00±3.75)%、FITC-DX(101.10±2.10)%透过率均明显改善.HDM刺激后促进F-actin表达增多并出现重新排布,而EGFR抑制剂可明显抑制这一过程(P<0.05).结论 表皮生长因子受体相关信号通路参与了屋尘螨介导肌动蛋白应力纤维的重新排布,并导致气道上皮屏障破坏.     

呼吸道合胞病毒对人支气管上皮细胞通透性的影响

目的 探讨呼吸道合胞病毒对支气管上皮细胞通透性的影响.方法 通过ELISA、荧光定量PCR检测呼吸道合胞病毒感染人支气管上皮细胞后对其血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,同时,通过检测细胞的跨膜电阻了解呼吸道合胞病毒对人支气管上皮细胞通透性的影响.结果 呼吸道合胞病毒增加了人支气管上皮细胞VEGF的表达,增加了支气管上皮细胞的通透性,VEGF的单克隆抗体可以明显阻断这一效应.结论 呼吸道合胞病毒通过上调VEGF的表达增加对支气管上皮细胞的通透性.     

聚肌胞对RSV感染哮喘加重小鼠气道分泌TSLP和炎症的影响

目的探讨聚肌胞(poly I:C)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染哮喘加重小鼠气道分泌胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)和气道炎症的影响。方法雌性BALB/c小鼠32只,随机分成4组:分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、鸡卵白蛋白(OVA)组、OVA/RSV组、OVA/RSV/polyI:C组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘,聚肌胞1mg/kg肌肉注射;无创肺功能检测各组小鼠气道反应性;ELISA法检测小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ水平;ELISA法检测气管灌洗液(BALF)中TSLP含量;BALF行细胞分类计数;病理观察小鼠肺组织炎症反应,免疫组化观察小鼠气道上皮细胞TSLP表达水平。结果无创肺功能检测显示聚肌胞抑制RSV感染哮喘加重小鼠气道反应性的增高,OVA/RSV/polyI:C组小鼠Penh值明显低于OVA/RSV组(P<0.01);OVA/RSV/polyI:C组小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13和BALF中TSLP浓度均明显低于OVA/RSV组(P<0.05);OVA/RSV/poly I:C组小鼠BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞数及淋巴细胞数明显少于OVA/RSV组(P<0.05);病理观察显示聚肌胞减轻RSV感染哮喘小鼠气道炎症细胞浸润;免疫组化染色证实聚肌胞抑制RSV感染哮喘小鼠气道上皮细胞TSLP表达。结论聚肌胞前期注射减少RSV感染哮喘加重小鼠气道上皮细胞表达TSLP,抑制哮喘小鼠气道炎症反应。     

动脉导管未闭合并右心感染性心内膜炎误诊为肺结核1例分析

对动脉导管未闭合并右心感染性心内膜炎误诊为肺结核1例分析如下。1病历摘要男,18岁。因左侧胸痛5 d于2010-09-02入住外院。患者于2010-08-25自觉轻微发热、乏力、咽痛等感冒症状,未予重视。2010-08-27突然出现左侧胸部持续性疼痛,体位改变及深吸气时加重,活动后气促,无畏寒、发热、盗汗、咳嗽、咳痰。既往体健,过去史、个人史、家族史无特殊。查体:左下肺呼吸音减弱     

小气道阻塞的可逆性及气道阻力在支气管哮喘诊断中的价值

我们在临床上对12例确诊哮喘息者行支气管舒张试验时，发现有4例支气管舒张试验时FEV1缓解达不到15％，但反应小气道阻塞的指标改善较明显，现报道如下。1对象与方法哮喘发作期患者4例，男3例，女1例，年龄27～4O岁，均符合1992年全国哮喘会议的诊断标准1～4条。试验前停用支气管扩张剂24h。采用美国美加公司产6200AutoboxDL体积描记仪（体描仪）测定肺功能获基础值，休息片刻，吸入喘乐宁（Ventolin）0．2mg，10min后重测肺功能。各项肺功能参数的改善率是以该参数用药前后的差值，并用其基础值的百分数来表示，如：FEV1．0％CH＝（…