抑制TAK1可加重甲苯二异氰酸酯诱导的哮喘小鼠气道炎症

目的 探讨转化生长因子β激活激酶1（TAK1）对甲苯二异氰酸酯（TDI）哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 建立TDI哮喘小鼠模型,为探讨TAK1在TDI哮喘模型中的作用,将32只小鼠随机分为4组（8只/组）：AOO组,AOO+5Z-7-Oxozeaenol组,TDI组,TDI+5Z-7-Oxozeaenol组;为进一步探讨RIPK1在体内模型的作用,将另外32只小鼠随机分为4组（8只/组）：AOO组,TDI组,TDI+5Z-7-Oxozeaenol组,TDI+5Z-7-Oxozeaenol+Necrostatin-1组。每次激发前使用TAK1抑制剂（5Z-7-Oxozeaenol,5 mg/kg）和/或RIPK1抑制剂（Necrostatin-1,5 mg/kg）。检测各组小鼠气道反应性、气道炎症及气道重塑等指标。体外实验：配制TDI-人血清白蛋白（TDI-HSA）复合物联合TAK1抑制剂处理小鼠单核巨噬细胞（RAW264.7）,通过CCK8检测各组细胞活力,通过Western blot检测各组TAK1、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）及受体相互作用丝/苏氨酸蛋白酶1（RIPK1）相关信号通路分子表达情况;使用RIPK1抑制剂进一步评估对细胞活力及TDI哮喘模型的影响。结果 与单独TDI致敏激发哮喘小鼠相比,TAK1抑制剂加重了小鼠气道炎症、气道高反应性及气道重塑（P<0.05）。抑制TAK1降低了RAW264.7细胞活力,与TDI-HSA共同处理进一步降低（P<0.05）。抑制TAK1降低了TDI-HSA诱导的TAK1磷酸化水平及MAPK信号通路的活化（P<0.05）。TAK1抑制剂与TDI-HSA共同处理后,RIPK1磷酸化水平升高,同时Caspase 8持续活化（P<0.05）;使用RIPK1抑制剂可以恢复TAK1抑制剂与TDI-HSA共同处理引起的细胞活力的减低（P<0.05）。体内RIPK1抑制剂亦可以减轻TAK1抑制剂对TDI哮喘小鼠气道炎症的加重（P<0.05）。结论 抑制TAK1可能通过增加RIPK1的活性,引起Caspase 8的持续活化而增加巨噬细胞的死亡,参与促进TDI诱导的哮喘小鼠气道炎症。     

TSLP siRNA干预对哮喘模型大鼠气道重塑的作用及对ERK信号通路的影响

目的 分析胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)小干扰RNA(siRNA)干预对哮喘模型大鼠气道重塑的作用及对细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的影响.方法 选取清洁及健康的雄性大鼠56只,随机选取14只为正常组,剩余42只建立哮喘模型,分为模型组、空白对照组和TSLP siRNA干预组,各14只.Im-age-Pro Plus软件计算出大鼠的小气道支气管壁总管壁面积、小气道支气管壁内管壁面积和支气管壁平滑肌的面积,生理记录仪记录大鼠的肺顺应性和肺弹性阻力,显微镜下观察大鼠白细胞数量、嗜酸性粒细胞(EOS)数量,并计算出EOS/白细胞的值,Western blot法检测细胞外信号调节激酶-1(ERK1)、伤害性信息与即刻早期基因(C-FOS)、血小板衍生因子(PDGF)蛋白水平表达.结果 与模型组、空白对照组相比,TSLP siRNA干预组小气道支气管壁总管壁面积、小气道支气管壁内壁面积、支气管壁平滑肌面积均减小,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组、空白对照组相比,TSLP siRNA干预组肺顺应性均升高,肺弹性阻力均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组、空白对照组相比,TSLP siRNA干预组白细胞、EOS/白细胞均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组、空白对照组相比,TSLP siRNA干预组ERK1、C-FOS、PDGF通路蛋白均降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TSLP siRNA干预通过调控ERK信号通路相关蛋白,改善气道重塑指标,提高大鼠的肺顺应性,降低大鼠的肺弹性阻力,抑制炎性反应.     

过氧化氢PI3K依赖性促进人支气管上皮细胞血管内皮生长因子表达

目的探讨过氧化氢(H2O2)对人支气管上皮细胞(HBE)VEGF表达的影响及可能的分子调控机制。方法四唑盐(MTT)比色法检测不同H2O2浓度对正常人支气管上皮细胞株HBE135-E6E7活力的影响;实验分4组:正常组,50μmol/L、200μmol/L和600μmol/L,分别处理HBE24h,RT-PCR检测VEGF及β-actin基因表达水平;选择基因表达水平影响较大的50μmol/LH2O2处理细胞24h,双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)选择性抑制剂Ly294002对H2O2诱导VEGF表达的影响。结果在200μmol/L以下H2O2对细胞活力无显著影响。HBE135-E6E7组成性表达VEGF189和VEGF165。VEGF165 mRNA表达在正常组,50、200和600μmol/L分别为0.379±0.044,0.791±0.042,0.585±0.133,0.720±0.0213VEGF189 mRNA表达在4组中分别为:0.193±0.018,0.270±0.012,0.205±0.074,0.302±0.035。相对于对照组,VEGF165、VEG...     

噻托溴铵粉吸入剂对稳定期支气管扩张患者的临床疗效

目的 观察噻托溴铵对稳定期支气管扩张患者的临床疗效.方法 将22例稳定期支气管扩张患者,予以噻托溴铵粉吸入剂18μg每日1次吸人治疗.于研究第1天、第28天检测1 s用力呼气量(FEV1)、FEV1占预计值的百分比[FEV1(%)]、用力呼气量(FVC)、FEVI/FVC等指标及记录症状评分表,记录BODE指数.结果 22例患者使用噻托溴铵1月后FEV1%与使用前对照有所改善,但无统计学意义(t=1.857,P>0.05);症状评分用药后1月与用药前比较降低,具有统计学意义(t=7.091,P<0.001);BODE指数用药后1月较用药前降低(t=2.982,P<0.05).结论 长期规律使用噻托溴铵粉吸入剂,能改善支气管扩张患者的临床症状,改善BODE指数,从而改善患者的运动耐量及生活质量.     

应用抑制消减杂交技术构建哮喘病人嗜酸细胞差异表达基因消减cDNA文库

目的构建哮喘病人治疗前后嗜酸细胞差异表达基因的消减cDNA文库。方法采用新近建立的抑制消减杂交方法,哮喘治疗前后的嗜酸细胞为试验和对比材料,分离哮喘病人嗜酸细胞中差异表达基因的cDNA片段,将其与T载体进行T／A连接构建文库,将连接产物用氯化钙转化法转化大肠杆菌进行文库扩增和蓝白斑筛选,随机挑取100个白色克隆用菌落PCR进行鉴定。结果扩增消减cDNA文库获得3000余个白色阳性克隆,随机挑取100个白色克隆用PCR进行扩增,90％的克隆中均有200～600bp的插入片段,这些片段可能是哮喘嗜酸细胞差异表达基因的cDNA片段。结论用SSH法及T／A克隆技术成功构建了哮喘病人治疗前后嗜酸细胞差异表达基因消减cDNA文库,该消减cDNA文库的建立为进一步筛选、克隆哮喘病人嗜酸细胞差异表达的新基因奠定了基础。     

Slingshot-1L在哮喘病人外周血嗜酸粒细胞的表达及其功能

目的探讨Slingshot-1L（SSH-1L）在哮喘病人外周血嗜酸粒细胞（EOS）的表达及其功能。方法抽取15例正常自愿者（正常组）及30例哮喘病人（未经糖皮质激素治疗组15例,已予糖皮质激素治疗15例）外周静脉血各30ml进行EOS的分离纯化并计数．提取其总RNA及总蛋白进行特异性片段SSH—1L的RT—PCR扩增及Westem blotting,从基因和蛋白水平比较不同组别之间SSH—1L表达的变化。结果未治疗组EOS的SSH—1L／β-Actin灰度值比与正常组及治疗组比较均显著升高（P〈0．05）,治疗组EOS的SSH-1L／β-Actin灰度值比与正常组比较无显著差异（P〉0．05）,未治疗组蛋白样品SSH—1L光密度值（Dλ值）比正常组及治疗组显著升高（P〈0．05）,正常组蛋白样品SSH—1L OD值与治疗组比较无显著差异（P〉0．05）。结论SSH—1L在急性发作期哮喘病人外周血EOS表达明显增高,可能在EOS激活、迁移上发挥重要作用。     

健康人群和慢性阻塞性肺疾病患者的血清维生素D与血嗜酸性粒细胞计数的关系

目的 探讨健康人群和慢性阻塞性肺疾病（COPD)患者血清维生素D缺乏情况及与血嗜酸性粒细胞（EOS）的关系。方法 收集南方医科大学南方医院体检中心2017年10月～2021年12月的健康人6163名,男性3781名,女性2382名。根据血清25(OH)D水平分为严重缺乏组（<10 ng/mL）、缺乏组（<20 ng/mL）、不足组（<30 ng/mL）和正常组（≥30 ng/mL）。回顾性纳入2021年4月～2021年6月在我院呼吸科门诊就诊的COPD患者67人为疾病组,并1∶1选取了同期在我院体检中心的67人作为对照组。记录血常规、体质量指数（BMI）等数据。结果 健康人群血清25(OH)D(<30 ng/mL)总体缺乏率（包括缺乏和不足）为85.31%,女性缺乏率为89.29%,显著高于男性。6、7、8月份血清25(OH) D水平明显高于12、1、2月份。健康人中血EOS水平在血清25(OH)D严重缺乏组最低,不足组和缺乏组次之,正常组最高（P<0.05）。多重回归分析显示年龄更大、BMI更高及维生素D水平升高均是血EOS升高的危险因素。COPD组（1...     

濒死性哮喘的治疗

致死性哮喘(fatal asthma,FA)是支气管哮喘(简称哮喘)中最严重的类型,即使是病情较轻的患者也有一定程度的致死性危险.FA表现为起病突然,症状恶化迅速,患者常在数小时甚至数分钟内发生呼吸衰竭或窒息,病死率高.美国胸科协会(ATS)定义的FA是哮喘严重恶化并伴有一项以下情况:①呼吸暂停;②需要机械辅助通气;③高碳酸血症,动脉血气分析提示PaCO2>6.65 kPa(50 mmHg),或呼吸性酸中毒pH<7.30;④死亡.同时需要排除合并其他严重急性疾病,例如心脏病及难以鉴别的因慢性阻塞性肺疾病等引起的气道高反应性[1].FA又分为慢发-晚达型和突然发病型(又称突发急进型,从发作至死亡0.5～3 h,占10%～20%).而濒死性哮喘(near-fatal asthma,NFA)是指哮喘严重急性加重出现持续状态并呼吸衰竭,表现为急性呼吸衰竭、低氧血症和(或)高碳酸血症(呼吸性或代谢性)、呼吸困难、反常呼吸、意识障碍等.     

高迁移率族蛋白B1在肺部疾病中的研究进展

高迁移率族蛋白B1具有增加抗原的免疫原性、促进炎症介质基因表达及炎症介质的释放、促进树突状细胞和Th1细胞极化成熟与促进纤维分化的功能,其在脓毒症、肾肝纤维化、动脉粥样硬化、血管损伤后再狭窄、神经发育、肿瘤转移以及类风湿性关节炎等疾病中起重要作用,而其是否在肺部疾病中起作用的研究尚开始,现就高迁移率蛋白B1在肺部疾病的研究进展作一介绍.     

慢性阻塞性肺疾病合并症——认知障碍

慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并认知障碍的发病率较高,目前被证实有发展为痴呆症的可能,并且对患者的生活和COPD的疾病管理造成障碍,值得关注.基于其发病隐匿,易被临床医师及患者家属忽略,增加其诊治难度,现对其发病特点、影响、筛查和评估及治疗等方面的研究进展进行述评,为临床诊治提供参考.