湖北省HIV感染者接受抗病毒治疗后病毒载量及影响因素分析

目的 观察湖北省艾滋病病毒（HIV）感染者接受抗病毒治疗后病毒载量结果,分析治疗效果的影响因素。方法 对湖北省接受抗病毒治疗≥6个月的1 665例HIV感染者进行病毒载量检测,收集其人口学特征和病毒载量检测结果,分析抗病毒治疗失败的影响因素。结果 1 665例HIV感染者中,男性占73.3%,平均年龄为（50±15.1）岁,基线CD4⁺T淋巴细胞计数平均为（220.38±172.37）个/mm³。检测结果为病毒抑制失败率（VL≥1 000 copies/mL）占9.0%。多因素分析结果显示同性传播（OR=2.789）、异性传播（OR=5.019）、静脉吸毒传播（OR=12.867）、基线CD4⁺T淋巴细胞计数<50个/mm³（OR=1.773）是HIV感染者病毒抑制失败的危险因素。结论 湖北省HIV感染者抗病毒治疗效果较好,应注意鉴别可能导致治疗失败的原因,提高抗病毒治疗效果。     

SNAP-25基因克隆及其在大肠杆菌中的表达与鉴定

目的：构建SNAP-25基因的原核表达载体pET22b—SNAP-25,对表达产物活性进行初步鉴定。方法：根据GenBank中已报道的SNAP-25基因序列,设计特异引物,通过RT—PCR从小鼠全脑组织总RNA中得到基因。将全长基因克隆至原核表达载体pET22b中,重组质粒转化大肠杆菌E.coli如BL21感受态细胞,IPTG诱导表达,表达产物经Ni—NTA亲和层析进行纯化。通过SDS-PAGE和免疫印迹对其进行鉴定,并对该蛋白进行活性的初步分析。结果与结论：成功构建了原核表达载体pET22b—SNAP-25,Western印迹证实重组蛋白获得表达。表达的重组蛋白与A型肉毒毒素混合反应,经SDS—PAGE验证,重组蛋白具有被毒素特异性切割的活性。     

志贺毒素B亚单位及其模拟表位的制备和免疫保护效应

目的:对重组表达的StxB和预测的模拟表位肽进行免疫保护效应评价.方法:用分子生物学方法构建基因工程菌,IPTG诱导表达重组StxB,经复性后进行离子交换层析纯化.同时采用生物信息学手段对StxB的表位相关参数进行分析,预测StxB可能的抗原表位.以纯化的StxB和合成的模拟表位肤免疫小鼠后攻毒,评价StxB及其模拟表住肽的免疫保护效应.结果:表达并制备了90%以上纯度重组StxB;发现p14和p17多肽易形成转角和无规卷曲的柔性区段,可及性、极性和亲水性较强,是可能的抗原表位.免疫保护试验显示,经重组StxB和合成多肽免疫的小鼠发病延迟.症状减轻,存活率显著提高.结论:重组StxB和预测的模拟表住肽具有良好的免疫保护效果.为亚单位疫苗及其作用机制的研究奠定了基础.